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猕猴桃根醇提物及吴茱萸碱单体调节SW480细胞CCR7表达的研究

作　者: 周志群
导　师: 陈玉祥
学　校: 中南大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 猕猴桃根醇提物 吴茱萸碱 肿瘤转移 CCR7
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 62次
引　用: 2次
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内容摘要


目的研究中华猕猴桃根醇提物（ethanol extract from Radix ofActinidia chinensis,EERAC）及吴茱萸碱（Evodiamine,Evo）单体对培养的人结肠癌细胞SW480细胞的体外抗肿瘤作用,探讨其对人结肠癌细胞的CCR7表达的调节作用及机制。方法采用乙醇回流提取法得到猕猴桃根的乙醇提取物,MTT比色法和生长曲线法检测EERAC及Evo对SW480细胞的增殖和生长抑制作用,RT-PCR、Western-blot法检测EERAC及Evo对结肠癌细胞CCR7表达的调节影响和机制。结果MTT结果显示EERAC及Evo对结肠癌SW480细胞的生长均有显著的抑制作用,并呈明显的时-效和量-效关系。EERAC的半数生长抑制率(IC50)值为9.14 mg/mL,Evo的IC50值为2.11μg/mL。RT-PCR结果显示,EERAC及Evo药物组CCR7的mRNA表达率分别为29.99%和18.03%,与对照组表达率56.27%相比有显著差异。Western-blot检测结果显示,EERAC及Evo药物组CCR7的蛋白表达率分别为29.03%和15.28%,与对照组蛋白表达率42.48%相比有显著差异。结论猕猴桃根醇提物及吴茱萸碱单体均能有效抑制人结肠癌细胞SW480的生长和增殖,并能显著抑制CCR7的表达,从而抑制肿瘤的转移。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-8
缩略词表  8-9
前言  9-11
第一章 猕猴桃根有效成分的提取及鉴定  11-14
  1.1 实验材料  11
    1.1.1 仪器  11
    1.1.2 材料  11
  1.2 实验方法  11-12
    1.2.1 样品的预处理  11-12
    1.2.2 猕猴桃根的乙醇提取部位  12
    1.2.3 猕猴桃根抗肿瘤活性部位的化学成分初步鉴定  12
  1.3 实验结果  12-13
    1.3.1 干膏称重  12
    1.3.2 醋酐浓硫酸反应  12-13
  1.4 讨论  13-14
第二章 猕猴桃根醇提物及吴茱萸碱的体外抗肿瘤研究  14-23
  2.1 实验材料  15-16
    2.1.1 仪器  15
    2.1.2 材料  15
    2.1.3 肿瘤细胞株  15
    2.1.4 样品制备  15-16
  2.2 实验方法  16-17
    2.2.1 SW480细胞培养条件的建立  16
    2.2.2 MTT法测定  16-17
    2.2.3 生长曲线的绘制  17
  2.3 实验结果  17-21
    2.3.1 细胞培养  17-19
    2.3.2 MTT检测结果  19-20
    2.3.3 生长曲线的绘制  20-21
  2.4 讨论  21-23
第三章 猕猴桃根醇提物及吴茱萸碱对CCR7表达的调节  23-36
  3.1 实验材料  23-26
    3.1.1 细胞  23
    3.1.2 试剂  23-25
    3.1.3 仪器  25-26
    3.1.4 RT-PCR目的基因  26
  3.2 实验方法  26-31
    3.2.1 药物的溶解  26
    3.2.2 RT—PCR检测CCR7的表达  26-28
    3.2.3 Western-blot检测CCR7的表达  28-30
    3.2.4 统计分析  30-31
  3.3 实验结果  31-34
    3.3.1 RT-PCR结果  31-32
    3.3.2 Western-blot结果  32-34
  3.4 讨论  34-36
参考文献  36-40
综述  40-53
  参考文献  48-53
致谢  53-54
攻读期间发表的论文、研究成果及获奖情况  54

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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