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肝毒清颗粒对内毒素血症肝损伤大鼠蛋白质谱表达的干预作用

作　者: 王杜娟
导　师: 刘鹏
学　校: 泸州医学院
专　业: 中西医结合临床
关键词: 肝毒清颗粒内毒素血症肝损伤蛋白组学
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：探讨肝毒清颗粒对内毒素血症肝损伤大鼠蛋白质谱表达的干预作用。方法：(1)将SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、中药治疗组4个组,每组均为10只。(2)模型组：模型组大鼠连续7天,每天1次用(0.2ml/10g)蒸馏水灌胃。脂多糖(LPS) (10mg/Kg)于末次灌胃1h后腹腔注射。实验期间,所有动物正常饮水,普通饲料喂养,禁食12h后腹腔注射脂多糖及腹主动脉取血。1%戊巴比妥钠(30mg/Kg)于腹腔注射脂多糖3h后,腹腔注射以麻醉动物,开腹前酒精消毒皮肤,腹主动脉采血,所有血液放入4℃冰箱保存。差异表达的血清蛋白质谱用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS技术)检测。肝功酶学指标用全自动酶标仪检测。内毒素浓度用革兰阴性菌脂多糖检测试剂盒(光度法)检测。取肝组织1.5cm×1.0cm×0.5cm,10%甲醛固定,HE染色,常规病理切片,光镜下观察肝组织病理变化。(3)中药组、中药治疗组：成人中药用量为1.58g生药/Kg/天,根据体表面积公式,大鼠常规用量为10.20g生药／Kg／天。中药组大鼠连续7天,每天1次用0.2ml/10g肝毒清颗粒灌胃,并用等量的蒸馏水于末次灌胃1小时后腹腔注射；中药治疗组连续7天,每天1次,用0.2ml/10g肝毒清颗粒灌胃,脂多糖(LPS)(10mg/Kg)于末次灌胃1h后腹腔注射,余方法同模型组。(4)正常组：正常组大鼠连续7天,每天1次,用0.2ml/10g的蒸馏水灌胃,并用等量的蒸馏水于末次灌胃1小时后腹腔注射,余方法同模型组。结果：(1)各组内毒素水平：与模型组比较,中药治疗组的血浆内毒素水平降低,有统计学差异(P<0.05)。(2)肝脏生化检查结果：与模型组比较：中药治疗组的血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平降低,有统计学差异(P<0.05)。(3)蛋白质芯片共捕捉到110个差异表达蛋白峰,其中,有15个差异表达蛋白峰有统计学意义(P<0.05)。相对质荷比为9193.117道尔顿的蛋白峰在空白组和模型组之间有差异表达；相对质荷比为2844.562道尔顿的蛋白峰在空白组和中药组之间有差异表达；相对质荷比为3827.878道尔顿的蛋白峰在模型组和中药治疗组之间有差异表达。(4)光学显微镜下观察：①正常组：肝细胞正常,核膜清楚。②模型组：肝组织绝大部分被破坏,肝细胞变性坏死、出血,无明显再生现象。③中药组同正常病理切片。④中药治疗组：肝组织有少量破坏,肝细胞无明显变性坏死和出血,核膜较清楚。结论：(1)肝毒清颗粒能降低内毒素血症肝损伤大鼠的内毒素水平。(2)肝毒清颗粒能降低内毒素血症肝损伤大鼠的谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平,能促进肝细胞再生。(3)肝毒清颗粒能影响内毒素血症肝损伤大鼠的蛋白质谱表达,对内毒素血症肝损伤大鼠的蛋白质表达有一定的干预作用。蛋白峰的变化,提示其差异蛋白质可能是肝毒清颗粒治疗内毒素血症的分子靶点。各组大鼠血清差异蛋白的存在,对内毒素血症肝损伤的发病机制及其诊治方面具有一定的指导作用,为其在分子学领域研究提供证据。

全文目录

1 肝毒清颗粒对内毒素血症肝损伤大鼠蛋白质谱表达的干预作用  3-38
  1.1 中文摘要  3-5
  1.2 英文摘要  5-9
  1.3 前言  9-11
  1.4 材料与方法  11-18
  1.5 结果  18-25
  1.6 讨论  25-33
  1.7 结论  33-34
  1.8 参考文献  34-37
  1.9 英汉缩略词对照表  37-38
2 致谢  38-39
3 活血化瘀法治疗脂质过氧化肝损伤的研究进展(综述)  39-47
  参考文献  45-47

肝毒清颗粒对内毒素血症肝损伤大鼠蛋白质谱表达的干预作用

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