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鲈鱼蛋白的酶解工艺优化及活性肽的功能特性研究

作　者: 江锟
导　师: 徐志宏
学　校: 华中农业大学
专　业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 鲈鱼蛋白胰蛋白酶纯化分离胆酸盐加工性质
分类号: TS254.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

鲈鱼是一种海洋低值鱼,世界蛋白质缺乏依然是全人类共同面临的严峻问题,而量大质优、氨基酸比值与人体肌肉成分极为接近且吸收利用率高的鱼类,是解决这一问题的重要资源。本文选用市售海洋鲈鱼为原材料,经过干燥、粉碎、脱脂后得到鲈鱼蛋白粉,在运用胰蛋白酶酶解鲈鱼蛋白,制备分子量较小的鲈鱼蛋白肽,并确定最佳酶解条件。此外,通过凝胶G25分离成不同分子量范围的多肽,以多肽结合胆酸盐的能力作为判断鲈鱼多肽降血脂效果的指标,主要研究鲈鱼多肽体外降血脂的效果及机理；另外,还研究了不同组分的加工性质。本研究旨在为海洋低值鱼蛋白肽降血脂保健品的开发提供理论依据,从而提高海洋低值鱼的利用效果。主要研究内容和结果如下：1.鲈鱼蛋白酶解工艺优化：选用胰蛋白酶,以酶解时间、温度、pH值和酶添加量为因素,以水解度(DH)为检测指标,对鲈鱼蛋白酶解工艺进行优化。得到胰蛋白酶酶解鲈鱼蛋白的最佳酶解条件为：酶解温度40℃,酶添加量20000U/g,pH值8.5,酶解时间5h,此时水解度可达到12.5%。2.鲈鱼蛋白酶解物纯化分离：采用凝胶G25对鲈鱼蛋白酶解物进行分离纯化,分离得到5个组分,对其分别进行了质谱分析。并对酶解产物和鲈鱼蛋白分别做了电泳实验,分离出来的组分的分子量主要集中在10kD以下,且主要以小分子肽的形式存在。3.不同组分鲈鱼蛋白酶解物结合胆酸盐实验研究：在体外模拟人体消化环境,以降血脂药物考来烯胺为对照,比较了蛋白酶解液及其不同组分在体外结合胆酸盐的能力。结果表明,最佳酶解条件下,酶解时间5h时结合胆酸盐的能力最强,浓度越低(5%)时结合胆酸盐的能力越强,分子量越小的组分结合胆酸盐的能力最强。4.鲈鱼蛋白酶解前后加工性质的比较：比较了鲈鱼蛋白酶解前后溶解性、吸水性、吸油性、乳化性及其稳定性、起泡性及泡沫稳定性的变化,结果表明：溶解性随着pH值的不断升高而不断增加,且酶解后的溶解性要始终优于酶解前；酶解前的吸水性和吸油性要优于酶解前；酶解物的乳化性质受pH、蛋白浓度、油用量、离子强度等因素的影响,酶解后的乳化性好于鲈鱼蛋白,而20min后比10min后的乳化稳定性要好；酶解后的起泡性好于酶解前,随着时间的增加,泡沫稳定性随着降低。

全文目录

摘要  7-8
Abstract  8-10
缩略表  10-11
第一章前言  11-20
  1.1 高血脂的研究概况  11
  1.2 胆酸盐的研究概况  11
  1.3 生物活性肽研究概况  11-12
  1.4 海洋低值鱼的加工利用现状  12-15
    1.4.0 海洋低值鱼营养成分  12-13
    1.4.1 动物蛋白饲料  13
    1.4.2 鱼糜制品  13
    1.4.3 鱼油制品  13-14
    1.4.4 食用鱼粉  14
    1.4.5 调味品  14
    1.4.6 鱼骨应用  14
    1.4.7 鱼鳞应用  14-15
  1.5 海洋低值鱼蛋白的酶法高效利用  15-17
    1.5.1 酶的选择  15-16
    1.5.2 酶解工艺优化  16
    1.5.3 酶解产物特性及用途  16-17
  1.6 本课题研究的内容、意义及目的  17-20
    1.6.1 工艺路线图  17-18
    1.6.2 本课题研究的目的及意义  18
    1.6.3 研究内容  18-20
第二章鲈鱼蛋白酶解工艺优化  20-27
  2.1 材料与方法  20-22
    2.1.1 材料  20
    2.1.2 试剂  20
    2.1.3 设备  20-21
    2.1.4 方法  21-22
    2.1.5 数据处理  22
  2.2 结果与分析  22-26
    2.2.1 鲈鱼蛋白粉组成成分分析  22
    2.2.2 胰蛋白酶活力确定  22
    2.2.3 酶解条件对酶解效果的影响  22-26
  2.3 结论  26-27
第三章鲈鱼蛋白酶解产物G25纯化分离及电泳、质谱分析  27-38
  3.1 材料与方法  27-30
    3.1.1 材料与试剂  27-28
    3.1.2 方法  28-30
  3.2 结果与分析  30-36
    3.2.1 Tris-SDS-PAGE电泳结果分析  30-31
    3.2.2 凝胶G-25分离鲈鱼蛋白酶解产物结果分析  31-32
    3.2.3 质谱分析鲈鱼蛋白酶解物分离各组分分子量分布  32-35
    3.2.4 鲈鱼蛋白酶解产物及不同组分的氨基酸分布研究  35-36
  3.3 小结  36-38
第四章鲈鱼蛋白酶解物及不同组分体外结合胆酸盐实验  38-44
  4.1 材料与方法  38-40
    4.1.1 材料与试剂  38-39
    4.1.2 实验方法  39-40
    4.1.3 数据处理  40
  4.2 结果及分析  40-42
    4.2.1 鲈鱼蛋白与其他种类蛋白体外结合胆酸盐能力的比较  40-41
    4.2.2 最佳条件下的鲈鱼蛋白酶解产物体外结合胆酸盐能力  41
    4.2.3 鲈鱼蛋白酶解物不同组分结合胆酸盐能力  41-42
    4.2.4 鲈鱼蛋白酶解物不同浓度体外结合胆酸盐能力  42
  4.3 讨论  42-43
  4.4 小结  43-44
第五章鲈鱼蛋白酶解产物加工性质的研究  44-53
  5.1 材料与方法  44-45
    5.1.1 材料与试剂  44
    5.1.2 主要仪器  44
    5.1.3 实验方法  44-45
  5.2 数据处理  45
  5.3 结果与分析  45-52
    5.3.1 pH值对鲈鱼蛋白及其酶解产物溶解性的影响  45-46
    5.3.2 酶解对鲈鱼蛋白酶解产物吸油性的影响  46-47
    5.3.3 酶解对鲈鱼蛋白酶解产物吸水性的影响  47
    5.3.4 乳化性和乳化稳定性  47-51
    5.3.5 酶解前后起泡性及其泡沫稳定性的变化  51-52
  5.4 小结  52-53
第六章讨论  53-54
  6.1 关于鲈鱼蛋白肽的制备工艺  53
  6.2 关于鲈鱼蛋白肽的分离纯化  53
  6.3 关于鲈鱼蛋白肽及其分离组分结合胆酸盐能力  53-54
全文小结  54-55
参考文献  55-61
致谢  61-62
附录  62

鲈鱼蛋白的酶解工艺优化及活性肽的功能特性研究

内容摘要

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