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软坚消瘿颗粒治疗自身免疫性甲状腺炎大鼠的实验研究

作 者: 杨彬婕
导 师: 张兰
学 校: 辽宁中医药大学
专 业: 中医内科学
关键词: 自身免疫性甲状腺炎 软坚消瘿颗粒 甲状腺抗体 凋亡蛋白 病理形态
分类号: R259
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:阐述自身免疫性甲状腺炎发病机制,验证软坚消瘿汤改变剂型后颗粒剂的疗效,并以雷公藤多甙片为阳性对照药,观察甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TpoAb)、甲状腺组织病理形态的改变以及甲状腺滤泡细胞的凋亡程度。材料与方法:将大鼠按体重大小随机分为六组,即正常组、模型组、雷公藤组(阳性对照组)、软坚消瘿颗粒低、中、高剂量组,标号分笼,第一、二周均自由饮用自来水,第三周除正常组饮用自来水外,其余各组均腹部皮下多点免疫注射猪甲状腺球蛋白与弗氏完全佐剂溶合物两次,同时配合饮用浓度为0.064%的碘化钠水,再于第四周至第七周每周一次加强免疫注射猪甲状腺球蛋白与弗氏不完全佐剂溶合物,制备自身免疫性甲状腺炎大鼠模型。经过六周软坚消瘿颗粒及雷公藤治疗后,检测以下指标:(1)采用电化学发光法检测TgAb、TpoAb;(2)采用免疫组织化学法测定大鼠甲状腺组织凋亡蛋白Fas、Fas-L、Bax、Bcl-2的表达;同时测定以上四种凋亡蛋白的灰度值;(3)光镜下观察甲状腺组织病理形态学的改变。统计方法:采用spss17.0将各组实验结果进行统计学分析。结果:1.检测TgAb及TpoAb的变化:疗前各治疗组及模型组与正常组比较TgAb及TpoAb均显著升高(P<0.01),各治疗组与模型组组间没有明显差异(P>0.05),说明自身免疫性甲状腺炎大鼠造模成功;疗后软坚消瘿颗粒各剂量组及雷公藤组的TgAb、TpoAb与模型组比较有显著差异(P<0.01),说明各治疗组均具有降低血清双抗体的作用;软坚消瘿中、高剂量组及雷公藤组与低剂量组组间比较有显著差异(P<0.01)说明中、高剂量组及雷公藤组作用优于低剂量组;低剂量组与正常组比较有显著性差异(P<0.01),说明低剂量组虽有降低双抗体的作用,但不能将其恢复接近正常;中、高剂量组及雷公藤组与正常组比较无显著性差异(P>0.05),说明中、高剂量组及雷公藤组可有效降低抗体至接近正常;中、高剂量与雷公藤组比较无显著性差异(P>0.05),说明中、高剂量组与雷公藤组功效相当。2.光镜下观察各组甲状腺组织病理形态的变化:正常组,可见大量甲状腺滤泡,滤泡壁由单层立方上皮围成,形成双层壁,间质可见少量的炎性细胞,腔内含有的红色胶状物染色均匀;模型组,大鼠甲状腺形态结构,与正常组比较,外周甲状腺滤泡、甲状腺滤泡上皮细胞呈圆形或卵圆形,滤泡体积较大,呈球形,滤胞壁变薄,呈单层扁平上皮细胞,界限不清楚,中间甲状腺滤泡体积固缩,着色不均匀,间质和滤胞壁、滤胞腔内可见大量的炎性细胞,腔内含红色胶状物着色深浅不一;雷公藤组,甲状腺滤泡大小适中,排列规则,滤泡上皮细胞结构完整,形成双层壁,间质间可见少量的炎性细胞,滤泡腔内红色胶状物着色较均匀;低剂量组,甲状腺滤泡上皮细胞较完整,滤泡体积较大,呈球形,滤胞壁界限清楚,有少量异染色质及炎性细胞,腔内含红色胶状物着色均匀;中剂量组,甲状腺滤泡大、小不一,结构较正常,滤胞壁较完整,上皮细胞界限清楚,有少量异染色质,仍可见少量炎性细胞,滤胞腔内红色胶状物着色均匀;高剂量组,甲状腺滤泡排列稀疏,滤泡上皮细胞结构较完整,形成双层壁,可见少量间质和炎性细胞,滤泡腔内红色胶状物着色均匀。3.检测凋亡蛋白的变化:疗后,模型组与正常组比较Fas、Fas-L、Bax显著升高,Bcl-2显著降低(P<0.01),说明凋亡现象已发生;软坚消瘿颗粒各剂量组及雷公藤组与模型组比较有显著差异(P<0.01),说明各治疗组均具有调控凋亡蛋白,降低Fas、Fas-L、Bax,升高Bcl-2的作用,延缓或逆转凋亡现象的发生;软坚消瘿中、高剂量组及雷公藤组与低剂量组组间比较有显著差异(P<0.01)说明中、高剂量组及雷公藤组作用优于低剂量组;低剂量组与正常组比较有显著性差异(P<0.01),说明低剂量组虽有降低Fas、Fas-L、Bax同时升高Bcl-2的作用,但不能将其恢复至正常水平;中、高剂量组及雷公藤组与正常组比较无显著性差异(P>0.05),说明中、高剂量组及雷公藤组可有效降低Fas、Fas-L、Bax同时升高Bcl-2至接近正常;中、高剂量与雷公藤组比较无显著性差异(P>0.05),说明中、高剂量组与雷公藤组的功效相当。4.免疫组化结果:各组甲状腺组织细胞Fas、Fas-L、Bax、Bcl-2均表达于滤泡上皮细胞胞质内,胞膜也有少量表达,均呈棕黄色或棕褐色颗粒状分布。正常组甲状腺滤泡上皮细胞结构完整,大小均匀,有少量染色颗粒分布;模型组甲状腺滤泡上皮细胞结构破坏严重,大小不均匀,染色颗粒多,颜色深;雷公藤组:甲状腺滤泡上皮细胞结构较少破坏,染色颗粒分布减少;软坚消瘿颗粒各剂量组:甲状腺滤泡上皮细胞结构较少破坏,染色颗粒分布减少。结论:1.自身免疫性甲状腺炎大鼠TgAb及TpoAb显著升高,甲状腺组织损伤严重,说明AIT动物模型造模成功;Fas、Fas-L、Bax显著升高,Bcl-2降低,说明凋亡现象已发生。2.软坚消瘿颗粒各剂量组及雷公藤组均可有效降低大鼠血清TgAb及TpoAb,从而起到治疗作用;中、高剂量组作用与雷公藤组相当;中、高剂量组及雷公藤组疗效优于低剂量组;中、高剂量组、雷公藤组作用接近正常组。3.软坚消瘿颗粒及雷公藤组通过调控凋亡蛋白,起到抑制细胞凋亡的作用,从而减轻或延缓本病的发生与发展。4.软坚消瘿颗粒各治疗组与雷公藤组均具有抑制甲状腺病理损伤的作用。

全文目录


摘要  4-7
Abstract  7-11
前言  11-12
文献综述  12-24
1 实验材料  24-25
2 实验方法  25-26
3 结果  26-30
分析讨论  30-37
结论  37-38
参考文献  38-42
附图  42-47
致谢  47-48
个人简历  48

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