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来曲唑促排卵对小鼠胞饮突发育影响的研究

作　者: 杨锦修
导　师: 张家骅
学　校: 西南大学
专　业: 细胞生物学
关键词: 来曲唑胞饮突子宫内膜容受性雌二醉孕酮促排卵
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:促排卵治疗是辅助生殖技术中首要而关键的一步。传统的促排卵药物存在临床妊娠率较低、可能发生卵巢过度刺激综合症等不足。促排卵新药——第三代非甾体类芳香酶抑制剂来曲唑(letrozole,LE),其促排卵作用已逐渐得到认可。然而,至今,我们对LE促排卵周期中子宫内膜容受性研究较少,LE对子宫内膜生长发育的影响尚无定论,LE促排卵周期中种植窗是否发生移动也未能确定,以及LE促排卵的最佳剂量也有待探索。本实验选择小鼠作为模型研究,模拟LE促排卵周期,着重研究围着床期胞饮突(pinopode,pp)的发育情况,试图解答以上提到的问题,以期为LE促排卵治疗提供进一步的实验依据。方法:用阴道涂片法观察到连续2个发情周期正常的、未交配过的、体成熟的昆明小鼠雌鼠作为研究对象,随机分为自然周期组(NC组)、LE2.5组和LE5.0组,每组12只,把辅助生殖临床上LE促排卵的两种剂量(2.5mg/d×5d,5.0mg/d×5d)用药方案,转换为实验动物的等效剂量,在观测的第三个发情前期进行灌胃,模拟LE促排卵周期。分别于D3.5、D4.5天对各处理组取样和检测:摘眼球法采血,ECLIA法测定雌二醇、孕酮含量;剪取任一侧子宫角中段1/3,行SEM,观测pp的发育状况,按照Rebecca方法对胞饮突进行评分;并对每只小鼠卵巢的红体数进行统计。结果:本次实验的结果显示:三组的昆明小鼠雌鼠(LE 2.5mg/d×2d组、LE5.0mg/d×2d组和NC组)排卵个数差异不显著(P=0.635,P＞0.05),一次排卵数量(红体数)都在15个左右。各组的D4.5雌激素(雌二醇)浓度均比同组D3.5的要稍稍高一些,但无统计学意义;D4.5孕激素(孕酮)水平比同组D3.5的高(P＜0.05):在同一时段的三组之间雌二醇水平和孕酮水平均无显著差异(P＞0.05)。结果表明:使用LE促排卵,与自然周期相比,并没有加大孕鼠围着床期雌激素(雌二醇)水平的个体差异,也没有干扰孕鼠黄体期孕激素(孕酮)水平的正常升高。同组内D4.5的pp评分均数优于D3.5(P＜0.01);但是,组间同一时段比较,D3.5的pp评分均数和D4.5的pp评分均数,三组间差异均无统计学意义(P＞0.05)。结果提示:在LE周期中,pp的形成和发育模式同NC周期相比,并没有改变,而且与LE的剂量大小关系不大。结论:LE是有效的促排卵药物,对黄体功能影响小,没有加大机体调节子宫内膜发育的最基本因素——雌二醇(E2)水平和孕酮(P4)水平的个体差异,内膜能正常的生长、发育、合成和分泌,并适时向黏附状态转化,对子宫内膜容受性形态学标志物(pp)的形成和发育模式的影响也不具统计学意义,且不存在剂量效应梯度关系,说明了LE促排卵不会造成种植窗的移动。此外,建议辅助生殖临床上应用低剂量的2.5mg/d×5d LE促排卵方案。

全文目录

英文缩写词表  6-7
中文摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
第一章文献综述  11-22
  1.1 低妊娠率仍旧是辅助生殖中最主要的问题  11
  1.2 胚胎着床过程简介  11-12
  1.3 生物活性分子的出现可以作为非常好的评价子宫内膜容受性的标记  12-13
  1.4 泡饮突是公认的形态学上子宫内膜容受性标志  13-18
    1.4.1 pp的形成是种植窗期子宫内膜超微结构中最具代表性的形态学改变  13-15
    1.4.2、pp影响子宫内膜容受性的机制探讨  15-17
      1.4.2.1、影响pp形成的有关因素  15-16
      1.4.2.2、pp的功能  16-17
    1.4.3、pp的临床意义  17-18
  1.5 来曲唑有替代克氯米芬成为一线促排卵药物的趋势  18-22
    1.5.1、现有促排卵药物的不足  18
    1.5.2、LE促排卵的优势  18-22
第二章引言  22-23
第三章实验材料与方法  23-29
  3.1 试剂及仪器  23
    3.1.1 主要实验试剂、耗材和器械  23
    3.1.2 主要仪器设备  23
  3.2 实验动物及分组  23-24
  3.3 给药方法  24-27
  3.4 标本采集  27
    3.4.1、血清收集  27
    3.4.2、子宫内膜取样和预处理  27
    3.4.3、红体计数  27
  3.5 雌二醇和孕酮测定  27-28
  3.6 扫描电镜检测子宫内膜的胞饮突  28
  3.7 统计分析  28-29
第四章结果与分析  29-36
  4.1 小鼠发情周期鉴定  29-31
  4.2 红体计数测定结果  31
  4.3 雌二醇、孕酮水平的测定结果  31-32
  4.4 胞饮突发育情况  32-36
第五章讨论与结论  36-40
  5.1 讨论  36-39
    5.1.1 来曲唑对卵泡发育的影响  36
    5.1.2 来曲唑促排卵周期中雌、孕激素对子宫内膜容受性的影响  36-38
    5.1.3 来曲唑对泡饮突发育的影响  38-39
  5.2 结论  39-40
参考文献  40-46
致谢  46-47
在读期间发表的文章  47

来曲唑促排卵对小鼠胞饮突发育影响的研究

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