学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

根癌农杆菌介导的水稻转基因体系研究

作　者: 唐海娟
导　师: 张红生
学　校: 南京农业大学
专　业: 农业推广
关键词: 水稻愈伤组织农杆菌介导遗传转化转化率
分类号: S511
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 155次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

水稻(Oryza sativa L.)是世界上最重要粮食作物之一,我国40%左右的粮食依赖于水稻生产,由于其基因组相对较小,且已经完成全基因组测序,目前已成为作物基因组研究的模式作物。农杆菌介导法由于具有操作简便、转化效率高、较少的插入拷贝数以及整合机制相对简单等优点,是目前普遍应用的水稻转基因方法。但由于水稻品种间的遗传差异对植株再生和转化效率有较大的影响,因此如何建立一种高效、稳定、实用的愈伤组织再生体系和农杆菌转化体系仍有许多问题需要研究。本研究以粳稻(Oryza sativa L. ssp.japonica)品种日本晴、中花11、苏御糯、爱知旭等品种为材料,进行成熟胚和幼胚的愈伤组织诱导培养,并利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化法将实验室克隆的0sCBL5、0sCBL6、0sNHX2、ZFP177、ZFP181、0sSNAP32、OsNPSN11、0sSYP71等21个基因对两种来源的愈伤组织进行转化,建立了高效农杆菌介导的水稻转基因体系。研究结果表明,粳稻幼胚的胚性愈伤组织诱导率相对高于成熟胚,江苏地方品种苏御糯的成熟胚和幼胚的愈伤组织诱导率都很高,分别为95.2%,96.2%,胚性率也在95%左右。用农杆菌转化法将不同目标基因转化苏御糯幼胚愈伤组织,抗性愈伤转化率和抗性植株转化率分别为70.5%、52.4%,明显高于中花11和日本晴两个水稻品种的转化率。对其可能的作用机理进行了讨论。

全文目录

摘要  6-7
ABSTRACT  7-8
符号与縮略语  8-9
文献综述  9-27
  第一章水稻转基因研究进展  9-27
    1. 植物转基因研究进展  9-10
    2. 水稻转基因研究进展  10-25
      2.1 水稻转化受体的研究进展  11-12
      2.2 水稻转基因方法的研究进展  12-17
      2.3 转基因在水稻育种上的研究进展  17-20
      2.4 水稻转基因面临的主要问题及对策  20-22
      2.5 生物安全性问题  22-24
      2.6 水稻基因工程的发展趋势  24-25
    3. 本研究的目的及意义  25-27
研究报告  27-43
  第二章根癌农杆菌介导的水稻转基因体系研究  27-43
    1. 前言  27
    2. 材料与方法  27-32
      2.1 植物材料  27
      2.2 菌株与质粒  27
      2.3 常用培养基  27-28
      2.4 愈伤组织的诱导  28-29
      2.5 根癌农杆菌的培养  29-30
      2.6 水稻愈伤组织与农杆菌的共培养  30
      2.7 抗性愈伤组织的筛选  30
      2.8 抗性愈伤组织的分化  30
      2.9 转基因植株再生及移栽  30
      2.10 转基因水稻幼苗基因组DNA提取  30-31
      2.11 转基因水稻植株的PCR检测  31
      2.12 统计方法  31-32
    3. 结果与分析  32-41
      3.1 成熟胚与幼胚愈伤诱导率差异  32-33
      3.2 不同品种成熟胚在不同培养基上诱导情况  33-34
      3.3 不同外植体转化效率的差异  34-35
      3.4 不同品种转化效率的差异  35-37
      3.5 转基因体系应用效果比较  37-41
    4. 讨论  41-43
全文结论  43-45
参考文献  45-55
附录  55-61
攻读硕士学位期间发表的研究论文  61-63
致谢  63

根癌农杆菌介导的水稻转基因体系研究

内容摘要

全文目录

相似论文