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原发性肝细胞癌患者癌组织、癌旁肝组织及血清中HBV BCP区变异位点的研究

作　者: 韩学文
导　师: 程树群
学　校: 苏州大学
专　业: 普外科
关键词: 肝细胞癌乙型肝炎病毒基因变异 HBV BCP
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 7次
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内容摘要

肝细胞癌在我国是重要的恶性肿瘤，HCC的发生是一个由环境因素、机体的遗传因素和病毒因素等综合影响的过程。在我国，乙型肝炎病毒的慢性感染是导致HCC发生的主要原因。机体在感染HBV后能够产生活跃的抗病毒细胞免疫反应，然而仍有许多HBV感染者不能清除病毒，成为持续病毒携带者。引起持续性病毒感染的原因很多，其中基因变异是主要原因之一。变异可发生在HBV感染致病阶段或抗病毒治疗期间。发生变异的病毒可获得更强的毒力，对肝细胞的侵袭力，对抗病毒治疗的抵抗力，也会改变病毒表面主动免疫重要表位。在临床工作中我们发现原发性肝癌患者术后复发的现象很常见，是否患者术后的高复发率与HBV的持续慢性感染及变异有关？能否在患者血清中获得一些HBV变异与患者预后相关性信息？术后患者的癌组织、癌旁肝组织和血清中HBV的变异是否一致？如果不一致，是否可以揭示HBV导致HCC发生发展的一些可能规律？因此，研究HBV相关性原发性肝癌患者的癌组织、癌旁肝组织和血清中HBV的变异对明确HBV致癌机制具有重要的意义。目的：分析HBV相关性原发性肝癌患者癌组织、癌旁肝组织和血清中HBV的相关变异，探索三组之间HBV变异的不同及三组分别与野生型HBV的差异，为我国HCC危险因素的发现和预防提供重要的线索。方法：本研究共纳入103例原发性肝癌患者，利用聚合酶链式反应PCR (Polymerase Chain Reaction)、克隆等技术对组织样本分别提取HBV DNA并测序。基因数据的输入与分析用MEGA5.0和Bioedit进行序列比对。数据的输入与分析使用SPSS19.0软件，应用独立性χ2检验、相关性分析HBV变异。结果：1. nt.1762、 nt.1764和nt.1846位点在癌组织与癌旁肝组织之间变异频率不同。2. nt.1762、 nt.1764和nt.1846位点在癌组织与癌旁肝组织之间变异具有显著相关性。

全文目录

中文摘要  4-5
Abstract  5-7
前言  7-10
一、对象与方法  10-18
  1. 研究对象  10
    1.1 病例组  10
    1.2 对照组  10
  2. 入组及排除标准  10-11
    2.1 入组标准  10
    2.2 排除标准  10-11
  3. 实验材料  11-12
    3.1 主要试剂  11
    3.2 主要仪器  11-12
  4. 实验方法步骤  12-18
    4.1 乙肝病毒基因组 DNA 提取  12-13
    4.2 目的基因片段 PCR 的扩增  13-14
    4.3 PCR 产物电泳鉴定，目的片段的纯化  14-16
    4.4 目的片段的克隆操作  16-18
二、结果  18-22
三、结论  22-23
四、讨论  23-25
五、参考文献  25-27
六、综述  27-33
  参考文献  30-33
七、发表文章  33-41
八、致谢  41-42

原发性肝细胞癌患者癌组织、癌旁肝组织及血清中HBV BCP区变异位点的研究

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