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基于电化学生物传感器测定植物激素IAA的研究

作　者: 黄乐宁
导　师: 肖浪涛
学　校: 湖南农业大学
专　业: 植物学
关键词: β-3-吲哚乙酸 酶传感器 硫堇 酵母细胞 免疫传感器
分类号: TP212.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 56次
引　用: 1次
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内容摘要


β-3-吲哚乙酸(IAA)是一种重要的植物激素,对植物生长发育具有重要的调控作用。它在植物体内含量极低,易被热解、光解和氧化,因此研究高效精确、操作便捷的植物激素测定新方法对IAA的相关研究和应用具有非常重要的意义。本文利用电化学方法构建了两种检测IAA的生物传感器,主要结果如下：1、应用酶传感器方法,将辣根过氧化物酶(HRP)固定到电极表面,构建了基于硫堇电聚合膜修饰的IAA电化学酶传感器。其工作原理是：HRP与IAA发生氧化还原反应,并由转换器转化为可以被测定的电信号,从而测定IAA的含量。试验结果表明,该传感器响应电流与IAA浓度在1ng·mL-1-30ng·mL-1范围内呈良好线性关系,该线性方程为y=0.0425x+3.5107,相关系数R2为0.9989。酶传感器检测下限为0.1ng·mL-1。2、应用免疫传感器方法,将IAA抗体吸附在固体电极表面,构建了基于酵母细胞活体固定抗体的电化学免疫传感器。其工作原理是：IAA抗体与IAA发生特异性结合而产生了一系列电活性物质,由电极电位使该活性物质发生电子转移而产生可以检测的电流。试验结果表明,免疫响应电流差值在IAA浓度为1ng·mL-1-125ng·mL-1范围内时线性关系良好,该线性方程为y=0.0395x+0.6499,相关系数R2为0.9976,检测下限为0.05ng·mL-1,这是一种准确快速检测IAA的新方法。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-9
第一章 前言  9-18
  1 植物激素测定方法  10-14
    1.1 传统植物激素测定方法  10-12
      1.1.1 传统生物试法  10
      1.1.2 传统理化检测方法  10-11
      1.1.3 电化学方法  11
      1.1.4 免疫检测方法  11-12
    1.2 生物传感器  12-14
      1.2.1 酶传感器  13
      1.2.2 免疫传感器  13-14
  3 生物识别分子的固定化技术  14-16
    3.1 常用固定化材料  14-15
      3.1.1 天然高分子载体  14
      3.1.2 有机聚合物材料  14-15
      3.1.3 无机材料  15
      3.1.4 常用交联剂  15
    3.2 常用固定化方法  15-16
      3.2.1 吸附法  15
      3.2.2 包埋法  15-16
      3.2.3 共价键合法  16
      3.2.4 交联法  16
  4 本论文主要研究思路  16-18
第二章 基于硫堇聚合膜修饰的植物激素吲哚乙酸电化学酶传感器的研究  18-28
  1 引言  18-19
  2 材料与方法  19-20
    2.1 仪器与试剂  19
    2.2 试验内容  19-20
      2.2.1 电极预处理  19
      2.2.2 酶传感器的制备  19-20
      2.2.3 循环伏安法检测电流  20
  3 试验结果与分析  20-26
    3.1 工作电极的选择  20-22
    3.2 电聚合硫堇膜  22
    3.3 电聚合不同化学物质的比较  22-23
    3.4 检测条件的优化  23-25
      3.4.1 工作底液的pH值  24
      3.4.2 固定HRP酶的温育时间  24-25
      3.4.3 HRP酶温育固定的温度  25
    3.5 标准工作曲线的制作  25-26
  4 结论  26-28
第三章 基于酵母细胞(活体)定向固定抗体测定IAA的电化学免疫传感器的研究  28-39
  1 引言  28-29
  2 材料与方法  29-32
    2.1 试剂与仪器  29
    2.2 试验内容  29-32
      2.2.1 电极预处理和自组装半胱胺  29-30
      2.2.2 免疫传感器界面的构建  30-31
      2.2.3 循环伏安法检测  31-32
  3 结果与分析  32-38
    3.1 基于活体酵母细胞的固定方法  32-33
    3.2 试验条件的优化  33-36
      3.2.1 IAA抗体pH值  33-34
      3.2.2 酵母细胞吸附固定IAA抗体的时间  34
      3.2.3 IAA抗体的浓度  34-35
      3.2.4 固定酵母细胞的浓度  35-36
      3.2.5 固定酵母细胞的时间  36
    3.3 标准工作曲线的绘制  36-38
  4 结论  38-39
全文总结  39-40
参考文献  40-46
致谢  46-47
作者简介  47

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中图分类: > 工业技术 > 自动化技术、计算机技术 > 自动化技术及设备 > 自动化元件、部件 > 发送器（变换器）、传感器 > 生物传感器、医学传感器
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