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铁皮石斛组培体系优化

作 者: 孙贞
导 师: 崔永一
学 校: 浙江农林大学
专 业: 农业推广
关键词: 铁皮石斛 控根 有效成分 一次性成苗 移栽驯化
分类号: S682.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


本课题针对铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)组培生产中存在的根系畸形缠绕、成苗周期长、移栽成活率低等问题,开展了铁皮石斛组培苗控根技术、生长及有效成分积累机理和一次性成苗研究,从香蕉汁浓度、剪根处理和氮源比例对控根技术进行优化,探明铁皮石斛生长及有效成分积累机理,利用组织培养和无土栽培方法探讨铁皮石斛一次性成苗技术,为铁皮石斛工厂化生产提供依据。研究结果表明:1控根技术研究发现:香蕉汁浓度为70g/L控根效果最佳;剪根处理控根作用显著,但不利于植株生长;MS培养基中(NH4+—N):(NO3-—N)=40:20最佳。2有效成分积累机理研究发现:香蕉汁浓度为90g/L利于有效成分的积累,多糖产量达到3.7368×10-2g,生物碱产量达到2.9×10-5g;一代苗和二代苗剪根后多糖产量明显高于不做剪根处理的,三代苗与之相反。一代苗剪根后生物碱产量差别不大,二代苗和三代苗剪根后生物碱产量低于不做剪根处理的;MS培养基中((NH4+—N):(NO3-—N)=60:0多糖产量最佳为4.2323×10-2g,(NH4+—N):(NO3-—N)=50:10生物碱产量最佳为1.0×10-5g;香蕉与香蕉皮比例为3:1时多糖产量最佳为1.5814×10-2g,香蕉与香蕉皮比例为0:1时生物碱产量最佳为1.9×10-5g;光照强度为2000Lx对有效成分积累的效果最佳,多糖产量达到4.5328×10-2g,生物碱达到1.7×10-5g;双孔盖子的透气条件下多糖产量最佳为2.2325×10-2g,三孔盖子的透气条件下的生物碱产量达最大值1.4×10-5g。3一次性成苗集组织培养和无土栽培方法于一体,具有培养周期短,流程简单,生产成本低,移栽成活率高的特点。在穴盘液体培养过程中,生长在1/4MS营养液中的铁皮石斛鲜重、干重和成活率较好,分别为2.35g、0.19g和92.86%,均优于其他处理。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-7
目录  7-9
1 文献综述  9-14
  1.1 铁皮石斛的生物学特征  9-10
    1.1.1 形态特征  9
    1.1.2 生境特点  9-10
    1.1.3 地理分布  10
  1.2 铁皮石斛的组织培养与快速繁殖  10-11
  1.3 铁皮石斛次生代谢产物的研究  11-12
  1.4 一次性成苗技术  12
    1.4.1 一次性成苗  12
    1.4.2 一次性成苗的研究进展  12
    1.4.3 一次性成苗技术的应用前景  12
  1.5 国内外研究动态  12-13
  1.6 研究目的和意义  13-14
2 铁皮石斛控根技术研究  14-23
  2.1 材料与方法  14-15
    2.1.1 试验材料  14
    2.1.2 试验设计  14-15
    2.1.3 试验方法  15
  2.2 结果与分析  15-21
    2.2.1 香蕉汁浓度对铁皮石斛根系生长的影响  15-17
    2.2.2 剪根对铁皮石斛根系生长的影响  17-19
    2.2.3 MS 培养基中氨态氮与硝态氮的比例对铁皮石斛根系生长的影响  19-21
  2.3 小结  21-23
    2.3.1 香蕉汁浓度对铁皮石斛根系生长的影响  21
    2.3.2 剪根对铁皮石斛根系生长的影响  21
    2.3.3 MS 培养基中氨态氮与硝态氮比例对铁皮石斛根系生长的影响  21-23
3 铁皮石斛生长及有效成分积累机理研究  23-38
  3.1 材料与方法  23-24
    3.1.1 试验材料  23
    3.1.2 试验设计  23-24
    3.1.3 试验方法  24
  3.2 铁皮石斛中多糖含量的测定  24-25
    3.2.1 测定原理  24
    3.2.2 试验仪器、试剂及配制  24
    3.2.3 测定方法  24-25
  3.3 铁皮石斛中生物碱含量的测定  25-26
    3.3.1 测定原理  25
    3.3.2 试验仪器、试剂及配制  25-26
    3.3.3 测定方法  26
  3.4 结果与分析  26-35
    3.4.1 香蕉汁浓度对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  26-28
    3.4.2 剪根对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  28-29
    3.4.3 MS 培养基中氮形式对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  29-30
    3.4.4 蕉/皮比对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  30-32
    3.4.5 光照强度对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  32-34
    3.4.6 培养容器的透气性对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  34-35
  3.5 小结  35-38
    3.5.1 香蕉汁浓度对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  35-36
    3.5.2 剪根对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  36
    3.5.3 MS 培养基中氮形式对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  36
    3.5.4 蕉/皮比对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  36
    3.5.5 光照强度对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  36-37
    3.5.6 培养容器的透气性对铁皮石斛生长及有效成分积累的影响  37-38
4 一次性成苗技术研究  38-44
  4.1 材料与方法  38-39
    4.1.1 材料  38
    4.1.2 方法  38-39
  4.2 结果与分析  39-42
    4.2.1 营养液浓度对铁皮石斛生长的影响  39-40
    4.2.2 一次性成苗过程中营养液的 pH 和 EC 变化  40-42
  4.3 小结  42-44
5 结论与讨论  44-49
  5.1 结论  44-45
    5.1.1 铁皮石斛控根技术研究  44
    5.1.2 铁皮石斛生长及有效成分积累机理研究  44-45
    5.1.3 一次性成苗技术研究  45
  5.2 讨论  45-49
    5.2.1 铁皮石斛控根技术研究  45-46
    5.2.2 铁皮石斛生长及有效成分积累机理研究  46-48
    5.2.3 一次性成苗技术研究  48-49
参考文献  49-54
个人简介  54-55
致谢  55

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