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第一部分大鼠视网膜光损伤模型建立及病理形态学研究目的：建立大鼠视网膜光损伤模型,探讨慢性视网膜光损伤模型中视网膜病理形态学的改变。方法：自制光损伤箱,采用白色荧光灯,光照强度平均为4000±200Lux,暗适应24小时持续照射12小时建立大鼠视网膜光损伤模型,Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为正常对照组,光损伤模型组,分别取视网膜制作石蜡切片,HE染色,通过组织病理学观察各组视网膜形态学变化。结果：1、成功建立光损伤大鼠模型。2、正常对照大鼠视网膜形态正常,结构层次清晰。外核层(outer nuclear layer, ONL)整齐排列,细胞染色均匀,约10～12层；感光细胞内外节交界清晰,排列整齐。光损伤模型组视网膜各层结构疏松,层间分界不清晰;内核层(inter nuclear layer, INL)排列疏松紊乱,核层减少；外核层变薄,约3-4个细胞厚度,细胞间隙增大,部分细胞核固缩；感光细胞内外节交界不清,疏松排列,见大量空泡变性。3、光照后,与正常组比较,模型组视网膜外核层厚度变薄(P<0.05)。结论：4000±200Lux持续12小时照射造成视网膜组织慢性光损伤,导致细胞退行性改变,损伤主要累及光感受器和外核层。第二部分岩茶提取物对大鼠视网膜光损伤保护作用目的：通过对光损伤大鼠尾静脉注射岩茶提取物,观察光损伤大鼠视网膜病理形态,生化指标的变化,探讨岩茶提取物对大鼠视网膜光损伤的保护作用及其机制,为临床治疗提供理论依据。方法：40只SD大鼠随机分为正常对照组,光损伤模型组,光损伤给药组,其中给药组分为高剂量组和低剂量组。自制光损伤箱,采用平均光照强度4000±200Lux的白色荧光灯,持续照射12小时建立视网膜光损伤模型,光照前暗适应24小时,采用尾静脉注射给药,于光照前3天及光照后7天,每日一次用药,至实验结束。处死大鼠取眼球,左眼球视网膜用于检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性以及丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量,右眼球用于制作石蜡切片,进行HE染色,观察形态变化。结果：1、形态学检查：光损伤模型组视网膜各层结构疏松,层间分界不清晰；外核层水肿、变性、变薄,约3-4个细胞厚度,细胞间隙增大,部分细胞核固缩；感光细胞内外节交界不清,疏松排列,见大量空泡变性。高剂量组形态相对完好,结构清晰,外核层稍微变薄,感光细胞的内、外节排列较为规则。低剂量组外核层排列紊乱,变薄,感光细胞内外节见少量空泡。2、SOD、MDA检测：光照后7天,正常组SOD活力为57.88±6.32U/mgprot, MDA含量为3.99±0.59nmol/mgprot,模型组SOD活力降低、MDA含量升高(P<0.05)。与模型组比较,光损伤给药组SOD活力升高、MDA含量降低(P<0.05),其中高剂量组较低剂量组变化明显,P值<0.05。3、外核层厚度检测：光照后,与正常组相比,模型组视网膜外核层厚度明显变薄(P<0.05),给药组有所改善,其中高剂量组改善明显(P<0.05)。结论：1、岩茶提取物对光损伤大鼠视网膜形态具有保护作用,有助于维持正常生理功能。2、岩茶提取物可以增强大鼠视网膜组织中SOD的活性,同时使MDA含量明显下降,提示其可减轻光损伤引起的视网膜氧化应激反应,具有抗氧化作用,对延缓视网膜光损伤、保护视细胞可能具有一定的作用。3、岩茶提取物对视网膜光损伤的保护具有明显的剂量依赖关系。
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