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越橘果实中花色苷的提取分离、定量和结构鉴定研究

作　者: 孟凡丽
导　师: 李亚东
学　校: 吉林农业大学
专　业: 果树学
关键词: 越橘花色苷定量分析分离鉴定
分类号: TQ28
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
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内容摘要

本文对杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium SPP．)植物越橘果实所含花色苷的提取、定量和分离鉴定进行了研究。结果表明：越橘果实中普遍存在花色苷类物质，而且含量较高。有关资料报道：越橘果实所含的花色苷可以消除眼睛疲劳，增加视力；而且具有降低胆固醇、抑制脂蛋白氧化、抗氧化、抗衰老、抗溃疡、抗炎和抗癌等生理功能及显著的药用功能。本文以开发利用越橘资源、探明越橘花色苷主要成分为目的，对其进行研究，并为越橘花色苷提取分离的产业化生产提供新方法。高效液相色谱法(HPLC)是一种非常准确的定量分析方法。四种对照品分别用0.1％的HCl甲醇：水=1：4溶液溶解后用高效液相色谱法进行分析测定。液谱的具体分析条件是：流动相A：甲醇；B：10％甲酸；流速：1.0mL／min；柱温：25℃；检测波长：520nm、517nm、530nm、525nm；梯度洗脱：0-25min，B溶液5％-60％；20-25min，B溶液60％-100％；25-30min，100％B溶液。最后结果：对照品矢车菊色素-3-葡萄糖(CY-3-GLC)的线性范围在0.018-0.030 g、矢车菊色素-3-半乳糖(DI-CH)的线性范围在0.160-0.800 g、二甲基翠雀色素-3-葡萄糖(OE-CH)的线性范围在0.044-0.440 g、二甲基翠雀色素-3-半乳糖(MA-GA)的线性范围在0.224-0.112 g。均呈良好的线性关系，四种对照品平均回收率分别为98.58％、96.34％、95.45％、97.93％。回收率均在90％以上，说明此方法可行，准确度较高。用此相同条件分析测定5个样品中4种花色苷的含量和各样品总花色苷含量。用色价法、高效液相色谱法(HPLC)对越橘果实中所含的花色苷进行定量分析。先用色价法粗略比较红豆越橘、笃斯越橘、Chignecto、CA-206、NB-3越橘果实中花色苷含量的差异及用不同溶剂浸提同一越橘果实中花色苷含量的方法差异；再用RP-HPLC精确测定这五个样品中4种花色苷(矢车菊色素-3-葡萄糖；矢车菊色素-3-半乳糖；二甲基翠雀色素-3-葡萄糖和二甲基翠雀色素-3-半乳糖)的含量和各样品总花色苷含量。两种方法所得结果一致，5个样品总花色苷含量由高到低依次为：Chignecto、CA-206、NB-3、笃斯越橘、红豆越橘。其相应总花色苷含量分别为725.413 mg／100g鲜果、357.224 mg／100g鲜果、350.380mg／100g鲜果、343.669 mg／100g鲜果、147.759 mg／100g鲜果。而且五个样品果实所含花色苷的种类和含量不同。其中矢车菊色素-3-半乳糖苷是普遍存在的一种花色苷，而花色苷矢车菊色素-3-葡萄糖不存在于笃斯越橘和红豆越吉林农业大学硕士学位论文越橘果实中花色昔的提取分离、定量和结构鉴定研究橘果实中，红豆越橘果实中只含四种花色普的一种。因此，不同种、品种越橘的基因型差异导致其果实中所含花色普种类及含量的不同。为了研究越橘花色普的提取分离工艺，以红豆越橘为样本，进行分离。在恒温水浴(60℃)条件下用85%乙醇浸提3小时，浓缩。将乙醇所得浓缩液流过NKA一12大孔吸附树脂层析柱，利用水和30%、50%、90%的乙醇溶液进行梯度洗脱、提纯;将30%乙醇所得溶液浓缩后再过聚酞胺层析柱，并用同样的方法进行梯度洗脱。最后从30%乙醇的浓缩液中获单体化合物I。对单体化合物工进行物化性质分析:熔点为1 81、182℃;溶于水，易溶于甲醇，难溶于丙酮的黑红色粉末。用薄层层析法、高效液相色谱法、质谱法和核磁共振法鉴定化合物为矢车菊色素一3一半乳糖(Cyanidine一3一gaiaetoside)，系统命名为:2一3‘，遵‘一二夯基苯基一5，7一二夯基并毗喃一3一。一p一D一半乳糖普。分子量:499;分子式为:CzlHzloll。本文对提取和分离越橘果实中所含的花色谷有效成分提供了科学的依据，并为深入开发、利用越橘资源，尤其是对其花色普的产业化生产提供新方法.将有助于进一步创造经济效益和社会效益。

