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能蛋水平对北京油鸡后期繁殖性能的影响及睾丸基因表达谱的建立

作　者: 王竹伟
导　师: 史兆国；陈继兰
学　校: 甘肃农业大学
专　业: 动物生产系统与工程
关键词: 能蛋水平北京油鸡繁殖性能数字基因表达谱无精症睾丸RNA 差异基因
分类号: S831.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 54次
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内容摘要

本研究是以50-58周龄北京油鸡种公鸡为试验样本,探讨地方种公鸡繁殖后期对精液品质的影响最佳的日粮能量、蛋白水平,并通过孵化试验进行进一步的验证。为更深入地研究影响精液品质的分子机理,本试验首次采用数字基因表达谱技术(DGE)对种公鸡无精睾丸和有精睾丸RNA样构建表达谱,对差异表达的基因进行初步的分析。试验一日粮能量、蛋白水平对种公鸡后期繁殖性能的影响。将99只50周龄北京油鸡种公鸡随机分为9个处理,每个处理11只鸡,分别饲喂能量(11.30MJ/kg、11.72 MJ/kg、12.14 MJ/kg)和蛋白(12%、14%、16%)3×3因子组合的9种日粮。试验结果显示,蛋白水平对生长性能和繁殖性能无显著影响(P>0.05),但精子活力随蛋白升高有降低的趋势;能量为12.14 MJ/kg时对采食量和精子活率有显著性影响(P<0.05);11.30MJ/kg-12%组的畸形率显著高于其它组(P<0.05);能量和蛋白之间有较强的互作,孵化验证试验显示11.72 MJ/kg-12%组的受精率、孵化率和健雏率较佳。北京油鸡种公鸡后期日粮蛋白水平为12%,能量水平为11.72 MJ / kg。试验二应用数字基因表达谱技术(DGE)建立种公鸡无精症睾丸基因表达谱,初步分析差异基因的表达和功能。本试验筛选一只不产精种公鸡和一只精液正常的种公鸡睾丸样本,提取睾丸RNA,建立表达谱,分析无精症和正常种公鸡睾丸基因的表达情况。结果显示,无精症睾丸和正常睾丸共有16379个基因存在表达差异,上调基因545个,下调基因202个。差异表达基因主要参与烟酸和烟酰胺的代谢、造血干细胞生成、细胞生成、细胞周期、细胞结构、Wnt信号通路、炎症反应等生物学通路。在正常睾丸样中与精子发生、蛋白代谢、线粒体结构、呼吸链组分和影响多种催化酶活性的基因高表达,这可能是精子正常生成的原因。在无精睾丸中与炎症反应、负向调控蛋白激酶、异常代谢、蛋白酶抑制剂活性等相关基因高表达,这些因素可能是导致精子生成障碍的原因。建立种公鸡无精症表达谱为进一步分析精子生成的分子机制和探究无精症的病因将会有所帮助。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-7
缩略词表  7-10
第一章文献综述  10-20
  1 种公畜繁殖性能的研究意义  10
  2 种公鸡繁殖性能营养学调控  10-12
    2.1 日粮能量对种公鸡繁殖性能影响的研究  11-12
    2.2 日粮蛋白质对种公鸡繁殖性能影响的研究  12
  3 精液品质的研究  12-14
    3.1 精子发生的机理  12-13
    3.2 精液品质  13-14
  4 无精症病因学研究  14-15
  5 数字基因表达谱  15-20
    5.1 数字基因表达谱的原理及流程  15-18
    5.2 数字基因表达谱技术与基因芯片技术的比较  18
    5.3 基因表达谱在精液品质研究中的应用  18-20
第二章不同日粮蛋能水平对北京油鸡后期繁殖性能的影响  20-34
  1 材料  20-21
    1.1 试验动物与饲养  20-21
    1.2 样品采集  21
    1.3 主要试剂  21
  2 试验方法  21-25
    2.1 日粮配方  21
    2.2 生产性能测定  21-23
    2.3 精液品质测定  23-24
    2.4 受精率  24-25
    2.5 孵化率和死胚日龄  25
    2.6 数据处理  25
  3 结果与分析  25-31
    3.1 日粮能量、蛋白水平对种公鸡体重和采食量的影响  25-26
    3.2 日粮能量、蛋白水平对精液品质的影响  26-27
    3.3 日粮能量、蛋白水平对孵化效果的影响  27
    3.4 日粮能量、蛋白水平对胚胎死亡日龄的影响  27-28
    3.5 相关性分析  28-31
  4 讨论  31-33
    4.1 日粮能量、蛋白水平对种公鸡体重和采食量的影响  31
    4.2 日粮能量、蛋白水平对种公鸡精液品质的影响  31-32
    4.3 日粮能量、蛋白水平对孵化结果的影响  32-33
  5 小结  33-34
第三章种公鸡无精症睾丸基因表达谱的建立及分析  34-46
  1 材料  34-35
    1.1 试验动物与饲养  34
    1.2 样本采集  34
    1.3 主要试剂及仪器  34-35
  2 试验方法  35-38
    2.1 睾丸样的采集  35
    2.2 睾丸总 RNA 的提取及质量检测  35-36
    2.3 数字基因表达谱的建立  36-38
  3 结果  38-42
    3.1 样本处理结果  38-39
    3.2 差异表达分析  39
    3.3 Pathway 分析结果  39-41
    3.4 GO 功能富集分析结果  41-42
  4 讨论  42-45
    4.1 DGE 的建立和分析  42-43
    4.2 表达差异基因结果分析  43
    4.3 Pathway 结果分析  43-44
    4.4 GO 结果分析  44-45
  5 小结  45-46
第四章结论  46-47
参考文献  47-52
致谢  52-54
作者简介  54-55
导师简介  55-57

能蛋水平对北京油鸡后期繁殖性能的影响及睾丸基因表达谱的建立

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