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电针刺激“足三里”、“曲池”穴对自发性高血压大鼠血压及心肌纤维化的影响

作　者: 王珊珊
导　师: 张立德
学　校: 辽宁中医药大学
专　业: 针灸推拿
关键词: 自发性高血压足三里曲池心肌纤维化
分类号: R245
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：本实验通过观察电针足三里、曲池对自发性高血压大鼠(SHR)尾动脉收缩压及心肌胶原蛋白、基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9、转化生长因子-β1(TGF-β1)含量的影响，评价其降压效果及探讨针刺足三里、曲池干预高血压进程中心肌纤维化改善机制；进一步探求针刺足三里、曲池对心脏具有保护作用。为临床辨证治疗施以电针足三里、曲池降压提供科学的实验数据与理论基础。材料与方法：采用随机对照法将24只24周龄SHR分为3组，即SHR组(给予蒸馏水)、培哚普利组(0.4mg.kg-1d-1)、针灸治疗组(针刺足三里、曲池)，每组8只，同龄同系正常血压的京都种大鼠(WKY)8只作为WKY组(给予蒸馏水)。大鼠日一次灌胃，智能无创血压计测量大鼠初次给药前以及给药后4h、2周、4周、6周大鼠尾动脉收缩压变化情况，每次测量时间为给药后4h。连续治疗6周。大鼠禁食，自由饮水12h后，各组大鼠称重，10%水合氯醛腹腔麻醉(3ml/kg体重)。大鼠麻醉后固定于鼠台上，用0.5％碘伏消毒大鼠腹部皮肤，剪开皮肤及腹膜，充分暴露心脏，取心脏组织约50mg加入1mL Trizol试剂，于-70℃冰箱保存，显微镜观察HE染色心肌组织病理切片，进行心肌病理形态学观察。另取心肌组织,4℃生理盐水洗净吸干,去除心房和右心室,保留左心室,取垂直于长轴中1/3组织,中性福尔马林固定,石蜡包埋,免疫组化法检测。取心脏组织约50mg加入1mL Trizol试剂，取心肌组织总RNA，逆转录成cDNA，再分别加入相应引物，扩增大鼠TGF-β1及MMP-2、 MMP-9基因，以β-actin作为内参。用凝胶成像分析系统观察并拍摄电泳图象，定量分析各组基因表达强度，用RT-PCR检测方法检测TGF-β1、及MMP-2、MMP-9的蛋白表达。采用SPSS16.0软件，组间比较用单因素方差分析，结果均以均数±标准差（x±s）表示，P<0.05被认为有显著性差异。结果：1.电针足三里、曲池对SHR尾动脉压收缩压的影响统计结果显示：用药前，与WKY组相比较，其它各组大鼠收缩压均高于WKY组（P<0.01）；药后4h，各组大鼠收缩压无明显变化；用药2周后，培哚普利组、电针组大鼠收缩压明显下降，与模型组相比有统计学意义（P<0.01）；药后4周及药后6周后，培哚普利组、电针组收缩压持续降低，与SHR组相比较，有统计学意义（P<0.01），二者之间无统计学意义。2.电针足三里、曲池对心肌组织形态学的影响经针刺治疗6周后，与SHR组相比，WKY组心肌细胞排列整齐,心肌间质无纤维化现象；与针刺组、培哚普利组相比，SHR组出现较心肌细胞排列杂乱无章,被深入的纤维分隔紧裹,细胞间网络增粗变密,且该处心肌细胞受压萎缩或出现空泡变性,心肌纤维分布明显不均，走向紊乱,纤维粗大，可见溶解断裂,细胞间质纤维化增多。3.电针足三里、曲池检测心肌胶原的含量的表达SHR组心肌间质、血管周围有丰富表达的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白,而WKY组的心肌间质Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达显色明显低于SHR组。培哚普利组、电针组的表达明显得以改善,尤以电针组显色减少显著。4.电针足三里、曲池对心肌TGF-β1及MMP-2、 MMP-9含量的测定与WKY组相比，SHR组大鼠心肌MMP-2、MMP-9的表达量明显减少，而TGF-β1的表达量明显增多（P<0.01）；经针刺治疗6周后，与针刺组、培哚普力组相比，MMP-2、MMP-9的表达量较SHR组显著升高，而TGF-β1的表达量较SHR组显著降低（P<0.05），说明针刺能干预心肌纤维化进程，此作用强度与西药组相似。结论：1.针刺足三里、曲池有对SHR尾动脉收缩压表现出较好的降压效果，治疗4周达到稳定期；与培哚普利组降压效果相似。2.针刺足三里、曲池能有效改善SHR大鼠心肌病理形态结构。3.针刺足三里、曲池抑制心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达，下调TGF-β1的蛋白表达，增加心肌组织中MMP-2、MMP-9的表达含量。4.针刺足三里、曲池对心肌具有保护作用。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-8
前言  8-10
文献综述  10-22
1 实验材料  22
2 实验方法  22-25
3 结果  25-29
分析讨论  29-35
结论  35-36
参考文献  36-45
致谢  45-46
个人简历  46

电针刺激“足三里”、“曲池”穴对自发性高血压大鼠血压及心肌纤维化的影响

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