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脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮细胞的影响

作　者: 李春晶
导　师: 李兴
学　校: 山西医科大学
专　业: 内科学
关键词: 高糖视网膜色素上皮细胞脂联素血管内皮生长因子色素上皮衍生因子
分类号: R774.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

研究背景:糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病(DM)最为常见和最严重的微血管并发症之一,已成为大多数发达国家致盲的首要原因。视网膜色素上皮(RPE)细胞位于视网膜感觉层和脉络膜之间,构成视网膜外屏障,病理研究表明RPE细胞参与了DR的晚期病理变化,引起了眼内的病理性新生血管形成。脂联素(Adiponectin)是最近发现的一种由脂肪细胞分泌的特异蛋白质,临床和基础研究均表明,脂联素与DR发生、发展有密切关系。本研究通过脂联素对RPE细胞分泌的VEGF及PEDF的影响,旨在探讨其在DR发生发展中的作用,并可能为治疗DR提供一条新的途径。目的:观察脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮(hRPE)细胞活性及血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)分泌的影响,以阐明脂联素对糖尿病视网膜病变(DR)可能具有的保护作用。方法:体外培养人视网膜色素上皮细胞,随机分为四组:①正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖) ,②高糖组(33mmol/L葡萄糖) ,③甘露醇组: (5.5mmol/L葡萄糖+27.5 mmol/L甘露醇)④高糖+脂联素组(33mmol/L葡萄糖+2.5μg/ml脂联素),用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法检测不同情况下48h后对hRPE细胞活性的影响。再将hRPE细胞分为三组①正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖) ,②高糖组(33 mmol/L葡萄糖) ,③高糖+不同浓度的脂联素组(33 mmol/L葡萄糖+ 2.5, 5, 10, 20μg/ml脂联素),作用48小时后运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定hRPE细胞上清液中VEGF及PEDF的含量。结果:甘露醇组细胞活力与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高糖组抑制hRPE细胞活性,高糖组细胞活力明显低于对照组(P<0.01);加入脂联素干预后,细胞活力比高糖组和对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常对照组相比,高糖组VEGF水平明显升高,PEDF水平明显下降,加入2.5μg/ml脂联素对于VEGF及PEDF水平影响不大,脂联素浓度达到5～20μg/ml时和高糖组相比,VEGF水平显著降低、PEDF水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:高糖明显降低hRPE细胞活力,损伤hRPE细胞的功能,高糖可以导致hRPE细胞分泌VEGF增多,分泌PEDF减少,参与DR的发生发展;脂联素可以促进hRPE增殖,减轻细胞损伤;生理浓度(5～20μg/ml)脂联素可纠正高糖诱导的VEGF和PEDF水平的变化,可以使hRPE细胞VEGF分泌减少和PEDF分泌增多。提示脂联素对高糖导致的hRPE细胞损伤具有保护作用,可以纠正高糖诱导的hRPE细胞功能紊乱,通过调节VEGF与PEDF的平衡来抑制糖尿病视网膜病变(DR)病理性新生血管的形成,为临床应用脂联素治疗DR提供一定的理论依据。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
正文  9-31
  前言  9-17
    材料与方法  11-17
  结果  17-19
  讨论  19-24
  结论  24-25
  参考文献  25-28
  附图  28-31
综述  31-38
  正文  31-36
  参考文献  36-38
个人简介  38-39
致谢  39

脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮细胞的影响

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