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脂联素通过AMPK和SP1抑制下丘脑GT1-7神经细胞KISS-1基因转录和表达

作　者: 胡雅婷
导　师: 陈刚；温俊平
学　校: 福建医科大学
专　业: 内科学
关键词: 脂联素 KISS-1 AMPK SP1 促性腺激素释放激素(GnRH)
分类号: R587.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:1.研究脂联素对下丘脑GT1-7神经细胞中KISS-1基因表达的影响。2.探讨脂联素对下丘脑GT1-7神经细胞中KISS-1基因转录水平的影响。3.研究脂联素影响KISS-1基因转录和表达的信号通路。方法:1.分别用不同浓度脂联素作用于GT1-7细胞,用Realtime PCR方法观察KISS-1基因mRNA表达的变化。2.建立KISS-1基因启动子报告基因体系,用Promega荧光素酶双报告基因检测系统检测不同浓度脂联素对GT1-7细胞KISS-1基因启动子活性的影响。3.用AMPK激动剂AICAR、AMPK抑制剂Compound C和AMPK siRNA作用于GT1-7细胞,再检测脂联素对KISS-1基因表达的影响。4.用不同浓度脂联素、AICAR、Compound C和AMPK siRNA干预GT1-7细胞后,用Western Blot方法检测转录因子SP1蛋白表达的变化。结果:1.不同浓度脂联素(0.1-5 ug/ml)作用于下丘脑GT1-7神经细胞后,可以抑制KISS-1基因mRNA的表达。2.不同浓度脂联素(1-10 ug/ml)作用于下丘脑GT1-7神经细胞不同时间(6-24h)后,可以抑制KISS-1基因启动子的活性,而且这种抑制作用呈时间和浓度依赖性。3. AMPK激动剂AICAR可以抑制KISS-1基因的表达和启动子的活性,而AMPK抑制剂Compound C和AMPK siRNA都可以促进KISS-1基因的表达和提高启动子的活性。4.脂联素和AICAR可以增加GT1-7细胞中转录因子SP1蛋白的表达,而Compound C和AMPK siRNA却都可以抑制SP1蛋白的表达。结论:脂联素可以明显抑制下丘脑GT1-7细胞中KISS-1基因的表达及转录,而且这种作用可能是通过AMPK信号通路和转录因子SP1完成的。

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 胰岛疾病 > 糖尿病
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