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TGF-β_1对原代培养猪甲状腺细胞功能的影响

作　者: 王丹
导　师: 李红
学　校: 辽宁医学院
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: TGF-β1 甲状腺细胞 TPO
分类号: R581
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 14次
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内容摘要

目的观察TGF-β₁对原代培养猪甲状腺细胞功能的影响。探讨其可能的作用机制。方法用猪甲状腺细胞,采用原代培养的方法,按TGF-β₁剂量不同分为0（对照组）、2、5、10μg/L组。给药培养72h后,采用Hoechst 33258染色技术染色后在荧光显微镜下观察甲状腺细胞形态学变化;MTT法测定细胞存活率;应用改良愈创木酚法测定TPO活性; RT-PCR法测定TPO mRNA的表达及化学发光法测定T3、T4水平。结果原代培养甲状腺细胞镜下观察结果:经48h的培养后,甲状腺细胞贴壁,多成圆形或六边形,细胞呈现出聚集性生长的趋势,同时可以见到典型的滤泡结构。加入2、5、10μg/L TGF-β₁组细胞经72h的培养后,采用Hoechst 33258染色技术染色在荧光显微镜下观察可见甲状腺细胞核内出现致密浓染的蓝色染色,呈月牙形、圆形,可见到出芽及发泡现象、凋亡小体还有漂浮的细胞和细胞碎片;TGF-β₁对猪原代甲状腺细胞存活率的影响:与对照组相比,2μg/L、5μg/L、10μg/L组细胞的存活率均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;TGF-β₁对TPO活性的影响:与对照组比较,2μg/L、5μg/L、10μg/L组染TGF-β₁后,TPO活性均明显下降,差异有统计学意义,呈显著的负相关（r =-0.979,P<0.05）;RT-PCR结果:与对照组相比,给药各组TPO mRNA的表达明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）,并呈剂量-效应关系;T₃、T₄水平:T₃、T₄水平随着加入TGF-β₁浓度的增加而明显的减低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论TGF-β₁对猪原代培养甲状腺细胞功能有抑制的作用,并呈剂量-效应关系,其机制可能是与TGF-β₁下调甲状腺细胞TPO基因的表达及抑制TPO活性,诱导细胞凋亡有关。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
英文缩略语  8-9
前言  9-10
实验材料与方法  10-16
实验结果  16-23
讨论  23-25
结论  25-26
本研究创新性的自我评估  26-27
参考文献  27-29
附录  29-43
  综述  29-40
    参考文献  37-40
  在学期间科研成果  40-41
  致谢  41-42
  个人简介  42-43

TGF-β_1对原代培养猪甲状腺细胞功能的影响

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