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不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌对血管内皮细胞功能影响的实验研究

作　者: 蔡树玉
导　师: 葛颂；杨德琴；何权敏
学　校: 遵义医学院
专　业: 口腔临床医学
关键词: 牙龈卟啉单胞菌 fimA基因型人脐静脉血管内皮细胞 ICAM-1 VCAM-1 IL-1β IL-6 TNF-α IL-8 MCP-1
分类号: R543.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 18次
引　用: 1次
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内容摘要

目的:观察不同fimA基因型P.gingivalis对HUVEC产生细胞粘附分子、促炎细胞因子和趋化因子的影响,探讨P.gingivalis在AS发生发展中的可能作用以及作为牙周炎与AS相关的物质基础的可能。方法:标准条件下厌氧培养ⅠfimA型(ATCC 33277)、ⅡfimA型(WCSP115)、ⅣfimA型(W83)P.gingivalis;体外培养并鉴定HUVEC。待HUVEC单层融合后,分别加入不同fimA基因型P.gingivalis,共同培养2h、6h、24h,采用ELISA测定培养上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-8、MCP-1的分泌量;FCM检测HUVEC表面ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达量并通过CLSM观察ICAM-1和VCAM-1的表达情况。结果:(1)P.gingivalis刺激下HUVEC表面ICAM-1表达增强,Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis的这种上调作用强于ⅠfimA型P.gingivalis。本研究条件下,Ⅰ、Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis刺激HUVEC表面VCAM-1的表达均较低,差异无统计学意义(P＞0.05)。CLSM显示,P.gingivalis刺激下HUVEC可见较多ICAM-1和VCAM-1荧光点表达,其中,Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis刺激下,HUVEC中ICAM-1和VCAM-1荧光点相对较多,分布范围广。(2)Ⅰ、Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis刺激HUVEC后,IL-1β、IL-6的分泌量均明显升高,Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis刺激HUVEC分泌IL-1β和IL-6的作用强于ⅠfimA型P.gingivalis。提示fimA基因型的差异可能导致P.gingivalis在调节HUVEC分泌致炎细胞因子的能力存在差异,进而导致内皮系统炎症免疫反应程度不同。(3)本研究条件下,Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis刺激HUVEC后,TNF-α分泌量明显升高,而ⅠfimA型P.gingivalis的这种上调作用不明显。提示ⅠfimA型P.gingivalis刺激HUVEC分泌TNF-α的能力可能弱于Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis。(4)P.gingivalis刺激HUVEC后,Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis调节HUVEC分泌IL-8和MCP-1蛋白量均明显升高。Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis诱导HUVEC分泌IL-8和MCP-1的能力强于ⅠfimA型P.gingivalis。提示fimA基因型的差异可能导致P.gingivalis在诱导HUVEC分泌趋化因子的能力不同,进而导致内皮组织炎症和免疫反应的强度存在差异。结论:具有不同牙周致病毒力的不同fimA基因型P.gingivalis对HUVEC功能的影响存在差异。ⅡfimA和ⅣfimA型P.gingivalis有较强上调HUVEC表达细胞粘附分子、分泌致炎细胞因子及趋化因子的能力,其作用强于ⅠfimA型P.gingivalis。提示P.gingivalis毒力和致病性与其fimA基因型相关,其中ⅡfimA和ⅣfimA型P.gingivalis可能与AS的发生发展密切相关。

全文目录

1 不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌对血管内皮细胞功能影响的实验研究  5-45
  1.1 英汉缩略词对照表  5-6
  1.2 中文摘要  6-8
  1.3 英文摘要  8-10
  1.4 前言  10-13
  1.5 材料与方法  13-20
  1.6 结果  20-34
  1.7 讨论  34-40
  1.8 结论  40-41
  1.9 参考文献  41-45
2 牙龈卟啉单胞菌在牙周炎与动脉粥样硬化相关性中作用机制的研究(综述)  45-54
3 致谢  54-55

不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌对血管内皮细胞功能影响的实验研究

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