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miR-124抑制人结肠癌细胞生长与侵袭的机制研究

作　者: 唐玉兰
导　师: 梁庆模
学　校: 南华大学
专　业: 肿瘤学
关键词: miR-124 波形蛋白 结肠癌 生长与侵袭
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：探讨miR-124（Homo sapiens miR-124）抑制人结肠癌SW620细胞生长与侵袭的分子机制。方法：1.转染miR-124mimicss于人结肠癌SW620细胞，转染后上调miR-124表达的SW620细胞作为实验组；转染无关序列NC (negative control)于人结肠癌SW620细胞，转染无关序列NC的SW620细胞作为阴性对照组。2.运用MTT、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测miR-124对人结肠癌SW620细胞的生长、侵袭转移能力。3.用在线预测软件预测miR-124靶基因及运用荧光素报告载体系统检验。4.免疫细胞化学检测miR-124作用SW620细胞后对侵袭相关分子Vimentin与MMP-2（基质金属蛋白酶2）表达的差异。结果：MTT检测发现，实验组24h、48h、72h后光密度值（OD）分别为0.287±0.010、0.353±0.006、0.376±0.007，对照组24h、48h、72h后OD值分别为0.436±0.014、0.551±0.015、0.642±0.021，两组比较差异有统计学意义（P<0.05），结果提示miR-124过表达可抑制人结肠癌SW620细胞的生长。细胞划痕实验显示，实验组12h、24h后划痕愈合率分别为0.265±0.007、0.377±0.015，对照组12h、24h后划痕愈合率分别为0.406±0.025、0.782±0.016，实验组与对照组相比较，差异有统计学意义(P<0.016)，结果提示miR-124过表达能减缓SW620细胞划痕的愈合。Transwell侵袭实验显示，转染24h后，实验组穿过基底膜的细胞数为37±2.6，对照组穿过基底膜的细胞数为80±3.6，两组相比较，差异有统计学意义(P<0.05)，结果提示miR-124过表达能抑制SW620细胞侵袭能力。在线预测软件预测Vimentin是miR-124靶基因，荧光素报告载体系统证实Vimentin是miR-124调控的靶基因。免疫细胞化学结果发现，在转染24h后实验组Vimentin和MMP-2平均光密度值分别为0.232±0.02、0.209±0.03，对照组Vimentin和MMP-2平均光密度值分别为0.609±0.02、0.724±0.01，两组相比较，差异均有统计学意义（P<0.01），结果提示miR-124过表达能抑制人结肠癌SW620细胞中Vimentin和MMP-2蛋白的表达。结论：1. miR-124过表达能抑制人结肠癌细胞生长侵袭。2. Vimentin是miR-124调控的靶基因。3. miR-124可能通过抑制Vimentin和MMP-2蛋白的表达，抑制人结肠癌SW620细胞生长、侵袭。

全文目录


主要缩略词简表  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-8
第一章 前言  8-10
第二章 材料与方法  10-16
  一、材料  10-11
  二、实验方法  11-16
第三章 结果  16-25
第四章 讨论  25-29
结论  29-30
参考文献  30-35
综述  35-45
  参考文献  40-45
致谢  45

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 结肠肿瘤
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