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大剂量维生素E补充对大鼠抗氧化能力和细胞功能影响的实验研究

作　者: 房群
导　师: 马爱国
学　校: 青岛大学
专　业: 营养与食品卫生学
关键词: 维生素E 抗氧化 DNA损伤淋巴细胞转化
分类号: R151
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：通过补充不同剂量的维生素E,研究大剂量维生素E对大鼠抗氧化能力和细胞功能的影响。方法：取50只初断乳Wistar大鼠,雌雄各半,将大鼠随机分为对照组、VE1、VE2、VE3、VE4五组,五组大鼠每天给予不同剂量的维生素E灌胃,剂量分别为7.5 mg/kg、15mg/kg、50mg/kg、200mg/kg、750mg/kg,实验周期为8周。实验结束后处死动物并留取全血,分离血浆,同时制备红细胞膜,进行抗氧化能力和细胞功能的分析。抗氧化能力分析包括血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性测定、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性测定、丙二醛(MDA)含量分析及DNA氧化损伤。SOD、GSH-Px及MDA用生化试剂盒测定,DNA氧化损伤采用“彗星”电泳技术进行分析。细胞功能分析包括外周血淋巴细胞转化率测定和红细胞膜流动性测定。淋巴细胞转化率测定应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,红细胞膜流动性测定采用荧光偏振法。结果：1、抗氧化能力分析结果显示：当维生素E剂量为50mg/kg时,与对照组相比,大鼠血浆维生素E浓度提高了75.6%,SOD活性显著升高(P<0.01),提高了14.9%,血浆和红细胞膜中GSH-Px活性均明显升高(P<0.05,P<0.01),分别提高了8.4%和51.1%,血浆和红细胞膜MDA水平均明显降低(P<0.01,P<0.01),分别比对照组下降了57%和47.2%。DNA氧化损伤分析结果显示当H202浓度为10μmol／1时,50mg/kg VE组的DNA氧化损伤较对照组显著降低(P<0.05)。当维生素E补充剂量为200mg/kg、750mg/kg时,与对照组相比,大鼠血浆维生素E水平分别提高了95.8%、117.5%,SOD活性明显下降(P<0.05),而GSH-Px活性、MDA含量改善不明显；与50 mg/kgVE组相比,SOD活性明显下降(P<0.05),血浆和红细胞膜GSH-Px活性均明显降低(P<0.05),血浆和红细胞膜MDA水平明显升高(P<0.05)。DNA氧化损伤分析结果显示当H202浓度为10μmol/1时,200mg/kgVE组、750mg/kgVE组的DNA氧化损伤较对照组均显著加重(P<0.01,P<0.01)。以上结果表明,当外界损伤因素作用于机体时,大剂量维生素E不仅没有降低DNA氧化损伤,而且还使DNA氧化损伤加重,导致机体遗传稳定性受到破坏。2、细胞功能分析结果显示：当维生素E剂量为50mg/kg时,大鼠淋巴细胞转化率和红细胞膜流动性均比对照组明显提高(P<0.05,P<0.01),当维生素E补充剂量为200mg/kg、750mg/kg时,补充200mg/kgVE对细胞转化率没产生影响(P>0.05),细胞增殖功能无明显变化,当补充剂量增加为750mg/kg时,与对照组相比,大鼠淋巴细胞转化率显著降低(p<0.05)。这两个大剂量维生素E补充组对红细胞膜流动性均未见明显改善。结论：1、当维生素E补充剂量为50mg/kg时,机体SOD、GSH—Px等抗氧化酶活性增强,血浆MDA水平降低；同时,过氧化氢诱发的DNA氧化损伤水平降低；大鼠红细胞膜流动性和淋巴细胞转化率提高。2、当维生素E补充剂量为750mg/kg时,血浆SOD活性降低,过氧化氢诱发的DNA氧化损伤加重；750mg/kg VE使淋巴细胞转化率降低。而GSH-Px、MDA、红细胞膜流动性等在这两个大剂量补充组均未见明显改善。综上,当维生素E补充剂量为50mg/kg时,能明显提高大鼠抗氧化能力、改善细胞活性。但是,当补充过大剂量维生素E (200mg/kg、750mg/kg)时则会降低机体抗氧化能力和细胞功能,并且随着剂量的增加,可能会导致损伤作用加重。

全文目录

摘要  2-4
abstract  4-7
引言  7-9
第一章材料与方法  9-12
  1.1 动物分组及饲养  9
  1.2 药品与试剂  9
  1.3 指标检测及方法  9-11
    1.3.1 血浆中维生素E含量的测定  9
    1.3.2 血浆与红细胞膜抗氧化酶活性的测定  9-10
    1.3.3 DNA氧化损伤的检测与分析  10-11
    1.3.4 淋巴细胞转化率的测定  11
    1.3.5 红细胞膜流动性的测定  11
  1.4 统计学处理  11-12
第二章结果  12-22
  2.1 大鼠生长发育状况  12-13
  2.2 血浆中维生素E的浓度  13
  2.3 大剂量维生素E对血浆SOD、GSH-Px及脂质过氧化终产物MDA的影响  13-16
  2.4 大剂量维生素E对红细胞膜GSH-Px及脂质过氧化终产物MDA的影响  16-17
  2.5 大剂量维生素E对DNA氧化损伤的影响  17-18
  2.6 大剂量维生素E对红细胞膜流动性的影响  18-19
  2.7 大剂量维生素E对大鼠淋巴细胞转化的影响  19-20
  2.8 血浆抗氧化指标、膜抗氧化指标、膜流动性指标的相关分析  20-22
    2.8.1 血浆SOD、GSH-Px及MDA与红细胞膜GSH-Px及MDA之间的相关分析  20
    2.8.2 血浆SOD、GSH-Px及MDA与红细胞膜流动性指标之间的相关分析  20-21
    2.8.3 红细胞膜GSH-Px及MDA与红细胞膜流动性指标之间的相关分析  21-22
第三章讨论  22-28
第四章结论  28-29
参考文献  29-32
综述  32-44
  综述参考文献  40-44
附图  44-46
攻读学位期间的研究成果  46-47
致谢  47-48

大剂量维生素E补充对大鼠抗氧化能力和细胞功能影响的实验研究

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