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人健康和炎性牙槽骨成骨细胞COX-2、PGE_2 OPG，RANKL的表达及其相互关系

作　者: 钱毅
导　师: 刘琪
学　校: 遵义医学院
专　业: 口腔临床医学
关键词: 人牙槽骨成骨细胞核因子κB受体活化子骨保护素前列腺素E2 环氧酶-2
分类号: R78
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 23次
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内容摘要

目的:首先体外培养人健康和炎性牙槽骨成骨细胞,测定细胞上清液中的COX-2、PGE₂、OPG和RANKL的表达;然后,将重组人OPG（rhOPG）加入细胞培养液中,再次测定细胞上清液中的COX-2、PGE₂、OPG和RANKL的表达的变化。此研究旨在初步探讨COX-2、PGE₂、OPG和RANKL在牙周炎发病机制中所起的作用及其相互关系,并为rhOPG应用于牙周炎的治疗提供一定的理论和实验依据。方法:首先取人健康牙槽骨和病变区（炎症）牙槽骨,采用组织块法对人健康和牙周炎性牙槽骨进行体外培养和传代,取第5～6代的细胞用于实验。调整细胞浓度以1.5×10⁶个/ml接种于12孔板上,每孔2ml,在含15%胎牛血清的DMEM培养基中孵育2天,吸去培养液,用PBS冲洗两遍,加入不含胎牛血清的DMEM 2ml,在37℃、5%CO₂的培养箱中继续孵育24小时。收集细胞培养液,离心1000rpm 10分钟,去除悬浮的细胞,收集上清液,-70℃保存备用。进一步等分量加入含100ng/ml rhOPG的不含胎牛血清的DMEM 2ml,相同培养条件下继续孵育24小时。以相同的方法收集培养上清液、保存备用。严格按照ELISA试剂盒说明进行操作,获得各指标的检测数值。结果:1.牙周炎组RANKL、PGE₂、COX-2的表达较健康组明显增高,OPG的表达较健康组明显降低,均具有显著统计学意义（P＜0.01）。2.加入rhOPG后,牙周炎组RANKL、PGE₂、COX-2的表达明显降低,均具有显著统计学意义（P＜0.01）;OPG表达明显增加,具有显著统计学意义（P＜0.01）。健康组RANKL、PGE₂表达明显降低,均具有显著统计学意义（P＜0.01）;OPG表达增加,具有统计学意义（P＜0.05）;COX-2的表达降低,具有统计学意义（P＜0.05）。3.各组RANKL、PGE₂、COX-2间的表达呈正相关（r＞0,P＜0.01）,OPG与RANKL、PGE₂、COX-2的表达呈负相关（r＜0,P＜0.01）。结论:炎性牙槽骨成骨细胞RANKL、PGE₂、COX-2的表达明显增强,OPG的表达减弱,加入rhOPG后,RANKL、PGE₂、COX-2的表达明显降低,推测RANKL、PGE₂、COX-2可能促进牙周炎的发生、发展,而OPG对牙周炎的发生、发展可能起抑制作用,同时表明人工重组OPG可能协同其内源性OPG来共同抑制RANKL、PGE₂、COX-2的活性。

全文目录

目录  4-5
英汉缩略词对照表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-9
前言  9-11
材料与方法  11-16
  1 实验材料与仪器  11
  2 主要实验试剂  11-12
  3 主要实验仪器  12
  4 主要试剂配制  12-13
  5 实验方法  13-16
结果  16-24
讨论  24-30
结论  30-31
参考文献  31-36
IL-18与牙周病(综述)  36-45
  参考文献  42-45
致谢  45-46

人健康和炎性牙槽骨成骨细胞COX-2、PGE_2 OPG，RANKL的表达及其相互关系

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