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花背蟾蜍肾发生的组织学观察及相关活性物质的表达与调控

作 者: 贾艳芳
导 师: 俞诗源
学 校: 西北师范大学
专 业: 细胞生物学
关键词: 花背蟾蜍  组织发生 转化生长因子β 水通道蛋白2 Bax蛋白
分类号: Q954.6
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要


目的通过观察11个不同发育时期花背蟾蜍(Bufo raddei)组织的发生过程,检测转化生长因子β(TGF-β2、TGF-β3)、水通道蛋白2(AQP-2)和Bax蛋白在花背蟾蜍肾(小管)发生过程中的表达,探讨两栖类前肾的发生与退化,中肾发生及分化的规律和特点,并研究各种蛋白的生物活性作用及相互之间的调控意义。方法采用组织学方法观察不同发育时期花背蟾蜍肾组织的发生过程,应用免疫组织化学和体视学半定量检测TGF-β(β2、β3)、AQP-2及Bax蛋白在花背蟾蜍肾(小管)发生过程中的表达,用IPP专业图像分析软件,对其表达强度进行定量分析。结果(1)第18期花背蟾蜍蝌蚪前端体节处的生肾节细胞,形成成对分节排列的前肾小管。前肾小管持续发育到第30期,之后开始退化。第26期花背蟾蜍蝌蚪在中肾前端附近出现一些中肾小泡。第28期花背蟾蜍蝌蚪形成中肾小管。第30期花背蟾蜍蝌蚪,中肾小管的盲端内陷,原始的肾小囊和肾血管球形成,中肾小管显著伸长并迂回曲折。第32期花背蟾蜍蝌蚪体前后部中肾组织均已形成完整的肾单位。第30~34期前肾组织依次退化。第34期肾小管伸长并发生折叠,出现集合小管、近端小管和远端小管的形态分化。(2)第26~32期蝌蚪前肾近端小管和远端小管上皮细胞呈TGF-β2免疫反应阳性,第34~38期蝌蚪及幼蟾和成蟾中肾近端小管上皮细胞呈TGF-β2免疫反应阳性;第26~30期蝌蚪前肾近端小管和远端小管上皮细胞呈TGF-β3免疫反应阳性,第32~38期蝌蚪及幼蟾和成蟾中肾近端小管上皮细胞呈TGF-β3免疫反应阳性;第26~38期蝌蚪及幼蟾和成蟾肾集合小管上皮细胞呈AQP-2免疫反应阳性;第26~34期蝌蚪肾近端小管和远端小管上皮细胞呈Bax蛋白免疫反应阳性,第38期蝌蚪及幼蟾和成蟾中肾近端小管上皮细胞呈Bax蛋白免疫反应阳性。在肾发生过程中,TGF-β(β2、β3)和Bax蛋白的阳性反应呈现先增强后减弱的变化,AQP-2阳性反应呈持续增强的趋势。

全文目录


摘要  6-7
ABSTRACT  7-10
第一部分 综述  10-28
  1 脊椎动物的发育  10-13
    1.1 脊椎动物前肾的发生  10-11
    1.2 脊椎动物中肾的发生  11-12
    1.3 脊椎动物后肾的发生  12-13
  2 肾的结构  13-16
    2.1 肾的大体结构  13
    2.2 肾的微细结构  13-15
    2.3 两栖动物肾结构  15-16
  3 肾组织的相互作用及其诱导机制  16-17
  4 花背蟾蜍(Bufo raddei)及其蝌蚪简介  17-19
  5 鱼类、两栖类、爬行类肾脏的研究概况  19-22
    5.1 鱼类肾脏的研究概况  19
    5.2 两栖类肾脏的研究概况  19-21
    5.3 爬行类肾脏的研究概况  21-22
  6 与肾发生的相关活性物质  22-26
    6.1 转化生长因子β(TGF-β)  22-23
    6.2 水通道蛋白(AQP)  23-25
    6.3 Bax蛋白  25-26
  7 研究内容与意义  26-28
第二部分 材料与方法  28-31
  1 实验材料  28
  2 实验方法  28-31
    2.1 光镜观察  28
    2.2 免疫组织化学方法  28-29
    2.3 体视学测量  29
    2.4 图像分析  29-30
    2.5 统计学分析  30-31
第三部分 实验结果  31-37
  1 花背蟾蜍肾发生的组织学观察  31-32
    1.1 前肾的发生及退化  31-32
    1.2 中肾的发生  32
  2 花背蟾蜍肾发生中相关活性物质的表达  32-35
    2.1 TGF-β(β_2 、β_3 )在花背蟾蜍不同时期肾内的表达  32-34
    2.2 AQP-2 在花背蟾蜍不同时期肾内的表达  34
    2.3 Bax蛋白在花背蟾蜍不同时期肾内的表达  34-35
  3 花背蟾蜍肾发生中相关活性物质表达的面密度值  35-37
    3.1 TGF-β(β_2 、β_3)在花背蟾蜍不同时期肾内表达的面密度值  35-36
    3.2 AQP-2 在花背蟾蜍不同时期肾内表达的面密度值  36
    3.3 Bax蛋白在花背蟾蜍不同时期肾内表达的面密度值  36-37
第四部分 讨论  37-42
  1 肾组织发生  37-38
  2 肾发生中相关活性物质的表达及调控意义  38-42
    2.1 TGF-β(β_2 、β_3 )在肾内的表达及调控意义  38-39
    2.2 AQP-2 在肾内的表达及调控意义  39-40
    2.3 Bax蛋白在肾内的表达及调控意义  40-42
第五部分 结论  42-43
图版及图版说明  43-50
  图版Ⅰ(PlateⅠ)花背蟾蜍肾发生的组织学观察  43-45
  图版Ⅱ(Plate Ⅱ)花背蟾蜍肾发生中相关活性物质的表达  45-50
参考文献  50-57
硕士期间发表论文  57-58
致谢  58

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中图分类: > 生物科学 > 动物学 > 动物形态学 > 动物组织学(比较组织学)
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