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幽门螺杆菌中国菌株基因型分析

作　者: 傅见英
导　师: 姜葵
学　校: 天津医科大学
专　业: 内科学
关键词: 幽门螺杆菌 多位点序列分型 看家基因 vacA等位基因多态性 分子流行病学
分类号: R378
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：研究幽门螺杆菌（H. pylori）中国分离株的基因分型特征。方法：对分离自中国7个不同地区（北京、黑龙江、烟台、浙江、湖北、西安、云南）、不同胃、十二指肠相关疾病（慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、功能性消化不良）患者的119株H.pylori的7个看家基因（atpA, efp, mutY,ppa, trpC, urel和yphC）和毒力相关基因vacA,应用多位点序列分型（multilocus sequence typing, MLST）的方法获得菌株的等位基因谱（allelic profile）和序列型（sequnce type,ST）,与HP MLST数据库中世界范围内的菌株信息进行比较。应用软件BURST （Based Upon Related Sequence types）运算法则将菌株归为谱系（clonal complex）,应用软件START2 （Sequence Type Analysis and Recombinational Tests, version 2）计算相关系数（Index of Association, IA）,应用软件MEGA4.0（Molecular Evolutionary Genetics Analysis, version 4.0）构建进化树进行分子进化遗传分析。对vacA等位基因（sla, slb, s2, mla, mlb, m2, il和i2）进行特异引物聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）,根据扩增产物片段大小确定vacA基因型,对基因型分布应用SPSS13.0软件数据包进行统计学分析、并应用层级聚类分析软件Mev40 （Multiple Experiment Viewer, TIGR）进行聚类分析。结果：MLST共确定了107个序列型,都是HP MLST数据库中未曾报道过的。119株H.pylori菌株被分为3个谱系,其他均为独特型。START2重组分析显示,107个STs的IA为2.1398。MEGA4.0软件将119株中国菌株分布在3个祖先群。111株分布在hpEastAsia,6株分布在hpEurope,2株分布在hpAsia2。119株H.pylori vacA基因以sla,m2和i1型为主,分别为97.5%（116/119）,68.9%（82/119）和91.6%（109/119）。26.1%（31／119）为mlb。slb和mla未检出。vacA组合基因型以sla/m2/il为主（62.2%,74/119）,sla/mlb/il次之（25.2%,30/119）。不同地域、不同疾病来源菌株sla分布差异无统计学意义（P>0.05）。而m区基因多态性在疾病类型及分离地区间差异均有统计学意义（P<0.01）。不同疾病来源菌株间i区基因分型差异无统计学意义（P>0.05）,但不同分离地区菌株间差异有统计学意义（P<0.01）。119株H.pylori vacA基因序列聚类为三个不同组群。一株独在一个组群,8株在另一个组群,其余的菌株聚为一群。结论：本研究中H.pylori中国分离株绝大多数起源于hpEastAsia,很少部分属于hpAsia2（?）和hpEurope,尚未发现有起源于非洲的菌株。H.pylori中国分离株vacA基因型以sla m2 il组合型为主,sla分型结果与菌株分离地域及患者疾病类型无关。不同地域、不同疾病来源菌株m区基因分型不同。不同地域菌株vacA基因i区分型不同,但i区基因分型与菌株的疾病来源没有显著相关性。中国H.pylori菌株有一定的地域相关性,但疾病相关性不明显。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-9
缩略语/符号说明  9-11
前言  11-14
  研究现状、成果  11-12
  研究目的、方法  12-14
幽门螺杆菌中国菌株基因型分析  14-33
  1 对象和方法  14-24
    1.1 菌株来源  14-18
    1.2 主要实验试剂、试剂盒及溶液配制  18-19
    1.3 方法  19-24
  2 结果  24-27
    2.1 MLST结果  24-25
    2.2 vacA结果  25-27
  3 讨论  27-31
  4 小结  31-33
结论  33-34
参考文献  34-39
发表论文和参加科研情况说明  39-40
附录  40-50
综述 幽门螺杆菌多位点序列分型及其研究进展  50-58
  综述参考文献  55-58
致谢  58-59

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学） > 病原细菌
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