学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

浊点系统在三苯基甲烷染料微生物脱色中的探索与应用

作　者: 潘涛
导　师: 郭俊
学　校: 华南理工大学
专　业: 微生物学
关键词: 浊点系统 三苯基甲烷染料 萃取生物脱色 离子液体
分类号: X172
类　型: 博士论文
年　份: 2013年
下　载: 19次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


三苯基甲烷类染料属于化学合成类染料，结构稳定，难以降解，具有致突变、致畸和致癌的危险。研究三苯基甲烷染料的生物脱色降解对于染料治理和人类健康都意义重大。但目前，三苯基甲烷染料的生物脱色受到底物抑制，产物毒性大等因素限制难以大规模应用。因此，如何在染料生物脱色的同时，有效的脱毒，是染料生物处理中需要克服的重大难题。浊点系统（Cloud point system，CPS）是指在一定温度或添加物的存在下，非离子表面活性剂水溶液分相形成的两相系统。其中，表面活性剂聚集的一相为凝聚层相或表面活性剂富相（Coacervate phase，or surfactant-rich phase），表面活性剂浓度较低一相为水相或稀相（Water phase，or dilute phase）。相分离温度称为浊点（Cloud point）。本文探索了浊点系统中三苯基甲烷染料的萃取微生物脱色，以期达到同时脱色并脱毒的目的。这是浊点系统中染料萃取生物脱色的首例报道。本文针对浊点系统中染料萃取生物脱色的一系列关键科学问题，从脱色菌Aeromonas hydrophila DN322p的染料脱色机理，三苯基甲烷染料在浊点系统中的分配机理，浊点系统的生物相容性和脱毒能力，以及后期表面活性剂的回收等四个方面开展研究，基本结论如下：1、实验选取结晶紫（Crystal violet，CV）作为模式三苯基甲烷染料来研究脱色菌A. hydrophila DN322p的脱色特性，发现菌体可大量吸附染料并同时脱色。脱色初始的0.5小时，菌体吸附大量的结晶紫，离心后细胞沉淀颜色很深而上清液几乎无色。并且，随着脱色时间的延长，细胞的颜色逐渐变浅。通过全波长扫描可知，上清液和菌体的二氯甲烷萃取液都有结晶紫（590nm）和隐性结晶紫（Leuco-crystal violet，LCV）（260nm）的特征吸收峰。结果表明菌体对这两种染料都有吸附能力。在30°C和结晶紫浓度为50mg/L的震荡培养条件下，染料脱色率达到99%（w/w）。通过高效液相色谱（HighPerformance Liquid Chromatography，HPLC）检测结果分析，结晶紫主要被转化为隐性结晶紫。死细胞的染料吸附能力与活细胞大体相当。菌体密度（OD600）为1.0的死菌体，能够吸附约90%的结晶紫（50mg/L）。2、研究了四种三苯基甲烷染料，结晶紫、乙基紫（Ethyl violet，EV）、孔雀石绿（Malachite green，MG）和灿烂绿（Brilliant green，BG），在非离子表面活性剂TritonX-114形成的浊点浊点系统中的分配规律。四种染料都会或多或少的增加体系的浊点。其浓度越高，浊点越高。在浊点系统中，染料主要分配在凝聚层相，水相颜色较浅。萃取效率随温度、Triton X-114浓度和盐（NaCl和CaCl2）浓度的升高而增加。通过二氯甲烷萃取的方法，可有效去除稀相中的表面活性剂。本文用朗格缪尔吸附等温线来描述四种染料在浊点系统中的分配行为并根据温度计算了吸附平衡常数m和n。结果显示，染料在浊点系统中的分配作用不仅与疏水性常数（log P）有关，同时受其结构影响。3、在明确了脱色菌A. hydrophila DN322p的脱色特性和三苯基甲烷染料在浊点系统中的分配规律基础上，研究了结晶紫在浊点系统中的萃取微生物脱色。根据浊点系统的生物相容性及染料脱色率的结果，实验选取等质量的Brij30和Tergitol TMN-3（20g/L）组成浊点系统。脱色完成后，浊点系统中细胞量更高。通过薄层色谱（Thin-layerchromatography，TLC）检测得知，残留的结晶紫和产生的隐性结晶紫分配在凝聚层相，水相中检测不到染料。因此，浊点系统中的染料萃取微生物脱色完成了水相的脱毒，保证了排水时不会形成染料污染。实验进一步检测了其他三种三苯基甲烷染料在浊点系统中的萃取微生物脱色。孔雀石绿和灿烂绿的脱色效果与结晶紫类似。乙基紫效果不好，其原因可能是脱色菌A. hydrophila DN322p无法将其转化为隐性产物。本研究为三苯基甲烷染料的生物处理开辟了一条新途径。4、本研究通过在浊点系统的凝聚层相中添加室温离子液体[BMIM]PF6（1-butyl-3-methylimidazolium hexafluorophosphate），成功回收了表面活性剂TritonX-114。实验研究了室温条件下（25°C）Triton X-114/水/[BMIM]PF6的三元相图。在两相区，选取5个点作为研究对象。分别在25°C和65°C下观察溶液的相行为。发现在高温下，水相中的表面活性剂会转移到离子液体相。在五种染料（蒽醌染料-茜素（Alizarin，AL），偶氮染料-苋菜红（amaranth，AM）和甲基橙（methyl orange，MO），三苯基甲烷染料-结晶紫和孔雀石绿）的Trtion X-114形成的浊点系统中，移除水相并在凝聚层相中添加等质量的[BMIM]PF6。常温下混匀后分相发现，茜素、结晶紫和孔雀石绿三种染料分配到了离子液体相，而表面活性剂Triton X-114留在了水相。说明成功回收了表面活性剂。随后，又通过pH调节的方法分离了茜素并回收了[BMIM]PF6。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-19
