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鸦胆子防治甜菜夜蛾活性成分的分离鉴定及作用机理初探

作 者: 冯学环
导 师: 蒋红云
学 校: 中国农业科学院
专 业: 农药学
关键词: 甜菜夜蛾 鸦胆子 杀虫活性 活性成分 作用机理
分类号: S482.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 75次
引 用: 1次
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内容摘要


从植物中寻找具有杀虫活性的物质,作为先导化合物开发新型农药,是目前植物源农药研究的一个热点。本论文以甜菜夜蛾为供试虫,采用点滴法和叶碟法,测定了艾蒿等20个科30种植物材料乙醇提取物的杀虫活性,结果表明,荜澄茄、鸦胆子、艾草、牛扁、吴茱萸和防己等对甜菜夜蛾幼虫有较好的杀虫活性。在10mg/ml浓度下,触杀作用不明显;拒食活性结果表明,24h时的拒食率分别为96.64%,86.86%,78.85%,75.32%,70.09%,66.85%,昆虫产生拒食的症状,昆虫取食量减少或者不再取食,其中有些最终饥饿致死。其中,鸦胆子乙醇提取物能显著抑制甜菜夜蛾幼虫的取食,对其表皮生长有一定的抑制作用,使幼虫畸形死亡。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取对鸦胆子乙醇提取物进行萃取分离,采用点滴法和叶碟法测定了各萃取物的生物活性,结果表明,在10mg/ml浓度下,氯仿相萃取物对甜菜夜蛾3龄幼虫的生物活性最高,72h的触杀作用致死率为93.33%,24h的拒食率高达94.81%;乙酸乙酯对甜菜夜蛾3龄幼虫的生物活性较好,触杀致死率为63.33%,拒食率为76.88%。其中氯仿相对甜菜夜蛾幼虫的表皮有腐蚀或致畸作用,昆虫表皮变薄,不能正常蜕皮,破坏昆虫正常的取食。采用柱层析分离和仪器分析相结合的方法对鸦胆子氯仿相萃取物活性成分进行了进一步分离,生物活性追踪结果表明,馏分L7与L8对甜菜夜蛾幼虫有较强的触杀和拒食活性。依据TLC检测的初步结果,对馏分L7与L8进行小柱层析进行分离提纯,并通过制备色谱和重结晶等方法,得到结晶体1和结晶体2,结晶体1采用晶体衍射方法确定其结构,确定为鸦胆子苦素A,结晶体2采用质谱、红外光谱、质谱和核磁共振确定结构,确定结构为鸦胆子苦醇。通过点滴法测定了鸦胆子苦素A和鸦胆子苦醇对甜菜夜蛾3龄幼虫的触杀活性,结果表明,两种化合对甜菜夜蛾都有一定的触杀作用,对幼虫的表皮有一定的破坏作用;在10mg/ml浓度下,72h时的LC50分别为10.4098 mg/ml和2.8605mg/ml,LD50分别为5.20μg/头和1.43μg/头但鸦胆子苦醇对甜菜夜蛾的触杀活性明显优于鸦胆子苦素A。用叶碟法测定了鸦胆子苦素A和鸦胆子苦醇对甜菜夜蛾的拒食活性,结果表明,两种化合物对甜菜夜蛾幼虫都有强烈的拒食作用,24h时的选择性拒食中浓度分别为15.9167mg/L和12.1296mg/L;非选择性拒食中浓度分别为72.6579mg/L和75.7102mg/L。48h后,鸦胆子苦醇的拒食活性效果没有明显变化,鸦胆子苦素A的拒食活性都有所减弱,鸦胆子苦醇对甜菜夜蛾的拒食活性优于鸦胆子苦素A。细胞毒性研究结果表明,鸦胆子苦醇可导致甜菜夜蛾细胞凋亡,对昆虫细胞增殖具有抑制作用,这无疑对发现新作用靶标的植物活性成分及开发以鸦胆子苦醇为母体的新的先导化合物具有指导意义。

全文目录


摘要  5-6
Abstract  6-12
第一章 引言  12-23
  1.1 研究的目的和意义  12-13
  1.2 植物源杀虫剂研究进展  13-21
    1.2.1 杀虫植物资源研究概况  13-15
    1.2.2 植物源杀虫活性成分研究概况  15-18
    1.2.3 植物源杀虫剂的作用方式  18-19
    1.2.4 植物源杀虫剂的作用机理  19-20
    1.2.5 植物源杀虫剂的开发利用  20-21
    1.2.6 植物源杀虫剂存在的问题及发展前景  21
  1.3 鸦胆子的研究进展  21-22
  1.4 研究内容及方法  22-23
第二章 艾蒿等30种植物对甜菜夜蛾杀虫活性比较  23-30
  2.1 材料与方法  23-26
    2.1.1 材料  23-25
    2.1.2 试验方法  25-26
  2.2 结果与分析  26-28
    2.2.1 植物乙醇提取物的产出率比较  26
    2.2.2 植物提取物对甜菜夜蛾3龄幼虫的生物活性测定  26-28
  2.3 结论与讨论  28-30
第三章 鸦胆子提取物对甜菜夜蛾的生物活性  30-37
  3.1 材料和方法  30-32
    3.1.1 试验材料  30
    3.1.2 试验方法  30-32
  3.2 结果与分析  32-35
    3.2.1 化学成分的系统预试结果  32-33
    3.2.2 初步分离萃取率  33
    3.2.3 鸦胆子各萃取物对甜菜夜蛾的生物活性  33-35
  3.3 结论与讨论  35-37
第四章 鸦胆子提取物活性成分的分离及结构鉴定  37-45
  4.1 材料和方法  37-38
    4.1.1 材料  37
    4.1.2 试验方法  37-38
  4.2 结果与分析  38-43
    4.2.1 各馏分对甜菜夜蛾3龄幼虫的触杀活性  38-39
    4.2.2 各馏分对甜菜夜蛾3龄幼虫的拒食活性  39-40
    4.2.3 结晶体的结构确定结果  40-43
  4.3 结论与讨论  43-45
第五章 鸦胆子苦素A和鸦胆子苦醇对甜菜夜蛾的生物活性  45-52
  5.1 试验材料与方法  45-46
    5.1.1 供试药品  45-46
    5.1.2 供试昆虫  46
    5.1.3 试验方法  46
  5.2 结果与分析  46-51
    5.2.1 两种化合物对甜菜夜蛾3龄幼虫的触杀活性  46-47
    5.2.2 两种化合物对甜菜夜蛾3龄幼虫的拒食活性  47-50
    5.2.3 鸦胆子苦醇对甜菜夜蛾的细胞毒性研究  50-51
  5.3 结论与讨论  51-52
第六章 结论  52-53
参考文献  53-60
附录  60-64
致谢  64-65
作者简历  65

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 农药防治(化学防治) > 各种农药 > 杀虫剂
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