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ω-3多不饱和脂肪酸对人外周血树突状细胞的影响

作　者: 吴晓霞
导　师: 徐亮
学　校: 泸州医学院
专　业: 外科学
关键词: 树突状细胞 细胞因子 二十碳五烯酸 二十二碳六烯酸
分类号: R392.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的：ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 polyunsaturated fatty acids,ω-3 PUFAs)是营养免疫中小分子物质的重要组成部分,其主要成分包括二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。树突状细胞(Dendritic cells, DCs)具有激活免疫排斥和诱导免疫耐受的双重潜力,两者此消彼长。经DCs诱导耐受是延长移植物存活的有效方法。本研究通过人外周血单个核细胞来源的树突状细胞的体外培养,对DCs进行形态学观察、细胞因子及免疫表型的检测,探讨ω-3多不饱和脂肪酸对树突状细胞成熟状态及免疫学功能的影响。方法：取新鲜健康成人外周血,经淋巴细胞分离液梯度分离,取中间白膜层细胞,通过贴壁处理,获得单个核细胞,加入含10%胎牛血清的RPMI 1640完全培养基、人重组集落刺激因子(rhGM-CSF)、人重组白细胞介素-4(rhIL-4),使其终浓度为：rhGM-CSF 500U/ml, rhIL-4250U/ml,隔日半量换液,诱导5天,获得未成熟树突状细胞(immature DC, imDC),然后以ω-3多不饱和脂肪酸二十碳五烯酸(EPA),二十二碳六烯酸(DHA)或饱和脂肪酸硬脂酸(SA)处理细胞24h,并将其分为5组：未成熟DCs组、成熟DCs组、EPA处理组、DHA处理组和SA处理组。内毒素脂多糖(LPS)诱导细胞成熟后,细胞爬片Wright-Giemsa染色观察各组树突状细胞形态；采用半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测树突状细胞共刺激分子CD80 mRNA、CD86 mRNA及表面抗原提呈分子人类白细胞抗原-DR(HLA-DR) mRNA的表达；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞上清中白细胞介素-12(IL-12)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果：未成熟DCs组CD80 mRNA.CD86 mRNA及HLA-DR mRNA的相对表达量为0.369±0.023、0.573±0.033及0.467±0.020,成熟DCs组这3种分子高表达,其相对表达量为0.767±0.017、1.160±0.047及0.801±0.016,成熟DCs组与未成熟DCs组之间相比,有显著性差异(P<0.01)；EPA处理组CD80 mRNA.CD86mRNA及HLA-DRmRNA的相对表达量分别为0.547±0.034、0.849±0.043及0.657±0.023,DHA处理组CD80mRNA.CD86mRNA及HLA-DRmRNA的相对表达量分别为0.465±0.032.0.875±0.042及0.619±0.019,EPA和DHA处理组与成熟DCs组相比有统计学意义(P<0.01),而SA处理组CD80mRNA.CD86mRNA及HLA-DRmRNA的相对表达量分别为0.757±0.020、1.132±0.064及0.792±0.018,与成熟组相比差异无统计学意义(P>0.05)。细胞上清IL-12的含量,5个组分别为190.73±16.26、768.05±62.73.358.71±52.79.412.63±62.64.709.48±47.81 pg／ml,细胞上清TNF-α的含量,5个组分别为637.61±38.40、2405.73±125.48、1605.64±138.39.1807.38±140-34.2353.34±194.74 pg／ml,EPA及DHA处理组与成熟DCs组相比差异有统计学意义(P<0.01),而SA组与成熟DCs组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论：ω-3多不饱和脂肪酸可以在体外下调树突状细胞共刺激分子CD80.CD86及表面抗原提呈分子HLA-DR的表达,降低其细胞因子白细胞介素-12及肿瘤坏死因子-α的释放,减弱树突状细胞的抗原提呈能力,且对树突状细胞的体外成熟有抑制作用,从而增强免疫耐受性,提示ω-3多不饱和脂肪酸可能减轻器官移植中的排斥反应。

全文目录


1 ω-3多不饱和脂肪酸对人外周血树突状细胞的影响  3-41
  1.1 中文摘要  3-5
  1.2 英文摘要  5-7
  1.3 前言  7-11
  1.4 材料与方法  11-22
  1.5 结果  22-31
  1.6 讨论  31-36
  1.7 结论  36-37
  1.8 参考文献  37-40
  1.9 英汉缩略词对照表  40-41
2 致谢  41-42
3 ω-3多不饱和脂肪酸的免疫调节功能研究进展(综述)  42-53

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学 > 移植免疫学
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