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鸡降钙素真核表达质粒在老龄蛋鸡中应用效果研究

作　者: 全丽萍
导　师: 章世元
学　校: 扬州大学
专　业: 动物营养与饲料科学
关键词: 降钙素基因真核表达质粒 老龄蛋鸡 钙代谢 骨骼质量 蛋壳质量
分类号: S831
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 23次
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内容摘要


为探讨降钙素重组表达质粒(pCEP4-CT)对老龄蛋鸡钙代谢的调控效应。试验首先制备和鉴定降钙素真核表达质粒,而后选用70周龄新扬州鸡36只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复3只蛋鸡,研究不同日粮钙(3.5 %和2.5 %)水平条件下,经腿肌注射200μg鸡降钙素基因质粒后对老龄蛋鸡血液中钙代谢相关因子、骨骼质量、养分表观代谢率、蛋壳质量和蛋壳微观构造的影响。结果表明,双酶切电泳和测序结果显示pCEP4-CT质粒制备成功;腿肌注射pCEP4-CT重组表达质粒在蛋鸡体内获得了良好表达,1~14 d时表达量最高,随试验期的延长表达效果逐渐减弱;1~14 d时:同等日粮钙水平条件下,pCEP4-CT质粒可显著提高老龄蛋鸡血清甲状旁腺激素(P<0.05),降低血钙、骨钙素和碱性磷酸酶含量(P<0.05),但对降钙素、雌二醇和血磷含量无显著影响;pCEP4-CT质粒可提高老龄蛋鸡骨骼质量,显著提高胫骨指数和骨密度(P<0.05),促进骨钙和骨磷沉积;pCEP4-CT质粒可促进蛋壳钙沉积,对蛋壳质量和超微构造也有明显改善作用。15~28 d时:注射pCEP4-CT质粒对老龄蛋鸡各项指标均无明显影响。综上所述,pCEP4-CT真核表达质粒可促进老龄蛋鸡对钙的利用,利于骨钙沉积,对蛋壳质量和超微结构也有明显改善作用。饲喂低钙(2.5 %)日粮时,注射pCEP4-CT质粒可显著改善老龄蛋鸡对钙的利用率,促进蛋壳形成,并降低骨质疏松症发病风险。

全文目录


摘要  3-4
ABSTRACT  4-10
说明符号  10-11
前言  11-12
第一章 文献综述  12-25
  1 钙的生理作用  12
  2 老龄蛋鸡钙代谢  12-14
    2.1 老龄蛋鸡钙代谢存在的问题及析因  12-13
    2.2 钙与骨及蛋壳形成的关系  13-14
  3 钙的吸收与排泄  14-15
    3.1 钙的吸收机制  14
    3.2 钙的排泄  14-15
  4 钙代谢的调控  15-18
    4.1 内源调控  15-17
    4.2 外源调控  17-18
  5 降钙素对钙代谢、骨代谢的调控  18-22
    5.1 降钙素的特性及结构  18-19
    5.2 降钙素的作用及其机理  19-21
    5.3 降钙素的应用  21-22
  6 钙代谢调节的基因治疗  22-25
    6.1 基因治疗的主要技术环节  22-23
    6.2 基因治疗的分类  23-24
    6.3 老龄蛋鸡钙代谢及蛋壳质量的基因调控  24-25
第二章 试验研究  25-62
  实验一、降钙素真核表达质粒（PCEP4-CT）的鉴定及制备  25-29
    1 材料与方法  25
      1.1 质粒与宿主菌  25
      1.2 培养基与试剂  25
    2 方法  25-26
      2.1 质粒的鉴定  25-26
      2.2 真核表达质粒的大量制备  26
      2.3 质粒注射液的制备  26
    3 结果  26-27
      3.1 pCEP4-CT 真核表达质粒的酶切鉴定  26-27
      3.2 CT 基因序列测定及分析  27
    4 讨论  27-28
    5 小结  28-29
  实验二、PCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清相关激素及代谢物浓度的影响  29-43
    1 材料与方法  29-32
      1.1 pCEP4-CT 基因质粒注射液来源  29
      1.2 试验动物及分组  29-30
      1.3 试验日粮  30-31
      1.4 试验日程及饲养管理  31
      1.5 预饲期鸡群调整方法  31
      1.6 测定指标及方法  31-32
      1.7 数据处理  32
    2 结果  32-39
      2.1 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清中PTH 的影响  32-33
      2.2 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清中CT 的影响  33-34
      2.3 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清中E2 的影响  34-35
      2.4 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清中Ca 的影响  35-36
      2.5 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清中P 的影响  36-37
      2.6 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清中AKP 的影响  37-38
      2.7 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清中BGP 的影响  38-39
    3 讨论  39-42
      3.1 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清激素水平的影响  39-40
      3.2 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡血清代谢产物的影响  40-42
    4 小结  42-43
  实验三、PCEP4-CT 真核表达质粒对骨骼质量及养分代谢率的影响  43-49
    1 材料与方法  43-44
      1.1 试验动物及材料  43
      1.2 测定指标  43-44
      1.3 数据处理  44
    2 结果  44-47
      2.1 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡骨骼质量的影响  44-46
      2.2 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡养分代谢率的影响  46-47
    3 讨论  47-48
      3.1 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡骨骼质量的影响  47-48
      3.2 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡养分代谢率的影响  48
    4 小结  48-49
  实验四、PCEP4-CT 真核表达质粒对老龄蛋鸡蛋壳质量的影响  49-62
    1 材料与方法  49-50
      1.1 试验动物及材料  49
      1.2 测定指标  49-50
      1.3 数据处理  50
    2 结果  50-59
      2.1 pCEP4-CT 对老龄蛋鸡蛋比重的影响  50-51
      2.2 pCEP4-CT 对蛋壳强度的影响  51-52
      2.3 pCEP4-CT 对蛋壳厚度的影响  52-53
      2.4 pCEP4-CT 对蛋壳比例的影响  53-54
      2.5 pCEP4-CT 对蛋壳超微结构的影响  54-59
    3 讨论  59-61
      3.1 pCEP4-CT 对老龄蛋壳质量的影响  59-60
      3.2 pCEP4-CT 对老龄蛋壳超微结构的影响  60-61
    4 小结  61-62
第三章 结论  62-63
第四章 本研究的创新点  63-64
参考文献  64-70
致谢  70-71
攻读学位期间发表学术论文目录  71

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家禽 > 鸡
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