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猪源乙型肝炎病毒的分子流行病学调查

作　者: 艾志琼
导　师: 申元英
学　校: 大理学院
专　业: 流行病与卫生统计学
关键词: 乙型肝炎病毒屠宰猪酶联免疫吸附试验聚合酶链式反应
分类号: R181.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 32次
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内容摘要

目的：采用血清学和分子生物学技术对屠宰生猪乙型肝炎五项和乙型肝炎病毒(HBV)DNA进行检测,以确定病毒感染的存在,了解猪HBV的感染情况及感染模式,探讨猪作为乙型肝炎病毒感染动物模型的可行性。方法：采集屠宰生猪血5ml×2管,统一编号,共收集标本283份,一管离心分离血清,获得血清标本234份,另一管加抗凝剂抗凝,用传统酚氯仿法提取白细胞中DNA,获得DNA提取液156份。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对血清中的HBV血清标志物(HBV maker,HBV-M,俗称“两对半”)进行检测,分别用S区和C区引物对血清和白细胞中HBV-DNA进行聚合酶链式反应(PCR)以检测HBV的感染情况。实验以人的“大三阳”血清作为阳性对照,使研究结果具有可比性。结果：(1)234份血清标本HBV血清标志物的检测结果：测得的血清标记物检测阳性结果按HBV血清标志物的常见组合可分为八种模式：组合模式1(HBsAg-HBeAg+和HBcAb+).组合模式2(HBsAg+、HBeAb+和HBcAb+)、组合模式3(HBsAg+、HBcAb+)、组合模式4(HBsAb+、HBeAb+和HBcAb+)、组合模式5(HBsAb+和HBcAb+)、组合模式6(HBsAb+)、组合模式7(HBeAb+和HBcAb-)组合模式8(HBcAb-)中所占百分比分别为0.43%(1/234)、0.85%(2/234)、2.99%(7/234)、0.43%(1/234)、26.07%(61/234)、2.99%(7/234)、15.38%(36/234)、34.19%(80/234)。血清标记物检测全阴性结果有39份,所占百分比为16.67%(39/234)。(2)血清HBV-DNA的PCR扩增结果：S区引物扩增阳性率3.4%(8/234),C区引物扩增阳性率20%(47/234)。(3)白细胞DNA提取液的HBV-DNA的PCR扩增结果：S区引物扩增阳性率10.9%(17/156),C区引物扩增,阳性率51.3%(80/156)。(4)白细胞中HBV-DNA的检出率高于血清HBV-DNA的检出率,二者差异有统计学意义(P<0.001)。(5)HBV-DNA的C区检出率高于S区检出率,二者差异有统计学意义。结论：(1)HBV在屠宰生猪中有较高的感染率,感染模式与人的感染模式类似(2)白细胞中HBV-DNA的检出率高于血清HBV-DNA的检出率(3) HBV-DNA的C区检测比S区检测更为敏感。

全文目录

1 中文摘要  4-6
2 英文摘要  6-8
3 前言  8-16
4 材料与方法  16-21
5 结果  21-25
6 讨论  25-29
7 结论  29-30
8 参考文献  30-33
9 附录Ⅰ 黄芪对小鼠免疫功能影响的实验研究  33-39
  参考文献  38-39
10 附录Ⅱ 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的研究进展  39-47
  参考文献  44-47
11 致谢  47

猪源乙型肝炎病毒的分子流行病学调查

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