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Maspin基因及其启动子去甲基化在子痫前期大鼠模型中的作用

作　者: 陈平
导　师: 乔福元
学　校: 华中科技大学
专　业: 妇产科学
关键词: Maspin基因甲基化 5-Aza-dC 子痫前期孕鼠模型
分类号: R-332
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

研究目的利用内皮型一氧化氮合酶抑制剂(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)NG-Nitro-L-arginine Methyl Ester（L-NAME）建立子痫前期大鼠模型，在妊娠期腹腔注射甲基化转移酶抑制剂(5-Aza-dC），检测孕鼠胎盘组织maspin的表达情况及对孕鼠血压及蛋白尿的影响，探讨maspin基因及其启动子甲基化在子痫前期发病机制中的作用。研究方法在孕鼠妊娠期腹腔注射L-NAME建立子痫前期wistar大鼠模型，并腹腔注射甲基化转移酶抑制剂(5-Aza-dC)，监测给药前后大鼠血压及24h尿蛋白变化。采用免疫组织化学方法，RT-PCR及Western Blot法检测孕鼠胎盘maspin基因的mRNA及蛋白水平表达情况。研究结果1.免疫组化结果显示各组大鼠胎盘组织的滋养细胞中均存在maspin蛋白表达；2. RT-PCR及Western Blot结果显示：与正常对照组相比，模型组孕鼠胎盘组织maspin mRNA及蛋白表达无明显变化(P>0.05)；而与正常对照组及模型组相比，5-Aza-dC干预组孕鼠胎盘组织maspin mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05)；3.与正常对照组相比，模型组孕鼠给药后(第10,13,15,17,19天)血压及24h尿蛋白均明显升高，差异具有统计学意义(P<0.05)，并且血压升高均为30mmHg以上。与模型组孕鼠比较，干预组孕鼠给予5-Aza-dC干预后(第10,13,15,17,19天)，血压及24h尿蛋白均显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)；孕晚期（第19天）血压下降更为明显(P<0.05)。研究结论子痫前期孕鼠胎盘组织滋养细胞中存在maspin基因的表达，通过腹腔注射甲基化转移酶抑制剂(5-Aza-dC）可以使胎盘组织maspin基因表达增加，使子痫前期症状(高血压，24h尿蛋白)得到不同程度的改善。我们推测Maspin基因及其启动子甲基化、去甲基化等表观遗传学调控可能在子痫前期疾病发生发展中起到重要作用。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-8
1 前言  8-12
  1.1 研究背景  8
  1.2 Maspin 基因的功能与调控  8-10
  1.3 论文研究主要内容  10-12
2 材料和方法  12-18
  2.1 实验动物  12
  2.2 实验主要试剂及仪器  12
  2.3 实验方法  12-18
3 结果  18-22
  3.1 5–Aza-dC 对大鼠血压的影响  18
  3.2 5–Aza-dC 对大鼠 24h 尿蛋白的影响  18-20
  3.3 实时定量 RT-PCR 检测孕鼠胎盘组织 Maspin mRNA 表达  20
  3.4 免疫组化SP 法观察孕鼠胎盘组织中 Maspin 蛋白表达  20-22
  3.5 Western Blot 检测孕鼠胎盘组织 Maspin mRNA 表达  22
4 讨论  22-26
  4.1 Maspin 基因的表观遗传学调控  22-23
  4.2 Maspin 基因与子痫前期  23-26
5 参考文献  26-31
附录 1 综述  31-40
  参考文献  35-40
附录 2 英文文章待发表  40-52
  References  50-52
致谢  52

Maspin基因及其启动子去甲基化在子痫前期大鼠模型中的作用

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