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板蓝根多糖对缺乳仔鼠肠道黏膜免疫功能的影响

作　者: 黄鹏
导　师: 肖传斌
学　校: 河南农业大学
专　业: 基础兽医
关键词: 板蓝根多糖肠道黏膜免疫 IgG和SIgA阳性细胞 T淋巴细胞亚群免疫组化
分类号: S858.91
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

本文提取板蓝根多糖(RIP)，将不同浓度的RIP分别灌胃于缺乳的SD仔鼠中。运用大体解剖学、免疫组化技术、流式细胞术、组织化学技术来测定0-49日龄各组仔鼠小肠形态发育、肠道中杯状细胞、肥大细胞、SIgA、IgG阳性细胞数量、免疫器官指数、外周血T淋巴细胞亚群来研究RIP对缺乳仔鼠肠道黏膜免疫功能的影响，为开发廉价、无残留、绿色的RIP拟作为仔猪的免疫增强剂提供理论基础。结果显示：（1）RIP对缺乳仔鼠体重的影响，0-28日龄时影响不显著，35-49日龄时，可显著提高缺乳仔鼠的体重；小肠重量0-28日时龄影响不显著，35-49日龄时可以显著增加缺乳仔鼠的小肠重量。（2）RIP可以促进缺乳仔鼠小肠形态发育，增加小肠绒毛长度，降低小肠隐窝深度，增大V/C值。RIP对小肠绒毛长度、隐窝深度、V/C值影响的最佳剂量随仔鼠日龄增加而增大。（3）RIP可以增加缺乳仔鼠肠道杯状细胞的数量。十二指肠到回肠各组仔鼠杯状细胞数量逐渐增加。RIP对各肠段杯状细胞数量影响效果最明显的剂量随日龄增加而增大。（4）RIP可以增加缺乳仔鼠肠道肥大细胞的数量，十二指肠到空肠到回肠肥大细胞数量逐渐减少。RIP对各肠段肥大细胞数量影响效果最明显的剂量随日龄增加而增大。（5）RIP可以促进缺乳仔鼠肠道黏膜IgG、SIgA阳性淋巴细胞的分泌，RIP对各肠段黏膜IgG、SIgA阳性淋巴细胞数量影响效果最明显的剂量随日龄增加而增大。（6）RIP可以增加缺乳仔鼠胸腺指数和脾脏指数。对胸腺指数和脾脏指数效果最好的RIP剂量随日龄增大而减小。（7）RIP可以增加缺乳仔鼠外周血CD3+、 CD4+、CD8+T淋巴细胞数量。CD3+T淋巴细胞含量7-28日龄时A、C、D三组与B组差异显著（P<0.05）。CD4+T淋巴细胞含量7-21日龄时A、C、D三组与B组差异显著（P<0.05）。各处理组CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞含量以及CD4+/CD8+比值随着日龄的增加有所下降。综上所述，RIP可增加仔鼠体重和小肠重量，促进小肠形态发育，增加小肠黏膜杯状细胞、肥大细胞的数量，提高小肠黏膜IgG、SIgA阳性细胞的水平，促进免疫器官发育，增加血液中T淋巴细胞亚群细胞的数量，对缺乳仔鼠具有免疫增强功能。

全文目录

致谢  4-7
摘要  7-8
1 文献综述  8-15
  1.1 板蓝根多糖的研究进展  8
  1.2 仔畜缺乳状况及解决方法  8-9
  1.3 黏膜免疫系统  9-13
    1.3.1 肠道黏膜机械屏障  10
    1.3.2 肠道黏膜免疫学屏障  10
    1.3.3 肠道上皮细胞和肠道上皮内淋巴细胞  10-12
    1.3.4 肠道杯状细胞  12
    1.3.5 肠道肥大细胞  12-13
    1.3.6 分泌型 SIgA 阳性细胞  13
  1.4 免疫器官  13-14
  1.5 T 淋巴细胞亚群  14-15
2 引言  15-16
3 材料与方法  16-21
  3.1 材料  16-18
    3.1.1 药物  16
    3.1.2 动物  16
    3.1.3 试剂  16
    3.1.4 主要试剂的配置  16-17
    3.1.5 主要仪器设备  17-18
  3.2 方法  18-21
    3.2.1 动物的分组与饲喂  18
    3.2.2 抗凝血和全血的采集  18
    3.2.3 淋巴器官的采集  18
    3.2.4 肠道组织的采集  18
    3.2.5 板蓝根多糖的提取和测定  18-19
    3.2.6 T 淋巴细胞亚群的检测  19
    3.2.7 石蜡切片制作程序  19
    3.2.8 常规 HE 染色  19
    3.2.9 PAS 染色  19
    3.2.10 甲苯胺蓝染色步骤  19-20
    3.2.11 免疫组化染色  20
    3.2.12 观察与测量  20-21
4 结果  21-37
  4.1 仔鼠体重  21
  4.2 仔鼠肠重  21-22
  4.3 仔鼠小肠长度  22
  4.4 肠道形态学结果  22-26
    4.4.1 肠绒毛长度（μm）  22-24
    4.4.2 隐窝深度（μm）  24-25
    4.4.3 V/C 值(百分比)  25-26
  4.5 杯状细胞  26-28
  4.6 肥大细胞  28-30
  4.7 肠道 IgG 阳性细胞  30-31
  4.8 肠道 SIgA 阳性细胞  31-33
  4.9 免疫器官指数  33-34
    4.9.1 胸腺指数(百分比)  33-34
    4.9.2 脾脏指数(百分比)  34
  4.10 T 淋巴细胞亚群(百分比)  34-37
5 讨论与小结  37-45
  5.1 RIP 对缺乳仔鼠体重及肠道重量的影响  37
  5.2 RIP 对缺乳仔鼠小肠长度的影响  37
  5.3 RIP 对缺乳仔鼠肠道形态学的影响  37-39
  5.4 RIP 对缺乳仔鼠肠道杯状细胞的影响  39-40
  5.5 RIP 对缺乳仔鼠肠道肥大细胞的影响  40-41
  5.6 RIP 对缺乳仔鼠肠道黏膜 IGG、SIGA 阳性淋巴细胞的影响  41-42
  5.7 RIP 对缺乳仔鼠免疫器官指数的影响  42
    5.7.1 RIP 对胸腺指数的影响  42
    5.7.2 RIP 对脾脏指数的影响  42
  5.8 RIP 对缺乳仔鼠外周血 T 细胞亚群的影响  42-43
  5.9 小结  43-45
参考文献  45-53
英文摘要  53-55
图版  55-60

板蓝根多糖对缺乳仔鼠肠道黏膜免疫功能的影响

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