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桃砧木毛桃离体培养和植株再生的研究

作　者: 白芝兰
导　师: 李国怀
学　校: 华中农业大学
专　业: 果树学
关键词: 毛桃 离体培养 愈伤组织 植株再生
分类号: S662.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


建立高效稳定的离体再生体系是进行遗传转化的基础和前提。桃的离体再生较为困难,很大程度上阻碍了桃现代生物技术育种的进程。本试验以南方桃区主要砧木毛桃(Prunus persica)为试材,利用茎段离体培养获得的无菌苗叶片为外植体,通过对基本培养基类型、激素种类和浓度配比,碳源和暗培养时间等一系列因素的研究,初步建立了桃砧木毛桃叶片离体再生和愈伤组织诱导、保存及植株再生体系,为桃后续的遗传转化研究奠定了一定的基础。主要研究结果如下：1.2010年5-6月进行毛桃茎段腋芽诱导,萌发率可达76.6%,且生长状况良好。毛桃试管苗较适宜的增殖培养基为：LP基本培养基+6-BA0.75mg/L+IBA0.30mg/L+腺嘌呤3.00mg/L+蔗糖30.0g/L+琼脂6.8g/L,pH为5.8-6.0,每隔30d左右继代一次。2.在毛桃叶片植株再生时先进行21d的暗培养后更换到新鲜培养基进行光培养,暗光培养时培养基均为：SH基本培养基+TDZ3.0mg/L+NAA0.3mg/L+蔗糖30.0g/L+琼脂6.0g/L,pH为5.8-6.0,最高再生率可达11.67%。3.毛桃试管苗较适宜的生根培养基为：1/2LP基本培养基+IBA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20.0g/L+琼脂6.8g/L,pH为5.8-6.0。培养30d生根率可达73.34%,平均每棵试管苗生根条数为3条,平均根长为4.81cm。4.毛桃叶片愈伤组织诱导较佳培养基为：LP基本培养基+6-BA1.0mg/L+2,4-D3.0mg/L+AgN030.5mg/L+蔗糖30.0g/L+琼脂6.0g/L,pH5.8-6.0,选取继代30d左右的毛桃试管苗的幼嫩茎段(不带腋芽)或叶片作为外植体,暗培养21d后转移至光培养。5.毛桃愈伤组织继代保存的较佳培养基为：LP基本培养基+2,4-D1.5mg/L+CH0.4g/L+CA3.0g/L或PVP3.0g/L+蔗糖30.0g/L+琼脂5.8g/L,pH5.8-6.0,每28d继代一次,持续暗培养进行保存。

全文目录


摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
缩略词表  9-10
1 前言  10-22
  1.1 问题的提出  10
  1.2 桃外植体培养的研究进展  10-18
    1.2.1 茎尖和茎段培养  10-12
    1.2.2 胚培养  12-14
      1.2.2.1 胚培养的应用  13-14
    1.2.3 叶片培养  14-17
    1.2.4 其他外植体的培养  17-18
  1.3 愈伤组织诱导及植株再生  18-21
    1.3.1 影响愈伤组织诱导的因素  18-20
    1.3.2 愈伤组织再生不定芽  20-21
  1.4 本研究的目的和意义  21-22
2 材料和方法  22-28
  2.1 试验材料  22
  2.2 试验方法  22-27
    2.2.1 毛桃茎段培养  22
    2.2.2 毛桃试管苗增殖培养  22-23
    2.2.3 毛桃叶片植株再生  23-24
    2.2.4 激素对毛桃试管苗生根培养的影响  24
    2.2.5 毛桃愈伤组织诱导  24-25
    2.2.6 愈伤组织的继代保存和植株再生  25-27
  2.3 培养条件  27
  2.4 试验数据统计方法  27-28
    2.4.1 毛桃叶片植株再生  27
    2.4.2 毛桃试管苗生根  27
    2.4.3 毛桃愈伤组织诱导与保存  27-28
3 结果与分析  28-40
  3.1 毛桃茎段培养  28
  3.2 毛桃试管苗增殖培养  28-30
    3.2.1 不同激素浓度配比对毛桃试管苗增殖的影响  28-29
    3.2.2 不同基本培养基对毛桃试管苗增殖的影响  29
    3.2.3 不同碳源对毛桃试管苗增殖的影响  29-30
  3.3 毛桃叶片植株再生  30-32
    3.3.1 不同激素浓度配比对毛桃叶片植株再生的影响  30-31
    3.3.2 不同基本培养基对毛桃叶片植株再生的影响  31-32
    3.3.3 是否更换培养基对毛桃叶片植株再生的影响  32
  3.4 激素种类及浓度对毛桃试管苗生根的影响  32
  3.5 毛桃愈伤组织诱导  32-35
    3.5.1 不同时期愈伤组织形态观察  32-33
    3.5.2 单一激素对毛桃愈伤组织诱导的影响  33-34
    3.5.3 不同基本培养基、激素配比和AgNO_3对毛桃愈伤组织诱导的影响  34-35
  3.6 毛桃愈伤组织的继代保存及植株再生  35-40
    3.6.1 基本培养基、碳源、激素配比和水解酪蛋白对愈伤组织继代保存的影响  35-36
    3.6.2 暗培养时间对愈伤组织继代保存的影响  36
    3.6.3 琼脂浓度对愈伤组织继代保存的影响  36-38
    3.6.4 不同抗氧化剂对愈伤组织褐化的影响  38-39
    3.6.5 毛桃愈伤组织再生不定芽  39-40
4 讨论  40-44
  4.1 激素,基本培养基,碳源对毛桃试管苗增殖的影响  40-41
  4.2 激素、基本培养基和光培养是否更换培养基对毛桃叶片植株再生的影响  41
  4.3 基本培养基、激素、AgNO_3对毛桃愈伤组织诱导的影响  41-42
  4.4 愈伤组织再生植株困难的原因探讨  42-44
5 小结  44-45
参考文献  45-56
图版和图版说明  56-61
致谢  61-62
附录Ⅰ  62-63
附录Ⅱ 课题资助情况  63

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 核果类 > 桃
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