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MAPK通道对大鼠成骨细胞TRPV6表达水平的影响

作　者: 任平
导　师: 谷贵山
学　校: 吉林大学
专　业: 外科学
关键词: 丝裂原活化蛋白激酶瞬时性受体电位通道信号传递
分类号: R68
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

在成骨细胞的分化、成熟以及在骨形成过程中,有多种信号通路参与调控。其中MAPK信号转导系统是细胞外信号引起细胞核内反应的重要通道之一。钙通道是一种与钙离子转运有关的存在于细胞膜上的特定蛋白质,通过钙通道蛋白构象变化形成开放或关闭状态控制钙离子流动,发挥钙离子对成骨细胞生物功能的调节作用。在瞬时性受体电位通道(TRP)超家族中,TRPV5和TRPV6是目前唯一已知的钙离子高选择性通道,其受1,25(OH)2D3、PTH、饮食钙、雌激素和药物影响的调节在以往的研究中已经明确,最近的实验表明TRPV5和TRPV6通道可能是调节成骨细胞增殖的候选通道;TRPV5和TRPV6钙离子通道通过调节成骨细胞内钙离子含量的变化进而调节成骨细胞MAPK和RANK信号传导通路,最终调节成骨细胞增殖能力和骨代谢功能。van derEerden BCJ等[1]应用RealTime-PCR方法证明在人和小鼠成骨细胞中没有TRPV5mRNA,而检测到了TRPV6 mRNA,所以本实验设计研究对象为成骨细胞TRPV6通道。本研究旨在通过检测大鼠的成骨细胞TRPV6 mRNA表达水平、ALP合成及钙结节形成能力的变化,观察MAPK通道与成骨细胞中TRPV6、钙离子的量变关系,研究MAPK通道对成骨细胞功能的影响。将成骨细胞MAPK信号系统与TRPV6联系起来,为深入研究成骨细胞生物功能和骨代谢提供线索和依据。本研究从出生1～2天的wistar大鼠头盖骨成功分离、传代培养成骨细胞,采用免疫组化法观察成骨细胞碱性磷酸酶及钙结节形成数量的变化,采用RT-PCR技术检测TRPV6 mRNA的表达情况。结果显示,不同程度阻断MAPK通道后wistar乳鼠成骨细胞ALP合成及钙结节形成能力减弱, TRPV6 mRNA水平降低,与MAPK通道阻滞剂呈剂量依赖性。研究结果提示:MAPK信号传导通路通过调节成骨细胞代谢功能而影响TRPV6 mRNA的表达,最终调节成骨细胞内钙离子含量,影响成骨细胞增殖能力和骨代谢。

全文目录

内容提要  4-7
英文缩略词  7-8
第1章前言  8-17
  1.1 文献综述  9-17
第2章材料与方法  17-24
  2.1 实验材料  17-19
  2.2 方法  19-23
  2.3 统计学方法  23-24
第3章结果  24-42
  3.1 Wistar 大鼠颅盖骨来源成骨细胞培养及鉴定  24-26
  3.2 SB203580 阻断 p38 MAPK 通道对成骨细胞的影响  26-32
  3.3 PD98059 阻断p44/42 MAPK 通道对成骨细胞的影响  32-36
  3.4 PD98059+SB203580阻断 p44/42 及 p38 MAPK通道对成骨细胞的影响  36-42
第4章讨论  42-44
第5章结论  44-45
参考文献  45-49
攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果  49-50
致谢  50-51
中文摘要  51-55
Abstract  55-60
导师及作者简介  60

MAPK通道对大鼠成骨细胞TRPV6表达水平的影响

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