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参芪复方对KKAy小鼠糖尿病大血管病变骨骼肌差异基因表达影响的实验研究

作　者: 朱海燕
导　师: 谢春光
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中医内科学
关键词: 2型糖尿病 糖尿病大血管病变 骨骼肌 基因芯片 参芪复方
分类号: R259
类　型: 博士论文
年　份: 2013年
下　载: 7次
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内容摘要


目的：拟探寻参芪复方对糖尿病大血管病变中骨骼肌的保护作用,并揭示其作用机理,为临床用药提供理论依据。方法：KKAy小鼠喂饲含有L-NAME饮水同时喂饲高脂饲料以复制2型糖尿病大血管病变模型。入选小鼠随机分为KKAy组、模型组、参芪复方组和罗格列酮组,每组15只。另设15只C57BL/6J小鼠为正常组,共5组。造模同时开始给药,连续8周,期间观察动物一般状况,摄食饮水情况,体重变化情况,监测血糖。实验结束后测量各组小鼠血脂、血清胰岛素,计算胰岛素抵抗指数,观察腹主动脉、骨骼肌的形态学改变,并应用基因芯片技术对参芪复方组-模型组、模型组-KKAy组的骨骼肌进行差异基因检测。结果：参芪复方可改善模型动物的一般状态,减少多饮、多食的状况,减轻体重,降低血糖,降低血清TC、 TG水平(P<0.05)。参芪复方可减轻模型动物腹主动脉内膜水肿,减轻骨骼肌细胞萎缩、水肿、断裂和炎症状况。参芪复方组-模型组、模型组-KKAy组的差异表达基因均涉及多个生物学过程和多个信号通路,两个比较组差异基因均涉及的生物学过程为细胞死亡,均涉及的信号通路为代谢途径和细胞周期。两个比较组呈逆向表达的7条差异基因为Celsr2、 Rilp11、 Dlx6as、2010004M13Rik、Anapc13、 Gm6097、Ddx39b。结论：参芪复方可改善模型动物的一般状态,减轻其多饮、多食、肥胖的状况,可降低血糖,调节糖、脂代谢紊乱状态。参芪复方可改善模型动物骨骼肌细胞萎缩、水肿、断裂和炎症状况,减轻骨骼肌细胞的损伤。参芪复方可对糖尿病大血管病变中骨骼肌起保护作用,其机理可能与调节细胞死亡途径、调节代谢和细胞周期通路以及调控Celsr2、Rilp11、 Dlx6as、2010004M13Rik、 Anapc13、 Gm6097、 Ddx39b基因表达有关。

全文目录


中文摘要  2-4
Abstract  4-6
缩略词  6-10
前言  10-13
第一部分 参芪复方对KKAY小鼠糖尿病大血管病变糖脂代谢影响的实验研究  13-32
  1 材料  13-15
    1.1 实验动物  13
    1.2 饲养环境及饲料  13
    1.3 实验用药品  13-14
    1.4 主要试剂及试剂盒  14
    1.5 主要仪器和材料  14-15
  2 方法  15-18
    2.1 分组及造模方法  15
    2.2 给药方法  15-16
    2.3 标本采集与处理  16
    2.4 观察指标及检测方法  16-18
    2.5 统计学方法  18
  3 实验结果  18-32
    3.1 动物一般情况的观察  18-19
    3.2 各组小鼠摄食量情况  19-20
    3.3 各组小鼠饮水量的变化情况  20-21
    3.4 各组小鼠体重水平的变化情况  21-23
    3.5 各组小鼠血糖水平的变化情况  23-25
    3.6 各组小鼠血脂四项的情况  25-26
    3.7 各组小鼠血清胰岛素水平的变化  26
    3.8 各组小鼠胰岛素抵抗指数HOMA-IR的变化情况  26-27
    3.9 腹主动脉及腓肠肌形态改变  27-32
第二部分 参芪复方对KKAY小鼠糖尿病大血管病变骨骼肌差异基因表达影响的实验研究  32-53
  1 材料  32-33
    1.1 实验动物、饲料(见实验一)  32
    1.2 实验仪器与试剂  32-33
  2 方法  33-42
    2.1 实验动物造模、给药方法、取材方法(见实验一)  33
    2.2 基因芯片的制备方法  33-39
    2.3 芯片数据处理  39
    2.4 数据信息挖掘  39-42
  3 结果与分析  42-53
    3.1 RNA质检结果及电泳图谱  42-44
    3.2 差异表达基因筛选结果  44-48
    3.3 差异表达基因GO分析  48-50
    3.4 差异表达基因Pathway分析  50-52
    3.5 共同逆向差异表达基因  52-53
讨论  53-89
  1. 中医对糖尿病及糖尿病骨骼肌病变的认识  53-57
  2. 西医对糖尿病骨骼肌病变的认识  57-61
  3. 实验动物的选择  61-65
  4. 糖尿病大血管病变模型评价  65-67
  5. 阳性对照药的选择  67-68
  6. 参芪复方组成及方解  68-70
  7. 参芪复方对糖尿病大血管病变小鼠的糖脂代谢的影响  70-75
    7.1 参芪复方对糖尿病大血管病变小鼠的一般状况、摄食量、饮水量以及体重的影响  70-71
    7.2 参芪复方对糖尿病大血管病变小鼠的血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数的影响  71-72
    7.3 参芪复方对糖尿病大血管病变KKAy小鼠血脂的影响  72-73
    7.4 参芪复方对KKAy小鼠腹主动脉、骨骼肌形态学改变的影响  73-75
  8. 应用基因芯片技术研究糖尿病的前景  75-76
  9. 参芪复方对KKAy小鼠糖尿病大血管病变骨骼肌保护作用的机理探讨  76-89
    9.1 参芪复方组-模型组、模型组-KKAy组差异表达基因GO功能分析  76-80
    9.2 参芪复方组-模型组、模型组-KKAy组差异表达基因Pathway分析  80-85
    9.3 共同逆向差异表达基因分析  85-89
创新性与特色  89-90
问题与展望  90-91
结论  91-92
致谢  92-93
参考文献  93-98
附件一：附表  98-104
附件二：综述  104-116
  参考文献  113-116
公开发表的学术论文、专著及科研成果  116-117
参加的科研项目  117-118

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