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利用恶臭假单胞菌生物合成聚羟基脂肪酸酯均聚物

作　者: 周新荣
导　师: 陈国强
学　校: 汕头大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: PHB 聚羟基脂肪酸酯 均聚物 恶臭假单胞菌 β-氧化
分类号: O631.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


恶臭假单胞菌KT2442一直被认为是生产含C6～C14单体中长链聚羟基脂肪酸酯(PHA)共聚物的一类细菌。本课题通过分子生物学手段,从恶臭假单胞菌KT2442基因组里敲除编码3-羟基脂酰-ACP:CoA酰基转移酶(3-hydroxyacyl-ACP:CoA transacylase)的phaG和几个β-氧化途径相关酶基因,如fadB、fadA、fadB2x和fadAx,从而构建出的突变菌P. putida KTHH03。KTHH03可以生产出中长链PHA均聚物,包括聚3-羟基己酸酯(poly-3-hydroxyhexanoate) (PHHx),聚3-羟基庚酸酯(poly-3-hydroxyheptanoate) (PHHp)和接近均聚物的聚3-羟基辛酸酯poly(3-hydroxyoctanoate-co-2mol% 3-hydroxyhexanoate) (PHO*)。当敲除它的PHA合酶基因(phaC1和phaC2)之后,带有嗜水气单胞菌4AK4 (Aeromonas hydrophila 4AK4)操纵子phaPCJ的重组突变菌P. putida KTHH08可以积累聚3 -羟基戊酸酯poly(3-hydroxyvalerate) (PHV);带有罗氏真氧菌(Ralstonia eutropha) phaC基因的重组突变菌P. putida KTHH06可以合成聚3-羟基丁酸酯(poly-3-hydroxybutyrate) (PHB),聚4-羟基丁酸酯poly-4-hydroxybutyrate) (P4HB)。所有的均聚物都进行了气相色谱(GC),核磁共振(NMR),差示扫描量热法(DSC),热重分析(TGA)和凝胶渗透色谱(GPC)的检测,它们的平均分子量介于1.8×105到16×105之间,热学稳定性随着单体侧链长度而变化。P. putida KT2442突变菌已经发展成为生产多种不同的PHA均聚物的平台。

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中图分类: > 数理科学和化学 > 化学 > 高分子化学（高聚物） > 高分子物理和高分子物理化学 > 高聚物的化学性质
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