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广西四个桑树品种对不同浓度NaCl胁迫的响应研究

作　者: 张薇
导　师: 孟智启；石放雄
学　校: 南京农业大学
专　业: 特种经济动物饲养
关键词: NaCl胁迫桑种子萌发生理生化指标 DNA损伤 NHX1
分类号: S888.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

本研究以广西品种桑特优1号、桑特优2号、桂桑特优12号和桂桑特优62号为研究对象。通过种子萌发实验,调查不同品种桑种子受各个浓度的NaCl胁迫时的萌发状况。另用加有NaCl的沙土栽种桑苗,测量各项生理生化指标,包括：成苗率、株高、叶片面积、脯氨酸含量、离子渗漏率、POD活性、CAT活性、MDA含量以及叶绿素含量,来综合评价4个品种桑苗的耐盐性能。此外,使用RAPD技术检验盐敏感品种桑苗叶片基因组DNA在不同浓度NaCl胁迫后的损伤程度,在分子层面调查NaCl胁迫对桑苗的损害。最后,通过荧光定量PCR检验NaCl胁迫NHX1基因在盐敏感桑苗根、茎、叶中的表达情况。本文结论如下：1、NaCl明显抑制了桑树种子的发芽率、发芽势、活力指数、发芽指数、幼苗根长及苗长,并随着盐浓度的上升都呈下降趋势。隶属函数综合分析得4个桑品种耐盐高低顺序是：桂12>桂62>特2>特1。2、NaCl胁迫下,桑苗的成苗率、株高、叶片面积在NaCl胁迫后均呈下降趋势,沙培桑苗的POD和CAT活性随盐浓度的上升亦下降,而脯氨酸含量、离子渗漏率MDA含量以及叶绿素含量在NaCl胁迫后都有所增加。根据各项生理生化指标进行隶属函数分析,表明4个品种桑树耐盐高低顺序是：桂12>桂62>特2>特1。3、沙培桑苗受NaCl胁迫后,FO值随盐浓度的上升而逐渐增大,Fm值则基本保持稳定,Fv/Fm值呈下降趋势。Y(Ⅱ)和ETR在桑苗受NaCl胁迫后下降,Y(NO)则上升。而NPQ值的变化在品种间不一致。4、利用RAPD标记技术检测NaCl胁迫对桑树叶片DNA的损伤。RAPD标记技术和聚类分析都说明盐浓度的高低与叶片DNA的损伤程度之间呈正相关关系。5、使用荧光定量PCR方法研究桑苗根部、茎部和叶部的NHX1基因在NaCl胁迫前后的表达谱。NHX1基因的表达量在NaCl胁迫后有所增加。

全文目录

摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
第一章文献综述  9-25
  1 土壤盐渍化现状及治理  9-10
  2 植物耐盐研究进展  10-16
  3 桑树耐盐性研究进展  16-17
  4 本研究的目的与意义  17-19
  参考文献  19-25
第二章不同浓度NaCl胁迫对桑树种子萌发的影响研究  25-33
  1 材料与方法  25-27
    1.1 供试材料  25
    1.2 试验方法  25-26
    1.3 测定指标  26
    1.4 数据计算和统计分析  26
    1.5 数据统计和分析  26-27
  2 结果与分析  27-31
    2.1 NaCl胁迫对各品种桑种子发芽的影响  27-28
    2.2 NaCl胁迫下桑种子萌发参数的变化  28-30
    2.3 不同桑树品种间萌发阶段耐盐性的综合评价  30-31
  3 讨论  31-32
  参考文献  32-33
第三章 NaCl胁迫对桑苗生理生化指标影响的研究  33-45
  1 材料与方法  33-35
    1.1 供试材料  33
    1.2 试验方法  33
    1.3 指标测量方法  33-35
  2 结果与分析  35-39
    2.1 NaCl胁迫对沙培苗形态发育的影响  35-36
    2.2 NaCl胁迫对不同品种沙培苗生理生化指标的影响  36-38
    2.3 NaCl胁迫对沙培苗生理生化指标的影响  38
    2.4 隶属函数综合评价四个桑树品种的耐盐性  38-39
  3 讨论  39-42
    3.1 NaCl胁迫对桑苗成苗率、株高和叶片面积的影响  39
    3.2 NaCl胁迫对桑苗脯氨酸含量的影响  39-40
    3.3 NaCl胁迫对桑苗离子渗漏率的影响  40
    3.4 NaCl胁迫对桑苗POD活性的影响  40
    3.5 NaCl胁迫对桑苗CAT活性的影响  40-41
    3.6 NaCl胁迫对桑苗MDA含量的影响  41
    3.7 NaCl胁迫对桑苗叶绿素含量的影响  41
    3.8 耐盐性综合评定  41-42
  参考文献  42-45
第四章 NaCl胁迫对桑树叶绿素荧光参数的影响  45-53
  1 材料与方法  45
    1.1 供试材料  45
    1.2 试验方法  45
  2 结果与分析  45-48
    2.1 NaCl胁迫对4个品种沙培桑苗FO、Fm及Fv/Fm的影响  45-46
    2.2 NaCl胁迫对4个品种沙培桑苗Y(Ⅱ)和Y(NO)的影响  46-47
    2.3 NaCl胁迫对4个品种沙培桑苗NPQ和ETR的影响  47-48
  3 讨论  48-51
    3.1 关于FO、Fm、Fv/Fm  48-49
    3.2 关于Y(Ⅱ)和Y(NO)  49
    3.3 关于NPQ和ETR  49-51
  参考文献  51-53
第五章 NaCl胁迫对桑树叶片DNA变异的影响  53-61
  1 材料与方法  53-54
    1.1 供试材料  53
    1.2 桑树NaCl胁迫处理  53
    1.3 桑树叶片DNA提取  53-54
    1.4 RAPD扩增随机引物的筛选  54
    1.5 RAPD分析  54
    1.6 数据分析  54
  2 结果与分析  54-56
    2.1 桑叶DNA的提取  54
    2.2 RAPD分析引物的筛选  54-55
    2.3 不同浓度NaCl胁迫桑树叶片DNA样品RAPD分析  55
    2.4 不同浓度NaCl胁迫后的桑树叶片基因组DNA的损伤程度分析  55-56
  3 讨论  56-59
    3.1 选择DNA损伤作为耐盐指标的原因  56-57
    3.2 关于测量DNA损伤的方法  57-58
    3.3 关于本文的研究结果  58-59
  参考文献  59-61
第六章 NaCl胁迫对桑树Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的表达变化的研究  61-67
  1 材料与方法  61-63
    1.1 供试材料  61
    1.2 试验方法  61-63
  2 结果与分析  63
    2.1 NaCl胁迫下MaNHX1基因在幼苗中的表达分析  63
  3 讨论  63-65
  参考文献  65-67
全文总结  67-69
致谢  69-71
攻读硕士期间待发表的论文  71

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