第一章 绪论  19-52
  1.1 染料污染概述  19-32
    1.1.1 三苯基甲烷染料污染的现状  19-20
    1.1.2 染料污染的物理化学治理方法  20-25
    1.1.3 染料污染的微生物治理方法  25-30
    1.1.4 三苯基甲烷染料的生物降解产物  30-32
  1.2 浊点系统  32-45
    1.2.1 浊点系统的基本性质  32-37
    1.2.2 有机溶剂对微生物毒性的 log P 规则  37-39
    1.2.3 浊点系统中物质分配的 log P 准则  39-40
    1.2.4 表面活性剂在环境污染治理中的应用  40-44
    1.2.5 浊点系统中的萃取微生物转化  44-45
  1.3 非离子表面活性剂的回收  45-49
    1.3.1 当前表面活性剂的回收方法  45-47
    1.3.2 Winsor 微乳液回收非离子表面活性剂非离子  47-48
    1.3.3 表面活性剂与室温离子液体的相互作用关系  48-49
  1.4 选题的意义，关键的科学问题，研究方案及创新之处  49-52
    1.4.1 选题的目的和意义  49
    1.4.2 关键的科学问题  49
    1.4.3 研究方案及路线  49-50
    1.4.4 创新点  50-52
第二章 脱色菌 Aeromonas hydrophila DN322p 的染料脱色机理  52-64
  2.1 引言  52
  2.2 材料与方法  52-54
    2.2.1 菌种  52-53
    2.2.2 培养基  53
    2.2.3 培养条件  53
    2.2.4 脱色实验  53
    2.2.5 分析方法  53-54
  2.3 结果与讨论  54-63
    2.3.1 PCR 鉴定复筛菌株  54-56
    2.3.2 细胞沉淀与上清液的颜色变化  56-58
    2.3.3 紫外可见分光光度计分析染料脱色过程  58-59
    2.3.4 薄层色谱初步分析脱色产物  59-60
    2.3.5 高效液相色谱分析脱色产物  60-62
    2.3.6 质量平衡  62
    2.3.7 活菌体和死菌体的吸附能力对比  62-63
  2.4 本章小结  63-64
第三章 浊点系统中三苯基甲烷染料的分配规律  64-78
  3.1 引言  64-65
  3.2 材料与方法  65-66
    3.2.1 实验材料  65-66
    3.2.2 浊点萃取实验  66
    3.2.3 实验操作条件  66
    3.2.4 表面活性剂与染料浓度分析方法  66
  3.3 结果与讨论  66-76
    3.3.1 染料浓度对浊点萃取的影响  67
    3.3.2 染料及表面活性剂浓度和操作温度对染料分配行为的影响  67-71
    3.3.3 凝聚层相体积的改变  71-72
    3.3.4 电解质的影响  72
    3.3.5 稀相的溶剂萃取  72-73
    3.3.6 增溶平衡计算  73-75
    3.3.7 三苯基甲烷染料在浊点系统中的分配规律  75-76
  3.4 本章小结  76-78
第四章 浊点系统中三苯基甲烷的萃取微生物脱色  78-85
  4.1 引言  78
  4.2 材料与方法  78-79
    4.2.1 菌株及培养基  78-79
    4.2.2 染料的分析方法  79
  4.3 结果与讨论  79-84
    4.3.1 非离子表面活性剂的筛选  79-81
    4.3.2 混合表面活性剂浓度对脱色率的影响  81-82
    4.3.3 浊点系统中的细胞生长曲线与染料脱色曲线  82
    4.3.4 染料及其代谢产物在浊点系统中的分配  82-83
    4.3.5 四种三苯基甲烷染料在浊点系统的萃取生物脱色  83-84
  4.4 本章小结  84-85
第五章 非离子表面活性剂的回收  85-103
  5.1 引言  85-86
  5.2 材料与方法  86-92
    5.2.1 确定表面活性剂-水-离子液体三元微乳液两相区边界  86
    5.2.2 电导法测定单相区微乳液类型  86
    5.2.3 分析方法  86-87
    5.2.4 建立标准曲线  87-92
  5.3 结果与讨论  92-101
    5.3.1 离子液体的筛选  92-93
    5.3.2 表面活性剂-水-离子液体三元微乳液的建立  93-94
    5.3.3 温度调节的 Segregation 相分离和 Association 相分离  94-96
    5.3.4 Segregation 相分离回收非离子表面活性剂  96-97
    5.3.5 离子液体的回收  97-99
    5.3.6 离子液体回收混合非离子表面活性剂的尝试  99-101
  5.4 本章小结  101-103
结论与展望  103-107
  结论  103-105
  创新点  105
  展望  105-107
附录  107-110
  研究所用试剂  107-108
  主要仪器设备  108-110
参考文献  110-133
攻读博士学位期间取得的研究成果  133-134
致谢  134-135
答辩委员签名的答辩决议书  135

