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应用基于上转换发光技术的免疫层析法检测霍乱弧菌
作 者: 郝民
导 师: 高守一;阚飙
学 校: 中国疾病预防控制中心
专 业: 病原生物学
关键词: 上装换发光技术 免疫层析技术 双抗体夹心免疫反应 霍乱弧菌
分类号: R446.6
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 57次
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内容摘要
目的利用上转换发光技术(Up-Converting Phosphor Technology, UPT)与免疫层析技术(immunochromatographic assay, ICA)相结合的技术平台,研制开发基于上转换发光材料(Up-Converting Phosphor, UCP)为标记物的免疫层析试纸,实现对霍乱弧菌分型基础上的高灵敏度快速地现场检测,为UPT-ICA在多种生物分析中的广泛应用奠定基础。方法制备的免疫层析试纸所采用的标记物为400nm大小的UCP颗粒,反应模式为双抗体夹心法,使用的检测仪器为UPT生物传感器,扫描免疫层析试纸并检测其上经免疫反应结合的UCP发光信号,计算得出在一定范围内搜索到的检测带信号(VT)与质控带信号(VC)信号的比值(VT/VC),实现对标本中的霍乱弧菌O1群与O139群全菌进行定性和定量检测。结果检测霍乱弧菌的UPT-ICA试纸可区分O1群与O139群霍乱弧菌,并具有较高的特异性,良好的灵敏度,与平板计数有较好的一致性。O1群与O139群霍乱弧菌双重检测中O1群霍乱弧菌的灵敏度为1.69×104CFU/ml,其线性范围105 CFU/ml~108 CFU/ml,0139群霍乱弧菌的灵敏度为1.24×104CFU/ml,其线性范围为105 CFU/ml~108 CFU/ml,批内和批间误差均<15%。结论UPT-ICA系统可区分O1群与O139群霍乱弧菌,并能对其进行快速特异地定性、定量检测,在霍乱的现场监测及疫情处理中具有广阔的应用前景。
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全文目录
目录 4-5 中文摘要 5-6 ABSTRACT 6-8 前言 8-11 第一部分 UPT-ICA技术平台简介 11-19 1.UCP颗粒的制备 11 2.UCP颗粒的表面修饰与活化 11-12 3.UPT-ICA检测试纸条的研制 12-15 4.UPT生物传感器 15-19 第二部分 UPT-ICA快速单重定量检测O1群与O139群霍乱弧菌 19-35 1.材料 19-21 2.方法 21-26 3.结果 26-35 第三部分 UPT-ICA快速双重定量检测O1群与O139群霍乱弧菌 35-50 1.材料 35 2.方法 35-39 3.结果 39-50 第四部分 UPT-ICA快速双重检测O1群与O139群霍乱弧菌现场评价 50-59 1.材料 50-51 2.方法 51-55 3.结果 55-59 研究总结 59-61 参考文献 61-63 附录 63-74 综述 74-84 致谢 84
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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 诊断学 > 实验室诊断 > 免疫学检验
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