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NDGA联合塞来昔布对人结肠癌细胞HT-29诱导凋亡的研究

作　者: 邓卫巍
导　师: 刘春英
学　校: 遵义医学院
专　业: 内科学
关键词: 去甲二氢愈创木酸 塞来昔布 HT-29细胞系 细胞调亡 凋亡蛋白质
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 3次
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内容摘要


目的：通过单独及联合应用选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布和5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)抑制剂去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiare-tic acid,NDGA)处理体外培养的人结肠癌细胞株HT-29,观察药物对细胞增殖和凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法：HT-29细胞常规培养,取对数生长期细胞进行实验。用不同浓度塞来昔布及NDGA处理HT-29细胞,应用甲基偶氮唑蓝(thiazolyl blue tetrazlium bromide,MTT)法检测细胞生长增殖情况；用倒置相差显微镜观察细胞形态变化；用AnnexinⅤ/PI法检测凋亡；用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HT-29细胞Caspase-3mRNA变化,研究塞来昔布及NDGA对HT-29细胞诱导凋亡的影响和可能的机制。结果：1、MTT法显示塞来昔布和NDGA均可以抑制HT-29细胞生长,随着浓度和时间的增加,其抑制率呈上升趋势,两种药物的联合应用较同等剂量的药物单独应用效果明显。2、倒置相差显微镜下可以看到塞来昔布及NDGA都能使体外培养的结肠癌HT-29细胞的形态发生明显变化,而两种药物联合应用后细胞变化更明显。3、激光共聚焦显微镜下可以看到应用塞来昔布及NDGA后可以引起HT-29细胞凋亡。4、RT-PCR检测药物作用后Caspase-3的变化,可以发现药物作用后Caspase-3表达上调,两种药物联合应用后上调最多。结论：单独应用塞来昔布和MDGA均可以抑制体外培养的HT-29细胞增殖,并诱导细胞凋亡,而联合应该效果优于单独应用,其抑制HT-29细胞增殖、诱导凋亡可能与激活Caspase-3途径有关。

全文目录


英文缩略词表  5-6中文摘要  6-7Abstract  7-8前言  8-10材料与方法  10-15结果  15-21讨论  21-24结论  24-25参考文献  25-30综述:花生四烯酸代谢与结肠癌  30-37  参考文献  34-37致谢  37-38作者简介  38

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 结肠肿瘤
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