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番石榴叶三萜化合物（PGL-15）对3T3-L1脂肪细胞分化及糖脂代谢的影响及其作用机制

作　者: 魏明
导　师: 叶春玲
学　校: 暨南大学
专　业: 药理学
关键词: 番石榴叶三萜化合物(PGL-15) 3T3-L1前脂肪细胞 细胞分化 糖脂代谢
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的：观察番石榴叶三萜化合物(PGL-15)对脂肪细胞分化和糖脂代谢的影响,并探讨其作用机制。方法：1.采用激素鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞,经油红O染色鉴定后,将成功分化的脂肪细胞分为含胰岛素组和不含胰岛素组,用葡萄糖氧化酶法检测不同浓度PGL-15(0.3μM、1μM、3μM、10μM、30μM)在有／无胰岛素刺激时对脂肪细胞葡萄糖消耗的影响。2.在诱导3T3-L1前脂肪细胞分化时将其分为溶媒对照和1μM、3μM、10μM、30μM浓度PGL-15组和罗格列酮10μM组,油红O染色后,通过比色法分析脂肪细胞的分化程度3.将成功分化的脂肪细胞分为分为溶媒对照和1μM、3μM、10μM、30μM浓度PGL-15组和罗格列酮10μM组,采用酶联免疫吸附法检测培养上清液中的游离脂肪酸浓度。4.将诱导分化的脂肪细胞分为溶媒对照、30μM PGL-15及10μM罗格列酮组,用RT-PCR法检测脂肪细胞PPAR-γ和GLUT-4 mRNA的表达。结果：1.成功建立了3T3-L1前脂肪细胞模型。诱导分化成熟的脂肪细胞胞浆丰富,含有大量的脂滴,脂滴分布于核周围,形成“戒指样”结构,为典型的成熟脂肪细胞形态,油红O染色后脂滴着红色。2.PGL-15能促进前脂肪细胞的分化。在3-30μM浓度范围内,PGL-15作用组的油红O染液吸光度值均显著高于溶媒对照组(P<0.05或P<0.01)。3.PGL-15能显著增加脂肪细胞的葡萄糖消耗量。不论是否存在胰岛素,1-30μMPGL-15各组的葡萄糖消耗量均显著高于相应的溶媒对照组(P<0.05或P<0.01),且各浓度PGL-15对脂肪细胞葡萄糖消耗量的影响明显强于不含胰岛素组(P<0.05或P<0.01)。该作用具有一定的剂量依赖性。4.PGL-15能显著抑制脂肪细胞产生游离脂肪酸。在3-30μM浓度范围,PGL-15的这一作用随着剂量增加而显著增强(P<0.05或P<0.01)；PGL-15 30μM组游离脂肪酸的含仅为对照组的47.2%,显著低于溶媒对照组(P<0.01)。5.与溶媒对照组相比,30μMPGL-15能显著增加脂肪细胞PPAR-γ及GLUT-4 mRNA的表达(P<0.05)。结论：1.经油红O染色鉴定,本实验成功建立了3T3-L1脂肪细胞模型。2. PGL-15可促进脂肪细胞分化,促进脂肪细胞对葡萄糖的消耗,减少脂肪细胞游离脂肪酸的产生。3. PGL-15的作用机制可能与其上调脂肪细胞PPAR-γ和GLUT-4 mRNA的表达、增加脂肪细胞对胰岛素的敏感性有关。

全文目录


目录  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
英文缩写及中英文对照  9-11
前言  11-20
  1.脂肪组织与胰岛素抵抗  11-12
  2.脂毒性  12-14
  3.过氧化物酶增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)  14-15
  4.葡萄糖转运体-4(GLUT-4)  15-17
  5.糖尿病的药物治疗  17-18
  6.番石榴叶提取物  18
  7.本课题研究思路及创新性  18-20
材料与方法  20-33
  1.实验材料  20-23
  2.实验方法  23-32
  3.统计学方法  32-33
结果  33-43
  1.3T3-L1前脂肪细胞分化前后形态学的变化  33-35
  2.3T3-L1前脂肪细胞生长曲线  35-36
  3.PGL-15对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗的影响  36-38
  4.PGL-15对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响  38-40
  5.PGL-15对3T3-L-脂肪细胞游离脂肪酸产生的影响  40-41
  6.PGL-15对3T3-L1脂肪细胞PPAR-γmRNA表达的影响  41
  7.PGL-15对3T3-L1脂肪细胞GLUT-4 mRNA表达的影响  41-43
讨论  43-49
  1.3T3-L1脂肪细胞模型  43-45
  2.PGL-15对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响  45-46
  3.PGL-15对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响  46-47
  4.PGL-15对3T3-L1脂肪细胞PPAR-γ mRNA及GLUT-4 mRNA表达影响  47-49
结论  49-50
参考文献  50-55
硕士期间发表的文章  55-56
致谢  56

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