相似论文

  1. Reline室温离子液体中锌钴和锌镍合金的电沉积研究,TQ153.1
  2. 苯并咪唑类离子液体的合成及其在萃取分离中的应用,O626.23
  3. 含碳水化合物衍生的一价及二价咪唑盐离子液体的合成与表征,O621.3
  4. 离子液体预处理纤维素及再生纤维素水解研究,TQ352.1
  5. 功能化离子液体催化叔丁醇脱水反应的研究,O643.32
  6. 离子液体溴化1-辛基-3-甲基咪唑（[C8mim] Br）对金鱼的发育毒性,X174
  7. 咪唑离子液体在溶液中的簇集和微观结构研究,O645.1
  8. 功能材料修饰电极的制备及应用研究,TB34
  9. 共沸物系的离子液体萃取精馏,TQ028.31
  10. 新型Lewis酸选择性催化硝化氯苯研究,TQ246.1
  11. 金属在离子液体中的溶解性研究,O611.3
  12. 咪唑类离子液体的合成及在纤维素水解中的应用研究,TQ353.1
  13. 固载型离子液体催化合成碳酸酯的研究,TQ225.52
  14. 一类聚醚聚氨酯高分子离子液体电解质的制备与表征,O633.14
  15. 新型催化剂在2-（4′-戊基苯甲酰基）苯甲酸合成中的应用,TQ245.12
  16. 聚醚离子液体的合成研究,O631.3
  17. 含离子液体介质中重组β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸的研究,TQ463.2
  18. 碱性离子液体催化菜籽油制备生物柴油的试验研究,TE667
  19. 离子液体与表面活性剂相互作用及其在三次采油中应用研究,TE39
  20. 离子液体在黄铜矿湿法冶金中的应用研究,TF811
  21. 分散液相微萃取—高效液相色谱联用技术在果蔬农残中的研究与应用,TS255.7

中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境科学基础理论 > 环境生物学 > 环境微生物学
© 2012 www.xueweilunwen.com