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猪常温精液稀释液配方的筛选与优化

作　者: 刘玉
导　师: 胡建宏
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 农业推广
关键词: 猪精液稀释液常温保存牛血清白蛋白
分类号: S828
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

猪人工授精的成败在很大程度上取决于精液的质量。由于猪精子对低温比较敏感,冷冻保存精液的效果较差,因而在猪人工授精中主要使用常温保存精液。为此,国内外研究者开展了大量关于猪精液常温保存的研究工作,并研制出多种稀释液配方。随着我国猪人工授精范围的逐渐扩大,精液稀释液的需求量也越来越大,而对种类繁多效果不一的稀释液配方,由于缺少系统的理论研究,为养殖企业在稀释液配方的选择上带来诸多不便。因此,研究开发国内优良稀释液配方,对增加养猪效益、推动猪人工授精技术的应用与推广具有重要意义。为筛选出保存效果稳定的稀释液配方,本研究选取5种常用的稀释液配方进行对比试验,并筛选出一种保存效果较好的稀释液配方进行优化,最后将自配的两种保存效果较好稀释液与生产上常用的3种进口的中长效稀释粉进行对比试验,为猪人工授精中稀释液配方的选择和研发提供依据。本研究获得以下主要结果：1.在5种常用的稀释液中,Modena稀释液保存后精子的有效存活时间(5.5d)最长,显著高于BTS和Ⅰ稀释液(P<0.05)：BTS和Ⅰ稀释液保存后精子的有效存活时间显著高于：Kiev和IVT稀释液(P<0.05)；但BTS和Ⅰ稀释液之间差异不显著(P>0.05),精子的有效存活时间分别为3.4d和3.9d; Kiev和IVT稀释液之间差异不显著(P>0.05),精子的有效存活时间分别为2.2d和1.8d。在1-2d的精液保存中,BTS、Modena和Ⅰ稀释液保存后精子的活力、质膜完整率和顶体完整率显著高于Kiev和IVT稀释液(P<0.05), BTS、Modena和Ⅰ稀释液之间差异不显著(P>0.05)；在3-4d的精液保存中,Modena稀释液保存后精子的活力、质膜完整率和顶体完整率显著高于BTS和Ⅰ稀释液(P<0.05)。2.Modena中添加3～5g/L的BSA能显著延长猪精子有效保存时间、提高精子活力和质膜完整率、降低MDA的浓度(P<0.05),但对顶体完整率和T-AOC的浓度影响不大(P>0.05),其中添加4g/L的BSA效果最好,有效保存时间为7.5d,经过7d保存后精r活力、质膜完整率、顶体完整率分别为0.54、49%和78%,T-AOC和MDA的浓度分别为1.03U/mL和17.51nmol/mL。研究结果表明,Modena中添加BSA能够提高常温保存精子的质量,其适宜添加量为4g/L。3.在3种商品稀释液和两种自配稀释液中,越丰-Ⅰ稀释液保存精液后精子的有效存活时间(11.9d)最长,显著高于Modena+BSA和CXM-MY稀释液(P<0.05)；Modena+BSA和CXM-MY稀释液保存后精子的有效存活时间显著高于Modena和CXM-ZHL稀释液(P<0.05)；但Modena+BSA和CXM-MY稀释液之间差异不显著(P>0.05),精子的有效存活时间分别为9.5d和9.9d；Modena和CXM-ZHL稀释液之间差异不显著(P>0.05),精子的有效存活时间分别为6.1d和5.6d。当精液保存时间小于6d时,越丰-Ⅰ、Modena+BSA和CXM-MY稀释液中精子的活力、质膜完整率和顶体完整率显著高于Modena和CXM-ZHL稀释液(P<0.05),越丰-Ⅰ、Modena+BSA和CXM-MY稀释液之间差异不显著(P>0.05)：当精液保存时间大于6d时,越丰-Ⅰ稀释液中精子的活力、质膜完整率和顶体完整率显著高于Modena+BSA和CXM-MY稀释液(P<0.05)。另外,5种稀释液的pH都呈弱碱性,保存精液后pH呈先上升后下降再缓慢上升的趋势。精液保存4d后,CXM-ZHL稀释液pH下降较快,其他4种稀释液的pH平稳上升。

