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桃花粉育性与果实性状的关系及花粉育性基因的定位

作　者: 赵恺
导　师: 张立彬；曹后男
学　校: 延边大学
专　业: 果树学
关键词: 大久保桃 花粉育性 果实性状 SSR标记 基因定位
分类号: S662.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 110次
引　用: 2次
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内容摘要


桃的花粉育性是影响果实丰产、稳产的一个重要指标。生产实践中普遍反映花粉不育类型的口味和品质更好一些。针对此现象，本试验以河北省主产的桃品种-大久保桃的3612株自交群体为试验材料，研究了桃花粉可育、不育群体在果实其它性状上的相关性，并用SSR标记对花粉育性基因进行了初步定位，所研究结果如下：以3612株自交群体为研究背景，经分析发现，不育组的平均单果重、可溶性固形物含量及果实成熟期天数等都显著高于可育组的平均数值，花粉育性与果实含酸量关系不大。以上结论可以说明花粉不育类型的桃树在口味和品质上更容易让消费者接受，从而为今后的育种工作提供了理论依据。经x2检验，大久保桃的花粉育性性状及粘离核性状符合3：1的分离比例，基因型分别为Psps和Ff。以改良CTAB法并加以纯化后所提取的基因组DNA，经质量与纯度检测可以满足SSR分析的需要。用正交试验建立了桃SSR-PCR反应体系，即在25μL各组分浓度分别为1×PCR Buffer、Taq DNA聚合酶2 U、MgCl2浓度2 mmol／L、模板DNA80 ng、dNTPs 240-360μmol／L、每个特异引物各0.4μmol／L，余下用已灭菌的去离子水补足。PCR反应程序为：94℃预变性5 min；94℃变性1 min、53℃退火30s、72℃延伸1 min，35个循环；最后72℃延伸5 min；4℃保存备用。在所选用的总计9对SSR引物中，只有UDP98-416和UDP96-001两对引物所扩增出的三个标记与花粉育性基因存在连锁关系。三个标记中标记UDP98-416-460bp与花粉育性基因（Psps）的遗传距离最近，为5cM，所以，可用于花粉育性的早期鉴定、UDP98-416-95bp与花粉育性基因（Psps）的遗传距离是8cM、UDP96-001-120bp与花粉育性基因（Psps）的遗传距离为12cM。由于UDP98-416-95bp与UDP98-416-460bp两个标记分别位于Ps／ps基因位点的两侧，且两者之间的遗传距离为13 cM，小于20cM，因此当这两个标记同时使用时可用于花粉育性性状的早期鉴定上。

全文目录


摘要  7-8
Abstract  8-9
前言  9-19
  一 桃主要经济性状的遗传规律  9-12
  二 分子标记的种类与原理  12-16
  三 分子标记技术在桃基因定位上的应用  16-19
一 材料与方法  19-27
  1.1 材料  19
    1.1.1 试验材料  19
    1.1.2 所用测定工具、药品及仪器  19
  1.2 方法  19-27
    1.2.1 桃果实性状的测定方法  19-22
      1.2.1.1 花粉育性的判定  19-20
      1.2.1.2 果实成熟期的测定  20
      1.2.1.3 果实平均单果重的测定  20-21
      1.2.1.4 可溶性固形物含量的测定  21
      1.2.1.5 果实含酸量的测定  21
      1.2.1.6 果实粘离核的判定  21
      1.2.1.7 统计方法  21-22
    1.2.2 桃SSR分子标记相关的研究方法  22-24
      1.2.2.1 基因组DNA的提取及纯化  22
      1.2.2.2 基因组DNA纯度和浓度的检测  22-23
      1.2.2.3 SSR反应体系参数的设置  23-24
      1.2.2.4 适合退火温度的确定  24
    1.2.3 凝胶电泳分析及连锁图谱的构建  24-27
      1.2.3.1 制胶及电泳程序  24-25
      1.2.3.2 银染流程  25
      1.2.3.3 局部连锁图谱的构建  25-27
二 结果与分析  27-38
  2.1 大久保桃自交后代群体花粉育性与果实性状间的关系  27-28
    2.1.1 果实平均单果重与花粉育性间的关系  27
    2.1.2 可溶性固形物含量与花粉育性的关系  27-28
    2.1.3 成熟期与花粉育性的关系  28
    2.1.4 果实含酸量与花粉育性的关系  28
  2.2 大久保桃花粉育性及粘离核的基因型分析  28-29
  2.3 桃基因组DNA的提取和纯化  29-30
  2.4 桃SSR反应体系的建立  30-35
    2.4.1 桃SSR反应体系的初步建立  30-31
    2.4.2 Mg~(2+)与Taq DNA聚合酶交互作用对SSR反应体系的影响  31-32
    2.4.3 引物与模板DNA交互作用对SSR反应体系的影响  32
    2.4.4 dNTPS对SSR反应体系的影响  32-33
    2.4.5 退火温度的设置及特异性位点的检测  33-35
  2.5 桃花粉育性基因的定位  35-38
三 讨论  38-41
  3.1 桃果实部分遗传性状的研究与应用  38-39
  3.2 桃基因组DNA的提取与SSR反应体系的优化  39
  3.3 桃花粉育性基因的定位  39-41
四 结论  41-42
致谢  42-43
参考文献  43-48
附表:桃果实性状调查表  48-62

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 核果类 > 桃
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