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中药联合克罗米芬治疗多囊卵巢综合征大鼠的实验研究

作　者: 袁琪
导　师: 黄光英
学　校: 华中科技大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 多囊卵巢综合征 大鼠模型 来曲唑 胰岛素 人绒毛膜促性腺激素 克罗米芬 凋亡因子 瘦素受体
分类号: R711.75
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


第一部分多囊卵巢综合征大鼠模型的建立目的:通过比较两种造模方法选择较理想的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型。方法:将40只清洁级6周龄雌性SD大鼠随机分为正常对照1组、模型1组、正常对照2组和模型2组,正常对照1组灌服1%羧甲基纤维素,模型1组采用来曲唑(Letrozole)溶于1%羧甲基纤维素进行灌胃造模,两组连续灌服21天;正常对照2组给予生理盐水皮下注射,第1~10天每日1次,第11~22天每日2次;模型2组采用HCG联合胰岛素造模,第1~22天给予胰岛素皮下注射,每日1次,第11~22天给予人绒毛膜促性腺激素(HCG)皮下注射,每日2次。干预期间每日阴道涂片观察大鼠动情周期,于干预完次日处死大鼠,肉眼观察大鼠卵巢外形,并称取卵巢重量,用放免法(RIA)检测血清激素水平,卵巢组织学切片观察卵泡改变及排卵情况。结果:阴道涂片显示模型1组所有大鼠失去稳定的动情周期,均处于间期,大鼠体质量增加,双侧卵巢重量增加,卵巢白膜增厚,卵巢呈多囊样改变,黄体数目显著减少,囊性扩张卵泡率为73.23%,卵泡内颗粒细胞层数减少,卵泡膜细胞增多,与正常对照1组相比有显著性差异(P<0.01),模型1组血清T、LH、FINS水平均明显高于正常对照1组(P<0.05),P水平显著低于正常对照1组(P<0.05),FSH与正常对照1组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。模型2组70%大鼠阴道涂片显示动情周期紊乱,大鼠体质量增加,双侧卵巢重量增加,黄体数目减少,模型2组多数大鼠卵巢呈囊样改变,囊性扩张卵泡率为54.29%,其囊泡体积大,囊泡数目少于模型1组,卵泡内颗粒细胞层数减少,卵泡膜细胞增多,与正常对照2组相比差异有统计学意义(P<0.01);模型2组血清LH、INS水平显著高于对照2组(P<0.05),血清T、P水平较正常对照2组有升高趋势但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:根据鹿特丹多囊卵巢综合征诊断依据,从血清激素水平和卵巢组织切片等方面比较可以看出运用来曲唑诱导的PCOS大鼠模型优于HCG联合胰岛素诱导的该模型。第二部分中药联合克罗米芬对PCOS大鼠卵巢细胞凋亡相关蛋白和瘦素受体表达的影响目的:观察中药联合克罗米芬对PCOS大鼠血清性激素水平和卵巢凋亡因子Bax、Bcl-2及瘦素受体表达的影响,初步探讨中药联合克罗米芬治疗的作用机制。方法:将来曲唑(Letrozole)诱导的多囊卵巢综合征大鼠随机分为模型组(M)、中药组(Z)、西药组(X)、中西医组(Z+X),每组10只,另有正常对照组(N)10只。干预期间各治疗组均以半剂量来曲唑灌胃来维持模型。模型组和正常对照组予以生理盐水1 ml/250 g/d灌胃;中药组予以生药含量12.2 g/kg/d的中药灌胃;西药组予以克罗米芬4.5 mg/kg/d灌胃;中西医组予以中药和克罗米芬联合灌胃;各组干预时间为两周。称取各组大鼠卵巢重量,通过卵巢组织学切片观察各级卵泡发育情况,放免法检测血清激素水平,免疫组化法及RT-PCR法分别检测各组大鼠卵巢凋亡因子Bax、Bcl-2及卵巢Leptin-R mRNA表达的差异。结果:与正常对照组相比,模型组血清T、LH、FINS水平显著升高(P<0.01),而血清FSH水平显著降低(P<0.01),模型组卵巢Bax表达量显著升高(P<0.05)而Bcl-2表达显著降低(P<0.05),模型组卵巢瘦素受体表达量显著上调(P<0.05);与模型组相比,中药组、西药组和中西医组血清T、FINS均显著降低(P<0.01),中药组血清LH较模型组显著降低(P<0.05),中药组、西药组和中西医组血清FSH水平较模型组显著升高(P<0.05)。与模型组相比,中药组、西药组和中西医组卵巢内Bax表达显著降低(P<0.05)而Bcl-2表达显著上调(P<0.05),且中西医组表达更接近正常对照组,中药组、西药组和中西医组卵巢瘦素受体表达量显著下降(P<0.05),并且和其他干预组相比,中西医组表达量下调最多(P<0.05)。结论:中药组、西药组和中西医组均能调节PCOS大鼠紊乱的内分泌水平,促进卵巢正常发育,其中以中西医组效果最为明显,提示中药联合克罗米芬可能通过降低PCOS大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡及下调瘦素受体在卵巢内的表达改善了多囊卵巢综合征大鼠卵巢发育的内环境。

全文目录


英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-9
英文摘要  9-13
前言  13-14
第一部分 多囊卵巢综合征大鼠模型的建立  14-26
  材料与方法  14-17
  结果  17-20
  讨论  20-23
  结论  23-24
  参考文献  24-26
第二部分 中药联合克罗米芬对 PCOS 大鼠卵巢细胞凋亡相关蛋白和瘦素受体表达的影响  26-41
  材料与方法  27-32
  结果  32-35
  讨论  35-39
  参考文献  39-41
附图  41-51
综述  51-61
  参考文献  57-61
致谢  61

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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 妇科学 > 女性生殖器其他疾病 > 卵巢疾病
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