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生长分化因子9基因多态性及其与小尾寒羊高繁殖力关系的研究

作　者: 李碧侠
导　师: 王金玉；储明星
学　校: 扬州大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 小尾寒羊生长分化因子9基因单链构象多态性繁殖性状
分类号: S826
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
下　载: 80次
引　用: 1次
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内容摘要

生长分化因子9(GDF-9)基因是由卵母细胞分泌的一种生长因子，它对早期卵泡的生长和分化起着重要的作用。本研究分析了生长分化因子9基因的多态性，探索该候选基因与小尾寒羊高繁殖力之间的关系，为我国开展小尾寒羊高繁殖力的遗传学基础研究提供科学依据。应用PCR—SSCP技术对两组样本进行生长分化因子9基因多态性分析。一组为130只有产羔记录的小尾寒羊血样；另一组为四个无产羔记录的绵羊品种血样(湖羊、小尾寒羊、萨福克羊和多赛特羊)。得到如下结果：在有产羔记录的小尾寒羊中，两对引物扩增片段出现两种基因型(AA和AB)。在湖羊和多赛特羊中，两对引物扩增片段均出现两种基因型(AA和AB)；在萨福克羊中，引物1扩增片段出现3种基因型(AA、AB和BB)，引物2扩增片段出现两种基因型(AA和AB)；而在无产羔记录的小尾寒羊中，没检测到突变基因型，并且两对引物扩增片段在四个不同绵羊品种间均达到极显著水平(P＜0.01)。经X~2适合性检验，四个绵羊品种扩增片段均处于Hardy-Weinberg平衡状态。对引物1扩增片段的突变序列进行克隆和测序分析，结果表明，在外显子1的第152处碱基由A突变成G，将该基因的突变和正常核苷酸测序结果分别翻译成氨基酸序列，利用TFSEARCH ver 1.3软件进行同源性比较，发现突变碱基引起了氨基酸由N(天冬酰胺)突变为D(门冬氨酸)。蛋白质二级结构预测表明，氨基酸的突变引起了二级结构的改变，由旋管变成a-螺旋，并且该氨基酸下游有两个氨基酸二级结构发生变化，H、L也由旋管变成a一螺旋。在有产羔记录的小尾寒羊中，各扩增片段与繁殖性状的最小二乘分析结果表明，引物1扩增片段对小尾寒羊第一胎产羔数的影响达到0.05显著水平，对第二胎产羔数的影响达到0.01显著水平;引物2扩增片段对小尾寒羊第一胎和第二胎产羔数的影响未达到显著水平。本研究中发现的引物1扩增片段多态性可能与繁殖性状有关，但还需进一步研究。

全文目录

中文摘要  2-4
Abstract  4-8
1 前言  8-13
  1.1 小尾寒羊的研究进展  8-9
  1.2 生长分化因子9(GDF-9)基因的研究进展  9-12
  1.3 本研究的目的和意义  12-13
第一部分  13-22
  2 绵羊生长分化因子9(GDF-9)基因的多态性检测  13-22
    2.1 实验材料  13
    2.2 实验步骤  13-17
    2.3 结果  17-19
      2.3.1 基因组提取结果  17
      2.3.2 PCR扩增结果  17-18
      2.3.3 PCR-SSCP多态性检测结果  18-19
    2.4 讨论  19-22
第二部分  22-29
  3 生长分化因子9(GDF-9)基因部分序列的克隆分析  22-29
    3.1 实验步骤  22-26
    3.2 结果  26-28
      3.2.1 阳性克隆鉴定结果  26
      3.2.2 GDF-9基因部分序列及其同源性分析  26-27
      3.2.3 氨基酸序列同源性比较  27
      3.2.4 氨基酸二级结构的预测  27-28
    3.3 讨论  28-29
第三部分  29-36
  4 绵羊GDF-9基因(型)频率分析及其与小尾寒羊高繁殖力关系的研究  29-35
    4.1 方法  29-31
    4.2 结果  31-34
      4.2.1 无产羔记录的四个品种绵羊GDF-9基因(型)分析  31-32
      4.2.2 Hardy-Weinberg平衡检验  32
      4.2.3 有产羔记录的小尾寒羊基因(型)频率分析  32-33
      4.2.4 两对引物扩增片段与繁殖性状的最小二乘分析  33-34
    4.3 讨论  34-35
  5 结论  35-36
参考文献  36-39
致谢  39-40
攻读学位论文期间发表的学术论文目录  40

生长分化因子9基因多态性及其与小尾寒羊高繁殖力关系的研究

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