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主动外排系统介导的鲍曼不动杆菌耐药机制研究

作　者: 张秀丽
导　师: 陈端；单斌；段勇；王玉明
学　校: 昆明医学院
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 鲍曼不动杆菌多重耐药外排泵AdeABC 外排泵AdeIJK 外排泵AbeM
分类号: R378.99
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

[目的]了解临床分离54株鲍曼不动杆菌的耐药现状及对外排泵底物的耐药分析；探讨主动外排泵基因adeB、adeJ、abeM的在鲍曼不动杆菌中的分布及其mRNA表达水平与该菌耐药性的关系。[方法]收集昆明医学院第一附属医院临床分离鲍曼不动杆菌54株,采用K-B法检测其对21种抗菌药物的药敏情况；用PCR方法扩增鲍曼不动杆菌外排泵编码基因adeB、adeJ、abeM的片段；荧光RT-PCR法检测外排系统基因mRNA的表达水平,采用分子克隆方法制作绝对定量标准品进行荧光定量,并分析外排系统基因mRNA的表达水平与该菌耐药性的关系。[结果]鲍曼不动杆菌的耐药检测及外排泵底物的药敏结果：1、16种常用抗菌药物药敏结果显示：庆大霉素(GEN)、甲氧苄啶／磺胺甲恶唑(SXT)、哌拉西林(PIP)、头孢曲松(CRO)、四环素(TCY)、头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(CTX)、妥布霉素(TOB)、阿米卡星(AMK)的耐药率高达70%左右,而对亚胺培南(IMP)、美洛培南(MEM)、头孢哌酮／舒巴坦(CSL),仍保持较高的敏感性,其耐药率均低于15%。54株鲍曼不动杆菌耐5类抗菌药物菌株15株(27.8%)、耐4类药菌株15株(27.8%)、耐2类药菌株9株(16.7%)、耐1类药菌株9(16.7%)、敏感株6株(11.1%)。2、54株鲍曼不动杆菌对三种外排泵底物共10种抗菌药物的耐药率依次从高到低为林可霉素(LIN)100.0%、利福平(RIF)98.2%、氯霉素(CHL)96.4%、庆大霉素(GEN)75.0%、四环素(TET)71.4%、红霉素(ERY)64.3%、阿米卡星(AMK)53.6%、妥布霉素(TOB)53.6%、环丙沙星(CIP)50.0%、左旋氧氟沙星(LVX)41.1%。外排蛋白编码基因adeB、adeJ、abeM的PCR扩增及RT-PCR定量其mRNA的表达水平与该菌耐药性分析结果：1.adeB基因在54株鲍曼不动杆菌中49株(90.7%)检测到,未检测到adeB基因的5株菌(9.3%)中,有4株是敏感株,1株为耐1类抗菌药物株。多重耐药株adeB基因mRNA的表达水平与敏感株、非多重耐药株均有显著性差异(P<0.05)；非多重耐药株与敏感株也有显著性差异(P<0.05)。外排泵AdeB的底物：庆大霉素、四环素、环丙沙星、左氧氟沙星,妥布霉素和阿米卡星在本次研究中,其mRNA表达水平耐药株与敏感株之间有显著性差异(P<0.05)。2、ade J基因本次研究显示54株均检测到。其mRNA表达水平耐药株与敏感株之间无显著性差异(P>0.05)。外排泵底物药物的耐药株与敏感株之间也无显著性差异(P>0.05)。3、abeM基因在54株中均检测到。其mRNA表达水平耐药菌株与敏感株有显著性差异(P<0.05)。外排泵AbeM的底物中环丙沙星、左氧氟沙星耐药株与敏感株abeM基因mRNA表达水平有显著性差异(P＜0.001)。[结论]鲍曼不动杆菌耐药形式严峻；其临床分离株普遍存在外排泵编码基因adeB、adeJ和abeM;主动外排泵AdeABC和AbeM可能是鲍曼不动杆菌发生耐药的机制之一。

全文目录

缩略语  5-7
中文摘要  7-9
英文摘要  9-12
论文正文:主动外排系统介导的鲍曼不动杆菌耐药机制研究  12-65
  前言  12-16
  第一部分鲍曼不动杆菌的耐药现状及对其外排泵底物的耐药分析  16-30
    1. 材料与方法  17-20
    2. 结果  20-27
    3. 讨论  27-30
  第二部分鲍曼不动杆菌外排泵基因adeB、adeJ、abeM的PCR检测  30-45
    1. 材料与方法  31-37
    2. 结果  37-44
    3. 讨论  44-45
  第三部分鲍曼不动杆菌外排泵基因adeB、.adeJ、abeM的mRNA表达研究  45-65
    1. 材料和方法  45-54
    2. 结果  54-62
    3. 讨论  62-65
结论  65-66
参考文献  66-71
文献综述  71-79
致谢  79

主动外排系统介导的鲍曼不动杆菌耐药机制研究

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