全文目录

摘要  6-8
ABSTRACT  8-13
第一章猪精液常温保存稀释液研究进展  13-23
  前言  13
  1.1 猪人工授精技术的应用概况  13-14
    1.1.1 国外猪人工授精技术的进展和现状  13-14
    1.1.2 国内猪人工授精技术的进展和现状  14
  1.2 猪精液常温保存的研究进展  14-20
    1.2.1 影响精液保存的主要因素  15-18
    1.2.2 稀释液的主要成分  18-20
  1.3 精子质量的检测指标  20-21
    1.3.1 精子活力  20-21
    1.3.2 质膜完整率  21
    1.3.3 顶体完整率  21
    1.3.4 其他指标  21
  1.4 本研究的目的和意义  21-23
    1.4.1 我国猪常温精液稀释液存在的问题  21-22
    1.4.2 本研究的目的  22
    1.4.3 本研究的意义  22-23
第二章不同稀释液配方对猪精液常温保存效果的影响  23-29
  前言  23
  2.1 材料与方法  23-25
    2.1.1 试验材料  23-24
    2.1.2 试验方法  24
    2.1.3 检测方法  24-25
    2.1.4 统计分析  25
  2.2 结果与分析  25-27
    2.2.1 不同稀释液对猪精子活力的影响  25-26
    2.2.2 不同稀释液对猪精子质膜完整率的影响  26
    2.2.3 不同稀释液对猪精子顶体完整率的影响  26-27
  2.3 讨论  27-28
    2.3.1 不同稀释液对猪精子活力及有效保存时间的影响  27-28
    2.3.2 不同稀释液对猪精子质膜完整率和顶体完整率的影响  28
  2.4 小结  28-29
第三章 BSA对猪精液常温保存效果的影响  29-35
  前言  29
  3.1 材料与方法  29-30
    3.1.1 试验材料  29
    3.1.2 试验方法  29-30
    3.1.3 检测方法  30
    3.1.4 统计分析  30
  3.2 结果与分析  30-33
    3.2.1 不同稀释液对猪精子活力的影响  30-31
    3.2.2 不同稀释液对猪精子质膜完整率的影响  31-32
    3.2.3 不同稀释液对猪精子顶体完整率的影响  32
    3.2.4 不同稀释液对猪精液中T-AOC和MDA浓度的影响  32-33
  3.3 讨论  33-34
    3.3.1 BSA对猪精子活力、有效保存时间、质膜完整率和顶体完整率的影响  33-34
    3.3.2 BSA对猪精液T-AOC和MDA浓度的影响  34
  3.4 小结  34-35
第四章自配稀释液与商品稀释液对猪精液常温保存效果的影响  35-42
  前言  35
  4.1 材料与方法  35-36
    4.1.1 试验材料  35
    4.1.2 试验方法  35-36
    4.1.3 检测方法  36
    4.1.4 统计分析  36
  4.2 结果与分析  36-40
    4.2.1 不同稀释液对猪精子活力的影响  36-37
    4.2.2 不同稀释液对猪精子质膜完整率的影响  37-38
    4.2.3 不同稀释液对猪精子顶体完整率的影响  38-39
    4.2.4 不同稀释液保存猪精液后pH的变化  39-40
  4.3 讨论  40-41
    4.3.1 不同稀释液对猪精子活力、有效保存时间、质膜完整率和顶体完整率的影响  40
    4.3.2 不同稀释对猪精液保存过程中pH的影响  40-41
  4.4 小结  41-42
结论  42
进一步研究内容  42-43
参考文献  43-48
致谢  48-49
作者简介  49

猪常温精液稀释液配方的筛选与优化

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