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益气活血温阳利水法对心衰大鼠水潴留机制的实验研究

作　者: 张晓华
导　师: 隋殿军
学　校: 长春中医药大学
专　业: 中医内科学
关键词: 益气活血温阳利水 心力衰竭 血管加压素 水通道蛋白2
分类号: R259
类　型: 博士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


心力衰竭(简称心衰)属心血管疾病的急危重证,严重威胁人类健康,因心衰病人多伴有水肿、胸水、腹水等,故心衰也属水液代谢障碍性疾病,对于心衰水液潴留机制的研究,很多学者从多个系统进行过研究,包括肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)、精氨酸加压素系统、交感神经系统、内皮素系统、利钠肽系统(心房利钠肽、脑利钠肽)等等,随着水通道蛋白的发现,尤其是水通道蛋白2的出现,为研究心力衰竭水液潴留机制开辟了一个新的途径,精氨酸血管加压素-血管加压素V2受体-水通道蛋白2系统在心衰水液潴留过程中的作用逐渐被学者们重视及研究,现有学者指出心力衰竭水潴留机制的主要途径为心输血量下降-血管加压素水平升高-肾脏集合管V2受体激活-水通道蛋白2激活和／或基因表达上调-水重吸收增加,水通道蛋白2(AQP2)主要受精氨酸血管加压素(AVP)调控,而AVP通过肾脏V2受体调控AQP2,故AVP-V2受体-AQP2系统在调节机体水液代谢中起着重要作用。益气活血,温阳利水法是目前公认的治疗心衰的大法,是根据心衰的病机：气阳亏虚,血瘀水结而定的,目前中医药对于本法的实验研究主要集中在血流动力学、RAAS系统、利钠肽系统、心肌重塑等方面,对于水潴留机制的研究还处于起步阶段,现有研究主要是单味中药(如茯苓、泽泻、大黄、黄芪、丝瓜络等)对于水通道蛋白2的影响,也有部分学者应用中药复方观察其对水通道蛋白2的影响,而对于整个精氨酸血管加压素-V2受体-水通道蛋白2系统的研究较少,未能从整体上阐明本法对于心衰水潴留的作用机制。目的：研究益气活血温阳利水法对于心衰大鼠精氨酸血管加压素-V2受体-水通道蛋白2系统的影响,以探讨本法对心衰水液潴留的作用机理。方法：选择健康Wistar大鼠,应用腹腔注射阿霉素(3mg/kg,每周1次,连续6周)及睡眠剥夺,造成心衰大鼠模型,然后分空白组、模型组,芪苈强心组、中药高剂量、中剂量、低剂量6组,服药4周后应用ELISA法观察6组大鼠服药后血浆精氨酸血管加压素(AVP)浓度；应用免疫组化、蛋白印迹(Western-Blot)方法检测肾组织(近髓部)血管加压素V2受体(V2R)、水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达情况；应用rt-PCR检测肾组织(近髓部)血管加压素V2受体、水通道蛋白2mRNA相对表达量的变化情况。结果：(?)较,有统计学差异；可减弱肾脏组织V2R、AQP2蛋白表达及m RNA相对表达量,结果优于模型组,以中、高剂量组为著。结论：益气活血温阳利水法通过降低血浆中AVP浓度,下调V2R、AQP2蛋白表达、m RNA因子表达来作用于精氨酸血管加压素-V2受体-水通道蛋白2系统的每个环节而起到改善水液潴留之目的。

全文目录


中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
英文缩略语  10-11
前言  11-13
第一部分 文献综述  13-27
  综述1 心力衰竭中医病机及辨证论治研究进展  13-21
    1 病名论述  13
    2 病机及证候演变  13-17
    3 辨证论治  17-18
    4 中医药对于心衰发病机理的研究  18-20
    5 中医药关于心衰的临床研究  20-21
    6 问题与展望  21
  综述2 中医药对于心力衰竭水潴留机制的研究进展  21-27
    1 现代医学对于心衰水潴留机制的认识  21-22
    2 中医学对于心衰水潴留机制的认识  22-24
    3 中医学对于心衰水潴留机制的实验研究  24-26
    4 问题与展望  26-27
第二部分 实验研究  27-47
  1 实验材料与方法  27-28
  2 实验1 心力衰竭大鼠模型的建立  28-29
  3 实验2 益气活血温阳利水法对血浆中精氨酸血管加压素浓度的影响  29-32
  4 实验3 益气活血温阳利水法对大鼠肾脏组织V2R及AQP-2蛋白表达的影响  32-41
    4.1 免疫组织化学法  32-36
    4.2 Western blot 法  36-41
  5 实验4 益气活血温阳利水法对大鼠肾脏组织V2R及AQP-2 mRNA表达的影响  41-47
第三部分 讨论  47-64
  1 慢性心衰的中医学认识  47-51
    1.1 气阳亏虚 血瘀水结是慢性心力衰竭的病机关键  47-50
    1.2 益气活血温阳利水是慢性心力衰竭的治疗大法  50-51
  2 益气活血温阳利水方释义及方药分析  51-60
    2.1 方药经典记载及其配伍关系  51-57
    2.2 方药现代药理研究  57-60
  3 动物实验研究结果分析  60-64
    3.1 动物模型分析  60-61
    3.2 对肾脏精氨酸血管加压素的影响  61-62
    3.3 对肾脏组织血管加压素V2受体的影响  62-63
    3.4 对肾脏组织水通道蛋白2表达的影响  63-64
结语  64-66
致谢  66-67
参考文献  67-82
附图  82-84

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