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肾虚骨质疏松症大鼠肠粘膜CaBP mRNA和蛋白表达的实验研究

作　者: 魏红
导　师: 郑洪新
学　校: 辽宁中医学院
专　业: 中医基础理论
关键词: 骨质疏松症 补肾中药 卵巢切除 转化生长因子一β 钙结合蛋白 反转录聚合酶链反应 蛋白质免疫印迹杂交法
分类号: R259
类　型: 博士论文
年　份: 2005年
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内容摘要


目的:从钙代谢角度出发,研究去卵巢骨质疏松模型大鼠肠粘膜中钙结合蛋白CaBP-Dsk及CaBP-D28k mRNA和蛋白表达以及血清转化生长因子-β的变化,从基因分子水平揭示肾虚骨质疏松症的发病机制及纳米钙补肾中药防治肾虚骨质疏松症的作用机制。 材料与方法:实验采用切除大鼠双侧卵巢的方法,复制肾虚骨质疏松症大鼠模型,同时应用具有益肾填精、补钙壮骨作用的纳米钙补肾中药（低、中、高剂量）,对模型大鼠防治12周进行反证,用骨疏康颗粒剂及牡蛎碳酸钙片作为阳性对照组,正常大鼠作为标准对照,模空组作为空白对照组;应用双能X线骨密度仪检测离体股骨的骨密度（BMD）,用生化方法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶（RTAP）、碱性磷酸酶（ALP）、转化生长因子-β（TGF-β）以及动静脉血钙、血磷等指标,用PCR法及Western印迹法检测骨质疏松症模型大鼠肠小粘膜中CaBP-D9k mRNA及CaBP-D28k的mRNA和蛋白表达。 结果: [1]子宫指数比较:模空组大鼠子宫指数明显低于正常组。用药12周后,与模空组比较,纳米钙补肾中药组（低、中剂量）、牡蛎钙及骨疏康对照组大鼠的子宫指数均有所升高,但无显著性差异。 [2]股骨BMD比较:模空组大鼠股骨BMD明显低于正常组。各用药组均能提高模型大鼠股骨的骨密度值,其中纳米钙补肾中药低、中剂量组效果最优,已接近正常大鼠的骨密度值,其作用优于牡蛎钙及骨疏康对照组,但与骨疏康组比较无显著性差异;纳米钙补肾中药高剂量组虽然能提高大鼠股骨的骨密度值,但与模空组比较无显著性差异。 [3]骨吸收指标——血清TRAP结果比较:模空组大鼠血清TRAP含量明显高于正常组。各用药组均能降低模型大鼠血清TRAP的含量,但均未达到正常组水平;其中纳米钙补肾中药组（低、中剂量）降低作用最为显著,与牡蛎钙及骨疏康对照组比较有非常显著性差异。纳米钙补肾中药高剂量组、骨疏康对照组虽然能降低模型大鼠血清TRAP的含量,但与模空组比较无显著性差异。 骨形成指标——血清ALP结果比较:模空组大鼠血清ALP含量明显高于正常组。各用药组均能降低模型大鼠血清ALP的含量,其中以纳米钙补肾中药组（低、中剂量）降低作用最为显著,与牡蛎钙及骨疏康对照组比较有非常显著性差异。纳米钙补肾中药高剂量组、骨疏康组虽然能降低模型大鼠血清ALP的含量,但与模空组比较均无显著性差异。 [4]血清TGF—β含量比较:模空组大鼠血清TGF—β含量明显低于正常组。各用药组均能提高模型大鼠血清TGF—β的含量,但都不能恢复到正常组水平,其中以纳米钙补肾中药组（低、中、高剂量组）升高作用明显,与模空组及阳性对照组比较均有显著性

全文目录


1.中英文名词术语对照  3-4
2.英文摘要  4-7
3.中文摘要  7-9
4.前言  9-11
5.实验部分  11-35
  5.1 实验一 肾虚骨质疏松症大鼠模型的建立与确定  11-18
    5.1.1 材料与方法  11-14
    5.1.2 结果与分析  14-18
  5.2 实验二 肾虚骨质疏松症大鼠血清TGF-β及动静脉血钙磷的变化  18-25
    5.2.1 材料与方法  18-19
    5.2.2 结果与分析  19-25
  5.3 实验三 肾虚骨质疏松症大鼠肠粘膜中CaBP-D_(28k) mRNA和蛋白表达  25-32
    5.3.1 材料与方法  25-30
    5.3.2 结果与分析  30-32
  5.4 实验四 肾虚骨质疏松症大鼠肠粘膜中CaBP-D_(9k) mRNA表达  32-35
    5.4.1 材料与方法  32-33
    5.4.2 结果与分析  33-35
6.讨论  35-61
  6.1 本课题研究的理论依据  35-36
  6.2 研究的思路与方法  36-39
  6.3 中医学对骨质疏松症的认识及现代研究  39-46
  6.4 骨质疏松症的动物模型研究  46-49
  6.5 现代医学对骨质疏松症的研究  49-55
  6.6 转化生长因子-β及钙结合蛋白在骨代谢与肠钙吸收中的作用  55-57
  6.7 肾虚骨质疏松症大鼠模型的建立及纳米钙补肾中药的防治作用  57-59
  6.8 益肾填精、补钙壮骨法防治肾虚骨质疏松症的疗效基础  59-61
7.展望  61-62
8.参考文献  62-67
9.致谢  67-68
10.综述  68-89
  参考文献  86-89
10.个人简历  89-90

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