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人参愈伤组织源性细胞系表达人胰岛素的研究
作 者: 汪春义
导 师: 盛军
学 校: 吉林大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 人胰岛素 霍乱弧菌B亚单位(CTB) 人参愈伤组 织细胞 根癌农杆菌 糖尿病
分类号: Q943.2
类 型: 博士论文
年 份: 2007年
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内容摘要
目前,生产人胰岛素大多采用人工合成、化学提取和基因工程等方法。基因工程生产人胰岛素一般用大肠杆菌表达,且表达的胰岛素是以胰岛素原的形式存在。它必需经过后序处理,才具有生物活性。而且它的使用大多以注射为主,既麻烦又给病人带来一定的痛苦。随着生物技术的发展,对天然药物研究的开发和利用越来越得到人们的重视。本研究首次将构建了霍乱毒素B亚单位(CTB)与人胰岛素融合蛋白基因的植物表达载体通过农杆菌感染而将其整合到了人参愈伤组织细胞的染色体上,结果表明人胰岛素基因在人参愈伤组织细胞内得以表达。从小鼠实验看出,人参细胞亦有降血糖作用,而转化了人胰岛素基因的人参细胞的降血糖作用更明显,与非转化的人参细胞相比具有显著性差异。但小鼠的甘油三酯和胆固醇下降不明显。本研究设计独特,充分发挥了霍乱毒素B亚单位(CTB)的肠道吸附作用与人胰岛素的治疗作用,并将它们通过人参细胞表达,使得现代生物技术与我国的传统中药有机地结合在一起,为今后胰岛素的口服用药开辟了一条新路。
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全文目录
提要 4-7 第一章 前言 7-31 一、糖尿病的病因、发病机理及治疗 8-14 二、胰岛素的结构、作用、发展、生产及口服植物胰岛素 14-26 三、人参愈伤组织的概述 26-28 四、霍乱毒素B 亚单位(CHOLERA TOXIN B SUBUNIT) 28-29 五、实验设计及意义 29-31 第二章 CTB-人胰岛素原植物细胞表达载体的构建 31-62 一、实验材料 31-37 二、实验方法 37-52 三、实验结果 52-57 四、讨论 57-61 五、小结 61-62 第三章 CTB-人胰岛素在人参细胞中的表达 62-85 一、实验方法 62-71 二、实验结果 71-78 三、讨论 78-84 四、小结 84-85 第四章 CTB-BA 融合蛋白的动物实验研究 85-97 一、实验材料 85 二、实验方法 85-86 三、实验结果 86-92 四、讨论 92-96 五、小结 96-97 参考文献 97-111 中文摘要 111-115 ABSTRACT 115-119 致谢 119-120 导师简介 120-121 作者简历 121
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中图分类: > 生物科学 > 植物学 > 植物细胞遗传学 > 植物基因工程
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