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激素对兔骨髓间充质干细胞神经递质表达的影响

作　者: 张鑫
导　师: 王义生
学　校: 郑州大学
专　业: 骨外科
关键词: 激素 股骨头坏死 神经递质 骨髓间充质干细胞 骨化
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


背景与目的：由于激素在临床上的广泛应用和医学水平的不断发展,激素所致的股骨头缺血性坏死(osteonecrosis of the femoral head, ONFH)表现出逐年增加趋势,现已占非创伤性股骨头坏死首位。但该病的确切发病机制现仍未完全清楚。近年来的研究发现,在骨髓腔中除了造血干细胞之外,还存在着一种具有多向分化潜能的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs),其在特定条件下能够分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞及神经细胞等,这种分化受多种神经递质的影响。已有实验证明大剂量激素不仅会诱导BMSCs向脂肪细胞分化,还能够影响骨内神经纤维中递质的表达,进而使组织的成骨及成血管作用下降,导致组织内骨细胞和血管的形成及修复能力降低,引起骨和血管组织的损伤以及凝血机制的改变,最终发生股骨头缺血性坏死。目前已有研究表明,激素能够影响动物体骨组织内神经递质在神经纤维中的表达,而本实验则主要通过体外分离培养兔BMSCs,以10-7mol/L地塞米松进行诱导,采用分子生物学检测方法,观察激素对BMSCs中多种神经递质或其受体表达的影响,以及这种影响与成骨分化的关系,从而进一步探讨激素性ONFH的发生机制。材料与方法：取兔四肢长骨骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养后,获得原代BMSCs,将传代培养的第3代间充质干细胞随机分为两组,实验组培养基中加入浓度为10-7mol/L地塞米松,对照组则正常培养。分别于诱导后第4,7,11,15天提取RNA,运用荧光定量PCR技术测定细胞中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrocyte growth factor, bFGF)、降钙素基因相关肽受体(calcitontin gene-related peptide receptor, CGRPR)、P物质受体(substance P receptor, SPR)、血管活性肠肽受体(vasoactive intestinal peptide receptor, VIPR)和成脂转录因子过氧化物酶体增殖子活化受体-Y(peroxisom proliferator-activeted receptor-γ, PPARy) mRNA表达,并在诱导第14天检测培养液中骨钙素(osteocalcin, OC)含量和细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性。结果：实验组内NGF、FGF、CGRPR、SPR、VIPR mRNA表达,以及ALP活性和OC含量均较对照组明显降低,而PPARγmRNA表达较对照组明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.01),而实验组在不同时间点间各因子进行比较却无明显差异(P>0.05)。结论：大剂量激素可导致BMSCs中具有成骨功能的神经递质或其受体表达下降,进而抑制成骨发生,这可能是激素性ONFH的发生机制之一

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-9
1 引言  9-10
2 材料与方法  10-17
3 结果  17-21
4 讨论  21-25
5 小结  25-26
6 参考文献  26-29
综述 激素性股骨头缺血性坏死研究新进展  29-49
  参考文献  42-49
英文缩写词表  49-50
个人简历  50
在学期间发表的学术论文与研究成果  50-51
致谢  51

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学 > 实验药理学
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