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重组色素上皮衍生因子对氧诱导视网膜病新生血管的抑制作用

作　者: 王一雪
导　师: 陈超；石文静；周国民
学　校: 复旦大学
专　业: 儿科学
关键词: 色素上皮衍生因子 神经生长因子 新生血管化 早产儿视网膜病 玻璃体腔内注射
分类号: R774.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的观察我院自己制备的pET28a/重组色素上皮衍生因子(pigmentepithelium derived factor,PEDF)对高氧诱导新生小鼠视网膜病变血管的抑制作用。方法C57BL/6J新生小鼠在第7至12天日龄(P7-P12)吸75%高氧后,返回空气中,制备氧诱导视网膜病(oxygen-induced retinopathy,OIR)小鼠模型。给OIR模型小鼠左眼注入pET28a/重组PEDF,各亚组采用不同的注射剂量(0.5ug,1ug,2ug和4ug),注射时间(P12、P14,P13、P15,P15、P17和P18、P20),注射次数(单次,两次和三次)和注射途径(腹腔注射和玻璃体腔内注射),右眼作为自身对照,并设立两种对照组,即PROSPEC公司生产的重组PEDF(CYT-580)注射对照组和磷酸盐缓冲液(PBS)安慰剂对照组,各组在P17取材做视网膜铺片和切片,对视网膜新生血管进行形态学观察和新生血管内皮细胞核计数的定量研究。结果(1)不同给药剂量结果:在P12、P14注射4种剂量的pET28a/重组PEDF,计数突破视网膜内界膜的内皮细胞核数,结果显示实验组组间有差异(P＜0.001)。0.5μg组左右眼细胞核数分别为(35.00±3.10)个和(35.17±3.24)个,左右眼比较差异无显著意义(P＞0.05)。1μg组左右眼细胞核数分别为(27.67±3.09)个和(37.75±2.67)个,左眼显著低于右眼(P=.001)。2μg组左右眼细胞核数分别为(13.42±2.75)个和(36.00±2.66)个,差异有显著意义(P=.000),2μg组注射眼细胞核数也低于安慰剂对照组(35.83±3.30),差异有显著意义(P=.000);4μg组注射左眼显著低于右眼(12.67±2.94 vs 38.28±2.59,P=.000),注射眼细胞核数也低于安慰剂对照组(P=.000)。(2)不同给药次数结果:以2μg作为注射剂量,采用不同次数玻璃体腔内注射重组PEDF,观察到单次注射后左右眼细胞核数分别为(43.50±3.75)个和(42.01±4.72)个,左右眼差异无显著意义(P＞0.05)。两次注射后左眼突破视网膜内界膜的细胞核数显著低于右眼,三次注射后左右眼细胞核数分别为(21.58±3.87)个和(39.50±4.66)个,左眼显著低于右眼(P=.000),注射眼相比安慰剂对照组(42.08±3.58)也有显著减少(P＜0.001)。但两次和三次组间比较差异无显著性意义(P＞0.05)。(3)不同给药时间结果:观察玻璃体腔内注射重组PEDF抑制视网膜新生血管作用,在P12、P14注射三种剂量的重组PEDF,0.5μg组无显著作用,1μg和2μg组有显著抑制作用。在P13、P15注射三种剂量的重组PEDF,实验组组间有差异(P＜0.05);2μg组注射后左右眼细胞核数分别为(24.92±3.18)和(38.50±3.00)个,差异有显著意义(P=.000),注射眼细胞核数相比安慰剂对照组(39.46±3.09)也有显著意义(P=.001),说明P13、P15注射2ug重组PEDF对视网膜新生血管有抑制作用,而注射0.5μg或1μg均无显著作用。在P18、P20注射0.5μg、1μg或2μg三种剂量均无显著抑制作用(P＞0.05)。(4)不同给药部位结果:在P12、P14两次腹腔注射pET28a/重组PEDF,计数突破视网膜内界膜的内皮细胞核数,7.5μg组左右眼细胞核数分别为(35.57±2.94)个和(37.14±2.39)个,15μg组左右眼细胞核数分别为(34.94±3.12)个和(38.02±3.37)个,均无显著差异(P＞0.05)。而P12、P14玻璃体腔内注射2μgPEDF后,与腹腔注射组相比组间有显著差异(P＜0.01)。结论玻璃体腔内注射pET28a/重组PEDF对高氧诱导新生小鼠的视网膜血管增生有显著的抑制作用。1ug组、2ug组和4ug组注射后能显著抑制视网膜新生血管生长,两次和三次注射均有效果,在视网膜新生血管形成的早中期(P12、P14和P13、P15)注射有效,但P13、P15注射时需要较大的剂量。而腹腔注射重组PEDF对视网膜新生血管没有显著的抑制作用。本实验结果能为早产儿视网膜病的药物治疗提供依据。

全文目录


英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
材料与方法  10-15
结果  15-27
讨论  27-31
总结  31-32
参考文献  32-35
致谢  35-36
综述 色素上皮衍生因子对视网膜新生血管的抑制作用及应用前景  36-46

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中图分类: > 医药、卫生 > 眼科学 > 视网膜及视神经疾病 > 视网膜疾病
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