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HCPT、PYM单独及联合应用对人舌癌Tca8113细胞活性及端粒酶的影响

作　者: 陈鹏
导　师: 雷德林
学　校: 中国人民解放军第四军医大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 端粒酶 舌癌 羟基喜树碱
分类号: R739.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
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内容摘要


舌癌（carcinoma of the tongue）的发病率约为0.6／10万，在口腔癌中居首位。舌癌较多发生淋巴结转移，高达60％-80％，晚期可发生远处转移，一般多采用综合治疗，而化疗在其中有着不可替代的作用。羟基喜树碱（hydroxycamptothecin，HCPT）是由我国特有的珙桐科植物喜树的根、皮和果实中提取的生物碱，该碱可直接破坏DNA，并对DNA的合成有抑制作用，主要作用与S期细胞，并对G2／M边界有延缓作用，为细胞周期特异性药物。 本研究应用MTT法，软琼脂克隆形成试验，流式细胞术，形态学观察，端粒重复扩增反应法等探讨和研究了HCPT和平阳霉素（Pingyangmycin，PYM）单独和联合用药对舌癌Tca8113细胞的生长及端粒酶活性的抑制作用。主要实验结果如下： 1．采用MTT法研究羟基喜树碱、平阳霉素、顺柏（Cisplatin，DDP）三种药单独和两两联合应用对Tca8113细胞的生长抑制作用，结果发现HCPT对Tca8113细胞在体外有很好的生长抑制作用且和平阳霉素联合应用效果最佳。两者单独及联合应用96h时，其最佳IC30分别为PYM 416ng／ml、HCPT109ng／ml、PYM+HCPT（100+35ng／ml），RAA值分别为2、12和（60+39）。 2．用HCPT和PYM单独及联合应用的IC30作用于细胞，可见：（1）细胞生长速度减慢，群体倍增时间延长（对照组28.4h、PYM组35.1h、HCPT组42.1h、PYM+HCPT组52.6h）；（2）克隆形成率降低（对照组31.7％、PYM组15.3％、HCPT组11.6％、PYM+HCPT组4.0％）；（3）HCPT组及联合应用组细胞周期发生明显变化，S期、G2期细胞比例明显增加；（4）细胞形态及超微结构出现明显变化，巨核和多核细胞明显增加，空泡样变增多，细胞退行性变；（5）细胞端粒酶活性降低（对照组1.87±0.12、PYM组0.77±0.08、 第四军医大学硕士学位论文HCPT组0．8 3土0．04、PYM＋HCPT组0．54土0．07）。3．应用HCPT的IC；。浓度作用于细胞24h、48h、72h、96h，检测细胞端粒酶活性，发现从48h起端粒酶活性开始明显下降，且有一定的浓度、剂量依赖性。 上述结果表明：HCPT在体外对舌癌TCC8113细胞林有8阶的抗癌活性，且以和NM联用效果最佳。HCPT和NM均可降低细胞的端粒酶活性，这可能是其发挥抗肿瘤作用的靶点之一。综上所述，HCPT可能在II＄床上治疗舌癌会有良好的前景；对于端粒酶的进一步研究有助于进一步了解化疗药的抗癌机理，开发新的以抑制肿瘤端粒酶活性为靶的化疗药物及发展化疗敏感性检测的新方法。

全文目录


常用缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
文献回顾  10-22
前言  22-23
实验部分  23-50
  实验一 HCPT、PYM、DDP单独及两两联合应用对Tca8113细胞生长抑制的量效实验  23-33
  实验二 HCPT、PYM以及二者联合应用对Tca8113细胞生长的抑制作用  33-40
  实验三 HCPT、PYM以及二者联合应用对Tca8113细胞形态学的影响  40-44
  实验四 HCPT、PYM以及二者联合应用对Tca8113细胞端粒酶活性的影响  44-48
  实验五 HCPT对Tca8113细胞端粒酶活性影响的时-效关系  48-50
全文总结  50-51
参考文献  51-55
致谢  55-56
个人简历  56-57
附图  57-61

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 口腔、颌面部肿瘤
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