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人参皂苷Rb_1抑制自体静脉移植物再狭窄的实验研究

作 者: 宋鹏
导 师: 徐敬
学 校: 郑州大学
专 业: 外科学
关键词: 人参皂苷Rb1 静脉移植物 血小板衍生生长因子 一氧化氮合酶 免疫组化 聚合酶链式反应
分类号: R285
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


背景与目的冠脉搭桥术(coronary artery bypass grafting, CABG)是冠状动脉粥样硬化性心脏病主要的治疗方法之一,尤其适用于多支病变和合并心内畸形的患者。乳内动脉、桡动脉和大隐静脉是临床上常用的桥血管,而大隐静脉作为临床上冠脉搭桥常用的主要材料之一,由于位置表浅,取材方便,并且有足够的长度连接主动脉与冠状动脉的远端,使得其能够在临床上得以广泛应用。但是手术操作造成的血管内膜损伤、术后血流动力学改变、炎症因子释放等一系列变化引起静脉桥血管术后再狭窄,使得大隐静脉在临床上的应用受到了一定的限制。近年来,一系列预防静脉血管再狭窄的方法如:药物治疗、基因治疗、血管外支架、扩张液、内皮祖细胞等应用于临床,但是总体效果欠佳。有报道称:人参皂苷Rbl对内皮细胞培养基中血管内皮细胞表达血管血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)产生一定的影响。本实验即是在建立静脉桥血管动物模型的基础上,通过腹腔注射一定剂量的人参皂苷Rbl成品,观察静脉桥血管内膜厚度的变化以及静脉桥血管PDGF和eNOS阳性表达的变化,从而探讨人参皂营Rb1对移植静脉桥血管再狭窄的抑制作用及其机理,为以后的临床应用提供试验基础和理论依据。材料与方法45只新西兰兔随机分为实验组、模型组、对照组3组,每组15只。应用“no-touch”外科技术获取颈外静脉后,剪断颈总动脉,采用连续缝合方法端端吻合颈外静脉和颈总动脉,建立颈外静脉和颈总动脉搭桥的动物模型。4周后,取静脉移植血管,利用HE染色观察静脉移植血管内膜形态及厚度变化,免疫组化观察静脉移植血管血小板衍生生长因子、内皮型一氧化氮合酶阳性表达情况,RT-PCR检测静脉移植血管中PDGF. eNOSmRNA基因的表达。结果1、移植静脉桥血管狭窄程度观察石蜡切片HE染色光镜下观察分析结果显示:移植4周后的实验组、模型组、对照组静脉桥血管的内膜厚度分别为(44.45±3.10)μm.(51.32±2.61)μm、(41.52±2.62)μm,各组间比较P<0.05。2、移植静脉桥血管免疫组化染色结果观察各组移植静脉血管中可见PDGF、cNOS阳性细胞表达。移植4周后的实验组、模型组、对照组PDGF阳性表达指数分别是(35.38±2.72)、(40.12±3.77)、(27.17±2.80),各组间比较P<0.05;移植4周后的实验组、模型组、对照组eNOS阳性表达指数分别是(56.92±2.56)、(50.80±3.67)、(43.95±2.60),各组间比较P<0.05,实验组、模型组、对照组组间比较有明显差异。3、移植静脉桥血管RT-PCR结果观察各组移植静脉血管可见PDGF.eNOS基因表达。PDGF在实验组、模型组、对照组表达的相对系数分别为(1.97±0.09).(2.19±0.06)、(1.62±0.09),PDGF在模型组中表达的相对系数高于实验组和对照组,各组间比较P<0.05,实验组、模型组、对照组组间比较有明显差异。eNOS在实验组、模型组、对照组表达的相对系数分别为(2.18±0.07)、(1.92±0.06)、(1.63±0.08),eNOS在实验组中表达的相对系数高于模型组和对照组,各组间比较P<0.05,实验组、模型组、对照组组间比较有明显差异。4、相关性分析结果SPSS简单线性模型结果回示:PDGF与血管狭窄呈相关正相关,相关系数为0.329:eNOS与血管狭窄呈负相关,相关系数为-0.469。结论1、静脉桥血管狭窄程度与eNOS基因的表达呈负相关,与PDGF基因的表达呈正相关。2、人参皂苷Rb1能够促进移植血管eNOS基因的表达、抑制PDGF基因的表达,这与其能够抑制血管再狭窄的作用有关。

全文目录


摘要  4-7
Abstract  7-11
中英文对照缩略词表  11-12
前言  12-14
材料与方法  14-21
结果  21-23
讨论  23-30
结论  30-31
参考文献  31-35
附图  35-38
综述静脉桥血管再狭窄的研究现状  38-55
  参考文献  49-55
个人简历及硕士在读期间撰写及发表论文情况  55
在校期间已发表与待发表的论文  55-56
致谢  56

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