全文目录

中文摘要  7-9
英文摘要  9-11
前言  11-18
1 越橘花色苷定量分析  18-30
  1.1 实验材料  18
  1.2 仪器和试剂  18
  1.3 定量分析试验方法  18-21
    1.3.1 色价法定量分析  18-19
      1.3.1.1 色价法分析依据  18
      1.3.1.2 不同溶液浸提越橘果实的比较试验  18-19
      1.3.1.3 不同样品果实浸提色价值比较  19
    1.3.2 RP-HPLC法定量分析  19-21
      1.3.2.1 对照品来源  19
      1.3.2.2 色谱条件的选择  19-20
      1.3.2.3 对照品溶液的制备  20
      1.3.2.4 供试品溶液的制备  20
      1.3.2.5 对照品花色苷保留时间考察  20
      1.3.2.6 线性关系的考察  20
      1.3.2.7 回收率试验  20
      1.3.2.8 各样品花色苷含量测定  20-21
      1.3.2.9 各样品花色苷总量测定  21
  1.4 结果与分析  21-30
    1.4.1 不同溶液浸提越橘果实测的的色价值  21-22
    1.4.2 不同样品果实浸提测的色价值  22-23
    1.4.3 用RP-HPLC法测得不同对照品的保留时间  23
    1.4.4 RP-HPLC法的线性关系  23
    1.4.5 RP-HPLC法回收率试验结果  23-24
    1.4.6 各样品中花色苷含量的测定结果  24-25
    1.4.7 各样品花色苷总含量测定结果  25-30
2 红豆越橘花色苷提取、分离及结构鉴定  30-41
  2.1 材料、试剂与仪器  30-31
    2.1.1 试验材料  30
    2.1.2 仪器  30
    2.1.3 化学试剂  30-31
  2.2 红豆越橘花色苷的提取分离  31-32
  2.3 化合物的Ⅰ分析和鉴定  32
    2.3.1 理化性质分析  32
    2.3.2 薄层层析鉴定  32
    2.3.3 RP-HPLC法鉴定  32
    2.3.4 质谱鉴定  32
    2.3.5 核磁共振鉴定  32
  2.4 化合物Ⅰ分析鉴定结果  32-41
    2.4.1 理化性质  32-33
    2.4.2 薄层层析分析结果  33
    2.4.3 RP-HPLC法分析鉴定结果  33
    2.4.4 质谱分析鉴定结果  33
    2.4.5 核磁共振分析鉴定结果  33-41
3 讨论  41-45
  3.1 不同溶液浸提越橘果实所含花色苷的比较  41
  3.2 关于越橘不同基因型花色苷的种类和含量  41-43
  3.3 花色苷含量的测定方法  43-44
  3.4 关于红豆越橘花色苷单体分离和结构鉴定  44-45
4 小结  45-48
  4.1 不同溶液浸提比较试验结果  45
  4.2 定量分析结果  45-46
  4.3 提取分离结果  46-47
  4.4 结构鉴定结果  47-48
参考文献  48-52
致谢  52

越橘果实中花色苷的提取分离、定量和结构鉴定研究

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