学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

TNF-α与CD44在SD大鼠分泌性中耳炎的表达及意义

作　者: 李莹
导　师: 黎万荣
学　校: 泸州医学院
专　业: 耳鼻咽喉科学
关键词: 分泌性中耳炎 鼓室积液 肿瘤坏死因子 粘附分子
分类号: R764.21
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 16次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：分泌性中耳炎(Otitis media with effusion, OME)是以鼓室积液为特征的慢性非化脓性炎症,其发病机制目前尚不明确,通常认为与咽鼓管机械性阻塞、感染、免疫反应有关。本实验通过建立OME大鼠模型,研究TNF-α与CD44在SD大鼠听泡粘膜上皮中的表达变化,探讨TNF-α与CD44在OME发生、发展中所起的作用。方法：成年健康SD大鼠40只,设立正常对照组、手术对照(PBS)组、OME模型组三个实验组。正常对照组选SD大鼠4只,不作任何处理,直接取听泡表面粘膜及听泡灌洗液检测；手术对照(PBS)组选用SD大鼠16只分别在中耳腔内注射磷酸缓冲液(PBS),按2天、4天、7天、15天四个不同时间点处死SD大鼠后取听泡灌洗液和听泡粘膜组织检测；OME模型组在中耳腔注射脂多糖(LPS)后,与手术对照(PBS)组相对应,按四个不同时间点取听泡粘膜组织及大鼠听泡灌洗液行检测(各时间段均多选入一只SD大鼠,以防出现造模过程中动物死亡所致实验动物数量不够之情况)。听泡灌洗液运用ELISA法检测各组中肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度。听泡粘膜组织通过固定、包埋制成切片,运用HE染色法查看各组大鼠听听泡粘膜组织细胞的形态学改变,采用免疫组化SP法检测听泡粘膜中粘附分子CD44及TNF-α在不同实验组中的阳性表达,用Image-Pro Plus 6.0多媒体彩色病理图像分析系统进行分析,统计学分析得出实验结论。结果：1、采用ELISA法对正常对照组听泡灌洗液中的TNF-α浓度进行检测,其平均浓度为：91.831ng/ml。手术对照(PBS)组听泡灌洗液中平均TNF-α浓度在术后2天、4天、7天、15天时为148.858ng/ml、169.898ng/ml、135.753ng/ml、101.830ng/ml。OME实验组,听泡渗液中的TNF-α平均浓度分别为201.020ng/ml、235.774ng/ml、230.681ng/ml、116.958ng/ml。OME实验组灌洗液的TNF-α浓度在受LPS影响后的七天左右最高,其后逐渐减轻,在15天时,炎症因子降至最低点。以a=0.05为检验标准,做组间配对t检验,OME实验组与正常对照组和手术对照(PBS)组比较有明显差异(P<0.05)。提示在OME大鼠模型,TNF-α的浓度在OME实验组显著高于对照组。2、HE染色切片可见,正常对照组听泡粘膜无炎症改变；手术对照(PBS)组术后2天、4天、7天、15天均未见听泡粘膜上皮细胞有明显改变,仅粘膜下有少量炎症细胞浸润；OME实验组术后两天可见听泡粘膜水肿,炎性细胞浸润,其中有大量中性粒细胞。术后四天组见毛细血管扩张,炎性细胞浸润增强,以大量中性粒细胞为主。术后七天组可见上皮下间隙增宽,更多的炎性细胞浸润,仍以大量中性粒细胞为主。术后15天组出现成纤维细胞增生,新生血管增多,并可见到单核巨噬细胞浸润,中耳粘膜明显增厚的改变。3、免疫组化SP染色,正常对照组TNF-α和CD44均在粘膜上皮及上皮下结缔组织仅少量表达。手术对照(PBS)组TNF-α和CD44染色阳性的细胞表达部位与正常对照组无变化,且四个时间点之间表达强度和阳性细胞数无明显差异(P>0.05),无统计学意义。OME实验组听泡粘膜上皮细胞和粘膜下结缔组织中均有TNF-α和CD44阳性表达,尤其在杯状细胞及粘膜下混合腺强烈表达,其术后15天强烈表达。经Image-Pro Plus 6.0检测双侧听泡粘膜阳性细胞灰度值,使用SPSS13.0采用组间t检验、相关性分析。OME实验组与手术对照(PBS)组和正常对照组TNF-α和CD44阳性表达经统计学分析发现：OME实验组与对照组间两种因子的表达强度有明显差异(P<0.05)。通过相关性分析,发现OME实验组内,TNF-α和CD44表达明显相关。手术组不同时间段TNF-α和CD44阳性表达无明显差异(P>0.05),无统计学意义。结论：1、在OME大鼠模型急性期,鼓室积液的中TNF-α浓度与炎症的严重程度密切相关。2、TNF-α介导炎症反应的方式可能是激活中性粒细胞。在这一过程中,粘附分子CD44参与了中性粒细胞的粘附,其中TNF-α的表达依赖中性粒细胞的粘附分子CD44的表达,提示细胞因子TNF-α与粘附分子CD44之间存在细胞间信号转导。3、TNF-α和CD44在OME大鼠模型鼓室积液发生、发展中起重要协同作用。

全文目录


摘要  3-6
Abstract  6-9
前言  9-12
材料与方法  12-21
结果  21-26
讨论  26-30
结论  30-31
附图  31-33
参考文献  33-38
英汉缩略词对照表  38-39
致谢  39-41
分泌性中耳炎发病的分子机制  41-51
  参考文献  48-51
白细胞介素-8与分泌性中耳炎  51-60
  参考文献  57-60

相似论文

  1. TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
  2. 猪TNF-α单克隆抗体制备与PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞TNF-α变化规律研究,S858.28
  3. 甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪肝炎大鼠的治疗作用及部分机制研究,R575.5
  4. 抗痛风胶囊对痛风性关节炎的治疗作用及机制,R259
  5. TNF-α、MMP-9与VEGF在肺气肿大鼠BALF中的表达及其相互关系的探讨,R563.3
  6. 罗格列酮对大鼠溃疡性结肠炎PPARγ、NF-κB和TNF-α表达的影响,R574.62
  7. 粪肠球菌对大鼠实验性根尖周炎TRAF-6的表达影响研究,R781.34
  8. 青蒿琥酯对百草枯致大鼠肺损伤机制的干预性研究,R285.5
  9. 重组白眉蝮蛇去整合素Adinbitor对人非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用,R285.5
  10. 脂多糖激活补体对内皮细胞的作用及抑制补体对脂多糖致急性肺损伤的影响,R563.8
  11. 1.tmTNF-α通过TNFR2诱导凋亡的信号途径 2.抗体的制备及鉴定,R392
  12. 利多卡因对幼鼠小肠缺血—再灌注肝脏损伤的保护作用,R965
  13. rhBMP-2用于兔腰椎融合过程中相关因子的表达,R687.3
  14. 高脂喂养致小鼠胰岛素抵抗及其对IL-6、TNF-α和P-IKBα的影响,R587.1
  15. 血小板内皮细胞粘附因子-1第3、8外显子基因多态性与辽西地区汉族冠心病相关性研究,R541.4
  16. 肾络康煎剂对IgA肾病大鼠肾组织TNF-α和IL-6蛋白表达的影响,R285
  17. 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征及其合并冠心病患者血清SCD40L、TNF-a、CRP变化及意义,R766
  18. TRAIL与LDM联用和作用机制及TRAIL蛋白的表达,R734.2
  19. 白血病儿童骨髓基质细胞对白血病细胞的保护作用及细胞粘附分子VLA-4抗体对其保护作用影响的研究,R733.7
  20. 食管癌患者放疗前后血清sIL-2R和TNF-α水平测定及其临床意义,R735.1
  21. 腰椎Modic症与椎间盘TNF-α表达及手术疗效的相关性研究,R681.53

中图分类: > 医药、卫生 > 耳鼻咽喉科学 > 耳科学、耳疾病 > 中耳疾病 > 中耳炎
© 2012 www.xueweilunwen.com